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本发明提供了一种双sgRNA无痕基因编辑质粒及其制备方法和应用，所述质粒包括Cas9蛋白表达框和双sgRNA表达框；所述双sgRNA包括宿主基因编辑sgRNA和质粒基因编辑sgRNA。本发明设计含有双sgRNA的质粒对宿主进行基因编辑，所述...
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