调节性T细胞表位、组合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及T细胞表位，其中所述表位包含的肽或多肽链包含至少一部分免疫球蛋白恒定或可变区。本发明专利技术还涉及使用本发明专利技术表位的方法以及制备本发明专利技术表位的方法。

【技术实现步骤摘要】
调节性T细胞表位、组合物及其用途本申请为分案申请，原申请的申请日为2008年1月29日，申请号为200880011016.5，专利技术名称为“调节性T细胞表位、组合物及其用途”。专利
本专利技术广泛涉及新颖种类的T细胞表位组合物(称作“Tregitopes”)。本专利技术提供Tregitope组合物、其制备方法和用途。专利技术背景人工诱导对自身或外源抗原的耐受是治疗自身免疫、移植变态反应和其他疾病的目标，并且在用自体蛋白和非-自体蛋白的疗法中也是需要的。直至最近，治疗性耐受诱导依赖于可引起细胞排除(celldepletion)和细胞因子特性改变的基础广泛的方法。这些基础广泛的方法一般会减弱免疫系统并使许多受试者易于患机会感染、自身免疫攻击和癌症。本领域需要侵袭性较低并且更具靶向性的方法诱导免疫耐受。免疫耐受由T细胞、B细胞、细胞因子和表面受体之间的复杂相互作用调节。最早的自我／非我辨别发生在新生儿发育过程中的胸腺，其髓质上皮细胞表达对未成熟T细胞的特异自身蛋白表位。以高亲和性识别自身抗原的T细胞被清除，但是具有中等亲和性的自身反应性T细胞可免于被清除并且可转化成所谓的“天然”调节性T细胞(TReg)。这些天然TReg细胞被运输至外周并提供对自身免疫的长久抑制。第二种形式的耐受发生在外周，其中成熟T细胞在IL-10和TGF-β存在下经它们的T细胞受体活化转化成“适应性”TReg表型。这些适应性TReg细胞的可能作用包括成功清除入侵病原体后缓冲免疫应答作为控制变态反应或低水平慢性感染可能引起的过度炎症反应的方法，或可能辅助有益的共生细菌和病毒的共存。“适应性”TReg也可在控制经历了体细胞超突变的人抗体的生存周期中发挥作用。天然调节性T细胞是外周免疫调节的重要组分。经它们的TCR活化后，天然Tregs可经接触依赖型和非依赖型机制抑制对不相关抗原的旁观者效应T细胞应答。此外这些细胞释放的细胞因子包括IL-10和TGF-β可诱导抗原特异性适应性Tregs。尽管已做出了大量努力，除少数例外，天然Tregs并且更重要的在具有临床意义的体积中循环的天然Tregs的特异性仍是未知。本领域需要鉴别包含在普通自体蛋白例如IgG(“Tregitopes”)中的调节性T细胞表位以及与它们制备相关的方法和用途。概述本专利技术利用调节性T细胞(TReg)尤其是已在外周调节对外源和自身蛋白的免疫应答的那些细胞(预存或天然TReg)的功能。在一方面本专利技术提供T-细胞表位多肽组合物。通过使用Tregitopes和Tregitope-抗原融合物选择性黏附和活化预存天然TReg作为治疗以不想要的免疫应答存在为标志的任何疾病或症状的手段具有治疗价值。实例包括以下：自身免疫疾病例如I型糖尿病、MS、狼疮和RA；移植相关病症例如移植物抗宿主疾病(GVHD)；变态反应；生物药物例如单克隆抗体，替代蛋白例如FVIII或胰岛素，治疗性毒素例如肉毒杆菌毒素的应用引起的免疫排斥；以及对急性或慢性传染病免疫应答的控制。在一个实施方案中，本专利技术涉及T-细胞表位多肽组合物，其包括至少一种选自SEQIDNOS：4-58的多肽。在具体的实施方案中，本专利技术涉及包括本专利技术多肽和药学可接受载体的药用组合物。在一个实施方案中本专利技术涉及编码至少一种选自SEQIDNOS：4-58的T-细胞表位多肽的核酸。在具体的实施方案中，本专利技术涉及包括本专利技术核酸的载体。在另一实施方案中，本专利技术涉及包括本专利技术载体的细胞。在一个实施方案中本专利技术涉及治疗或预防有需要的受试者中医学病症的方法，其包括给予治疗有效量的选自SEQIDNOS：4-58的T-细胞表位多肽。在具体的实施方案中，该医学病症选自：变态反应、自身免疫疾病、移植相关疾病、移植物抗宿主疾病、酶或蛋白质缺乏症、凝血障碍、癌症、不育；以及病毒、细菌或寄生虫感染。在一个实施方案中本专利技术涉及预防或治疗受试者医学病症的试剂盒，其中该试剂盒包括至少一种选自SEQIDNOS：4-58的T-细胞表位多肽。在一个实施方案中，本专利技术涉及扩增调节性T细胞群的方法，其包括：(a)提供受试者的生物样品；(b)从生物样品中分离调节性T-细胞；以及将分离的调节性T-细胞与有效量的本专利技术Tregitope组合物在T-调节性细胞数量增加形成扩增的调节性T-细胞组合物的条件下接触，藉此扩增生物样品中的调节性T-细胞。在一个实施方案中，本专利技术涉及刺激生物样品中调节性T-细胞的方法，其包括：(a)提供受试者的生物样品；(b)从生物样品中分离调节性T-细胞；以及将分离的调节性T-细胞与有效量的本专利技术Tregitope组合物在T-调节性细胞被刺激以改变一种或多种生物学功能的条件下接触，藉此刺激生物样品中的调节性T-细胞。在一个实施方案中本专利技术涉及抑制受试者中免疫应答的方法，其包括给予受试者包括治疗有效量的包括Tregitope的肽的组合物，其中该肽抑制免疫应答。在具体的实施方案中，该肽抑制效应T细胞应答。在具体的实施方案中，该肽抑制辅助T细胞应答。在另一实施方案中，该肽抑制B细胞应答。在一个实施方案中，本专利技术涉及通过给予治疗有效量的包括一种或多种Tregitopes的组合物抑制受试者中抗原特异性免疫应答的方法，其中一种或多种Tregitopes与特异目标抗原或共价结合、或非共价结合或混合，引起对该目标抗原的免疫应答降低。在具体的实施方案中，抑制作用由天然Treg介导。在另一实施方案中，该抑制作用由适应性Treg介导。在另一实施方案中，该肽抑制效应T细胞应答。在另一实施方案中，该肽抑制辅助T细胞应答。在另一实施方案中，该肽抑制B细胞应答。在具体的实施方案中，该肽包括选自SEQIDNOS：4-58的序列。在一个实施方案中。本专利技术涉及增强疫苗递送载体免疫原性的方法，其包括鉴别和去除调节性T细胞表位。在具体的实施方案中该T细胞表位选自SEQIDNOS：4-58。附图简述图1为免疫球蛋白G(IgG)的示意图。图2为比较加帽和不加帽肽的一系列图解表示。用单独(上图)的CEF(阳性对照肽库)、CEF+Tregitope289-酰胺(中图)或CEF+Tregitope-289-不加帽(下图)在培养基中刺激PBMC8天。与单独CEF温育相比，CEF与Tregitope-289-酰胺共温育1)得到更高的具有调节性表型的细胞百分比(左图)和2)导致响应CEF再刺激的γ干扰素分泌的相关显著性(p<0.0005)降低(右图)。相反，与单独CEF温育(上图)相比，与Tregitope289-不加帽(下图)共温育未引起显著性差异。图3显示了Tregitope存在下天然Tregs的活化。在破伤风毒素肽(TT830-844)、Tregitope或无刺激物存在下体外直接刺激人PBMCs四天。用抗-CD4和抗-CD25胞外染色细胞并接着用FoxP3胞内染色，用流式细胞仪分析。与TT830-844(745个细胞的12.5％)或无刺激物相比(497个细胞的19.5％)，用Tregitope温育增加了CD4+CD25+Foxp3+T细胞的百分比(644个细胞的53.6％)。图4为显示Tregitope诱导T-调节性细胞因子和趋化因子上调和T-效应细胞因子和趋化因子下调的一系列柱形图。用a)衍生自C3d蛋白的免疫原性肽本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
2007.01.30 US 60/8983471.一种T细胞表位组合物，其包含一种或多种分离的T细胞多肽，其中至少一种分离的T细胞多肽由SEQIDNO:5的氨基酸序列构成。2.一种核酸，其编码SEQIDNO:5的T细胞表位多肽。3.一种载体，其包含根据权利要求2的核酸。4.一种细胞，其包含根据权利要求3的载体。5.一种药用组合物，其包含权利要求1的T细胞表位组合物和药学可接受的载体。6.包含一种或多种分离的T细胞多肽的T细胞表位组合物在制备用于减少选自效应T细胞应答、辅助T细胞应答和B细胞应答的一种或多种不想要的免疫应答的药物中的用途，其中至少一种分离的T细胞多肽由SEQIDNO:5的氨基酸序列构成。7.根据权利要求6的用途，其中所述免疫应答被选自以下的医学病症活化：变态反应、自身免疫疾病、移植相关病症、酶或蛋白缺乏症、凝血障碍、癌症、不育；以及病毒、细菌或寄生虫感染，其中所述治疗或预防以上所列组获益于暂时或延长的免疫抑制。8.权利要求7的用途，其中所述移植相关病症为移植物抗宿主病。9.减少受试者中的一种或多种免疫应答的药盒，其中所述药盒包括包含一种或多种分离的T细胞多肽的T细胞表位组合物，其中至少一种分离的T细胞多肽由SEQIDNO:5的氨基酸序列构成，其中所述一种或多种免疫应答选自效应T细胞应答、辅助T细胞应答和B细胞应答。10.扩增调节性T细胞群的方法，其包括：（a）提供受试者的生物样品；（b）从生物样品中分离调节性T细胞；以及（c）将分离的调节性T细胞与有效量的T细胞表位组合物在使T调节性细胞数量增加以形成扩增的调节性T细胞组合物的条件下接触，其中所述T细胞表位组合物包含一种或多种分离的T细胞多肽，其中至少一种分离的T细胞多肽由SEQIDNO:5的氨基酸序列构成，藉此扩增生物样品中的调节性T细胞。11.刺激生物样品中调节性T细胞的方法，其包括：（a）提供受试者的生物样品；（b）从生物样品中分离调节性T细胞；以及（c）将分离的调节性T细胞与有效量的T细胞表位组合物在T调节性细胞被刺激以改变一种或多种生物学功能的条件下接触，...

【专利技术属性】
技术研发人员：A德格鲁特，W马丁，D里韦拉，
申请(专利权)人：埃皮瓦克斯公司，
类型：发明
国别省市：