双键取代雷公藤内酯衍生物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种通式（Ⅰ）所示双键取代雷公藤内酯衍生物或其药学上可接受的盐或水合物或它们的光学异构体，其中R1=OH，R2=H，或者R1=H，R2=OH。本发明专利技术还公开了其制备方法和在制备用于治疗癌症、以及与癌症相关疾病的药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】
双键取代雷公藤内酯衍生物及其制备方法和应用
本专利技术涉及天然药物活性成分的结构改造及活性研究，具体涉及双键取代雷公藤内酯衍生物及制备方法和治疗增生性肿瘤疾病的研究。
技术介绍
雷公藤，俗名断肠草，系卫矛科(Celastraceae)雷公藤属木质藤本植物,是我国具有的资源比较丰富的一种植物。雷公藤属(Tripterygium)植物有四种，即雷公藤(TripterygiumwilfordiiHookf.)、昆明山海棠(TripterygiumhypoglaucumLevl.Hutch)、东北雷公藤(黑蔓)(TripterygiumregeliiSpragueetTakeda)和苍山雷公藤(TripterygiumforretiiDicls)，在我国均有分布。雷公藤最早收载于《神农本草经》，其主要化学成分有二萜、三萜、倍半萜、生物碱等，至今已从雷公藤属植物中分离出化合物近200种。近二十年来的研究表明它具有抗肿瘤、抗炎、免疫抑制、抗生育、抗菌等多种活性。雷公藤植物在民间用于治疗肿瘤已有多年历史，其中活性成分之一是雷公藤内酯醇。雷公藤内酯醇除了已得到广泛的抗肿瘤作用研究外，还曾经进入临床试验，用于治疗白血病，但雷公藤内酯醇较大的毒副作用，过于狭窄的治疗窗口，限制了其在临床中应用。以往对雷公藤内酯醇的结构改造大多局限在水溶性基团的引进上，主体结构上并无根本性改动。当这类前药进入体内后，通过水解或代谢后仍然转变为雷公藤内酯醇在体内发挥药效作用，这就决定了它们不可能从根本上改善雷公藤内酯醇的毒副作用。同时在对雷公藤内酯醇C14-位进行改造时发现，该位置的基团构型对于化合物活性的影响十分显著，光学异构体的问题给合成及分离工作增加了很大的难度。本专利技术的重点在于对雷公藤内酯醇构效关系的研究，对其结构进行了不同于现有技术的改造和修饰，获得了一批新型结构的雷公藤内酯衍生物，从而完成了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题之一在于针对现有雷公藤内酯醇所存在的问题而在雷公藤内酯醇C5-位或C15-位引入羟基，C14-位引入环外双键，形成一批双键取代雷公藤内酯衍生物。本专利技术所要解决的技术问题之二在于提供一种以14-双键雷公藤内酯为基本结构的羟基取代雷公藤内酯衍生物的制备方法。本专利技术所要解决的技术问题之三在于通过以14-双键雷公藤内酯为基本结构的羟基取代雷公藤内酯衍生物的药理毒理实验研究，发现其对于肿瘤疾病，尤其是生殖系统的肿瘤具有良好的治疗作用，具有高效、低毒，与传统细胞毒抗肿瘤药物无交叉抗药性的特点，具有很好的用于治疗肿瘤等增生性疾病的开发前景。本专利技术提供的双键取代雷公藤内酯衍生物为通式（Ⅰ）所示化合物或其药学上可接受的盐或水合物或它们的光学异构体：其中，R1=OH，R2=H，或者R1=H，R2=OH。在本专利技术的一个优选实施例中，通式（Ⅰ）中R1=OH，R2=H，即如下结构式（Ⅰa）所示化合物：在本专利技术的一个优选实施例中，通式（Ⅰ）中R1=H，R2=OH，即如下结构式（Ⅰb）所示化合物：本专利技术的制备方法如下：1、结构式（Ⅰa）所示化合物的制备方法，由以下步骤组成：步骤1：以雷公藤内酯酮（1）为起始物，在非质子性溶剂中，利用碘甲烷格式试剂进攻雷公藤内酯酮的C14位羰基得到（14S）-14β-甲基表雷公藤内酯醇（2）；步骤2：（14S）-14β-甲基表雷公藤内酯醇（2）在非质子性溶剂中用三氟乙酸酐脱水得到C14位环外双键产物14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇（3）；步骤3：14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇（3）在含有粗糙链孢霉的土豆培养基中培养制备得到14-脱羟基-14-亚甲基-5-羟基雷公藤内酯醇（Ⅰa）2、结构式（Ⅰb）所示化合物的制备方法，由以下步骤组成：步骤1：14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇（3）在磷酸缓冲溶液中使用大鼠肝微粒体蛋白孵育制备得到14-脱羟基-14-亚甲基-15-羟基雷公藤内酯醇（Ⅰb）本专利技术的氟取代雷公藤内酯衍生物在制备用于治疗癌症、以及与癌症相关疾病的药物中的应用。所述癌症为肾癌，乳腺癌，肺癌，恶性黑色素瘤，结肠癌，前列腺癌或卵巢癌。本说明书中所用的术语具有如下意义：“药学上可接受的盐”具体地可列举与丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸等有机酸和天冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸形成酯后再与无机碱形成的盐，如钠、钾、钙、铝盐和铵盐，或与有机碱形成的盐，如甲胺盐、乙胺盐、乙醇胺盐等，或与赖氨酸、精氨酸、鸟氨酸等碱性氨基酸形成酯后的盐酸、氢溴酸、氢氟酸、硫酸、硝酸、磷酸等无机酸的盐，或与甲酸、乙酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸等有机酸的盐。“水合物”的含义包括一水合物、二水合物、三水合物。“光学异构体”的含义包括对映异构体、非对映异构体、光学异构体的混合物及纯光学异构体。本专利技术的双键取代雷公藤内酯衍生物、其药学上可接受的盐或光学异构体可制成含活性成分0.001-99.9%（重量）以及适量药学上可接受的载体的各种制剂，如适合于口服、注射或肠道给药使用的制剂形式。可根据受治疗者的年龄（月龄或周龄）、一般健康状况、疾病严重程度和病程、给药途径、人体对药物的敏感性等对受治疗者施用含治疗有效量的本专利技术化合物的药物制剂。附图说明图1为本专利技术实施例1制备的14-脱羟基-14-亚甲基-5-羟基雷公藤内酯醇对体外培养人卵巢癌SK-OV-3细胞抑制的量-效曲线示意图。图2为本专利技术实施例2制备的14-脱羟基-14-亚甲基-15-羟基雷公藤内酯醇对体外培养人卵巢癌SK-OV-3细胞抑制的量-效曲线示意图。具体实施方式下面结合实例对本专利技术进行进一步阐述，但这些实施例绝不是对本专利技术的任何限制，本专利技术的范围由权利要求决定。一、制备实施例实施例1结构式（Ⅰa）14-脱羟基-14-亚甲基-5-羟基雷公藤内酯醇的制备步骤1结构式(2)(14S)-14β-甲基表雷公藤内酯醇的制备氩气保护下将10mL无水乙醚加入含有镁屑（264mg，11mmol）的反应瓶中，将溶于5mL无水乙醚的MeI（1.42g，10mmol）经恒压滴液漏斗滴加到上述反应体系中。加毕该暗灰色反应体系在室温下搅拌半小时。取1.37mL新鲜制备的MeMgI格式试剂溶液，逐滴加入已溶解于8mL干燥四氢呋喃的雷公藤内酯酮1（90mg，0.25mmmol）中。室温下反应2小时后停止反应，反应体系用饱和氯化铵溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩后的粗产物经柱层析纯化（乙酸乙酯：石油醚=1：5）得到白色固体(14S)-14β-甲基表雷公藤内酯醇2（70mg，收率73%）。MS(ESI):m/z375[M+1]+。1HNMR(CDCl3,300MHz):δ4.66(s,2H),3.75(d,1H,J=3.2Hz),3.74(d,1H,J=3.2Hz),2.75-2.63(m,1H),2.47(sept,1H,J=6.9Hz),2.34-2.22(m,1H),2.21-2.03(m,2H),1.85(t,1H,J=14.1Hz),1.58-1.48(m,4H),1.24-1.10(m,1H),1.03(s,3H),0.94(d,3H,J=6.9Hz),0.79(d,3H,J=6.9Hz)。步骤2结构式(3)本文档来自技高网...

【技术保护点】
通式（Ⅰ）所示双键取代雷公藤内酯衍生物或其药学上可接受的盐或水合物或它们的光学异构体：其中，R1=OH，R2=H，或者R1=H，R2=OH。FDA00002232918900011.jpg

【技术特征摘要】
1.式(Ib)所示的双键取代雷公藤内酯衍生物：2.一种制备权利要求1所述的双键取代雷公藤内酯衍生物的方法，其特征在于，结构式(Ib)所示化合物由以下步骤制备而成：步骤1：14-脱羟基-14-亚甲基雷公藤内酯醇(3)在磷酸缓冲溶液中使用大鼠肝微粒体蛋白孵育制备得...

【专利技术属性】
技术研发人员：樊兴，秦继红，
申请(专利权)人：上海汇伦生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31