一种特异性的DNA病毒基因组定点改造及筛选方法技术

技术编号：9986818 阅读：201 留言：0更新日期：2014-05-01 15:10

本发明专利技术提供了一种特异性的DNA病毒基因组定点改造及筛选方法，如下：一、构建定点切割单链、双链核酸酶系统及同源序列；二、导入定点切割单链核酸酶系统和同源序列的细胞感染DNA病毒，待细胞病变，收集P1子代病毒；三、导入定点切割双链核酸酶系统的细胞感染P1子代病毒，待细胞病变，收集P2子代病毒；最后从P2子代病毒中分离纯化获得目的子代病毒。上述二为病毒基因组同源重组步骤，在不引入随机突变的情况下，提高病毒基因组同源重组效率约十万倍；上述三为特异性扩增步骤，进一步提高特异性突变病毒在子代病毒中的比例约十倍左右。本发明专利技术能有效控制突变类型，并快速方便地筛选获得具有特定突变、缺失或插入的重组病毒。