一种人体表皮组织的快速构建制备方法技术

本发明专利技术涉及一种人体表皮组织的快速构建制备方法，是针对人体皮肤组织的结构特征，采用壳聚糖、明胶、人体表皮角质形成细胞培养，经薄膜成型、培养液浸泡、组织构建，在高压无菌状态下生成人体表皮角质形成细胞的人体表皮组织，此制备方法工艺先进，气体压力装置的构建和使用，可有效提高人体表皮组织的制备效率和速度，可做烧伤病人的植皮治疗使用，增强了皮肤移植的效果，是十分理想的人体表皮组织的构建制备方法。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种人体表皮组织的快速构建制备方法，其特征在于：使用的化学物质材料为：人体皮肤组织、壳聚糖、明胶、人体表皮角质形成细胞培养液、高糖培养基、氯化钙、碘酒、磷酸盐溶液、硫酸庆大霉素、青霉素、蛋白酶、胶原酶、胎牛血清、胰蛋白酶、乙二胺四乙酸、醋酸、戊二醛、氢氧化钠、硼氢化钠、二氧化碳、灭菌去离子水、二甲基亚砜、生理盐水，其准备用量如下：以克、毫升、毫米、厘米3为计量单位；人体皮肤组织：                                    50g±0.1g壳聚糖：                                          5g±0.01g明胶：                                            5g±0.01g人体表皮角质形成细胞培养液：Ca2+浓度0.09 mmol/L    200mL±1mL高糖培养基：Ca2+浓度1.8mmol/L                     200mL±1mL氯化钙：                                          0.5 g±0.001g碘酒：                                            10mL±0.1mL磷酸盐溶液：                                      500mL±5mL硫酸庆大霉素：40000单位/mL                       4mL±0.1mL青霉素：800000单位/g                              5g±0.1g蛋白酶：                                          0.5g±0. 001g胶原酶：                                          0.5g±0. 001g胎牛血清：                                        20mL±1mL胰蛋白酶：                                        0.5g±0. 001g乙二胺四乙酸：                                    0.05g±0. 001g醋酸：                                            5mL±0.1mL戊二醛：浓度50%                                  5mL±0.1mL氢氧化钠：                                       5g±0.1g硼氢化钠：                                       5g±0.1g二氧化碳：气体                                   5000cm3±100cm3灭菌去离子水：                                   1000mL±10mL二甲基亚砜                                       2mL±0.1mL生理盐水                                         100mL±1mL快速构建制备方法如下：配制细胞培养液配制人体真皮成纤维细胞培养液：量取高糖培养基90mL，胎牛血清10mL，混匀，成人体真皮成纤维细胞培养液；配制人体表皮角质形成细胞与人体真皮成纤维细胞培养液的混合培养液：量取人体表皮角质形成细胞培养液100mL、高糖培养基100mL，比例1:1，混匀，加入氯化钙0.0105g，震荡摇晃5min，过滤器过滤，在冰箱保存，保存温度4℃，成混合培养液；人体表皮角质形成细胞与人体真皮成纤维细胞的提取手术获取人体皮肤组织选取健康人体，手术提取人体皮肤组织50g；将人体皮肤组织置于培养皿中，加入碘酒10mL，迅速进行冲洗；量取磷酸盐溶液500mL，加入硫酸庆大霉素2mL、青霉素0.125g，过滤器过滤，成混合液；将冲洗后的人体皮肤组织置于另一培养皿中，加入磷酸盐溶液‑硫酸庆大霉素‑青霉素混合液10mL，浸泡人体皮肤组织，浸泡时间15min；用剪刀、刀片刮除人体皮肤组织真皮皮下组织，用磷酸盐溶液‑硫酸庆大霉素‑青霉素混合液10mL，浸泡5min；量取人体表皮角质形成细胞培养液10mL，加入蛋白酶0.025g，摇匀，过滤器过滤，将人体皮肤组织表皮面朝上平铺于无菌培养皿中，加入人体表皮角质形成细胞培养液‑蛋白酶混合溶液10mL，在冰箱4℃下无菌放置12h；然后用尖镊分离人体皮肤组织，使表皮与真皮分开；量取高糖培养基10mL，加入胶原酶...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：安美文，刘阳，王立，陈凌峰，
申请(专利权)人：太原理工大学，
类型：发明
国别省市：山西;14