用shRNA有效干扰家蚕CREB基因表达的方法技术

技术编号：9986817 阅读：127 留言：0更新日期：2014-05-01 15:10

本发明专利技术涉及一种有效干扰家蚕CREB基因表达的方法。该方法的具体步骤为：将干扰家蚕CREB基因表达的靶序列与家蚕的U6启动子插入pMD18T载体，构建适合在家蚕中表达的pMD18T-U6-shRNA质粒，将该质粒用脂质体转染方法转染家蚕卵巢细胞系（BmN）71～73小时后，用Westernblot方法检测CREB蛋白表达量。用CREB基因的5’-GGTGCAGTCTGTTATTCAACCT-3’构建的shRNA干扰质粒能使的家蚕CREB蛋白的表达量下降50%以上。发明专利技术从技术层面为利用shRNA方法下调CREB基因表达提供了有效的靶点。