一种春兰与大花蕙兰杂交种育苗的方法技术

一种春兰与大花蕙兰杂交种育苗的方法，属于植物生物技术领域，以春兰为母本，大花蕙兰为父本，通过人工授粉获得杂交种，在杂交种的蒴果未开裂前采收，经表面消毒和种子用营养液前处理后进行无菌播种，经暗培养种子萌发、种子直接成苗或原球茎增殖，原球茎再经芽诱导、根诱导、组培苗炼苗，然后进行温室栽培。本发明专利技术为一种杂交成苗快、品质好、高效、简便、推广性强的春兰和大花蕙兰杂交和无菌播种育苗方法。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】，属于植物生物
，以春兰为母本，大花蕙兰为父本，通过人工授粉获得杂交种，在杂交种的蒴果未开裂前采收，经表面消毒和种子用营养液前处理后进行无菌播种，经暗培养种子萌发、种子直接成苗或原球茎增殖，原球茎再经芽诱导、根诱导、组培苗炼苗，然后进行温室栽培。本专利技术为一种杂交成苗快、品质好、高效、简便、推广性强的春兰和大花蕙兰杂交和无菌播种育苗方法。【专利说明】
本专利技术属于植物生物
，具体涉及一种远缘杂交育种和杂交种繁殖方法。
技术介绍
春兰(Cym.goeringii)，又称草兰、山兰、朵朵香。是兰科，兰属，地生兰类多年生草本。是中国兰的代表种，原产于我国长江流域或西南地区，日本和朝鲜半岛也有分布。春兰名优品种具有很高的观赏价值和经济价值，在东南亚特别是日本、韩国和台湾地区，春兰十分受欢迎。春兰传统的品种选育以绿色为基本，崇尚瓣型和素心，是贯彻执行瓣型理论最具代表的国兰种，因此流传至今的名优春兰品种，绝大部分为绿色瓣型花或素心花品种。大花繁竺XCymbidium又叫喜姆比兰和蝶兰。兰科、兰属植物。它是由兰属中的大花附生种、小花垂生种以及一些地生兰经过一百多年的多代人工杂交育成的品种群。大花蕙兰叶长碧绿，花姿粗旷，花色艳丽，是世界著名的“兰花新星”。在国际花卉市场十分畅销，深受花卉爱好者的倾爱。大花蕙兰的生产地主要是日本，韩国和中国，澳洲及美国等。鉴于人们对新产品和新兰花的追求，培育更多品种的兰花种是植物界的研究的一个课题。
技术实现思路
本专利技术目的是为人们提供一种以春兰与大花蕙兰杂交种育苗的方法。本专利技术以春兰为母本，大花蕙兰为父本，母本在开花2天后去雄，父本取开花后3~5天的花粉，通过人工授粉获得杂交种，在杂交种的蒴果未开裂前采收，经表面消毒和种子用营养液前处理后进行无菌播种，经暗培养种子萌发、种子直接成苗或原球茎增殖，原球茎再经芽诱导、根诱导、组培苗炼苗，然后进行温室栽培。本专利技术针对春兰与大花蕙兰种间杂交育种和种子无菌播种中，如何提高优良品种授粉结实率，种子萌发率、原球茎增殖率、诱芽诱根成苗率和炼苗成活率等，提出一种使杂交成苗快，品质好，高效、简便、推广性强的春兰和大花蕙兰杂交和无菌播种育苗方法。具体方法:无菌播种是:将未开裂的蒴果表面用质量分数为75%的酒精消毒后，以质量分数为.0.1%的HgCl水溶液浸泡10分钟后取出，再浸入质量分数为95%的酒精内，取出蒴果立即在酒精灯上点燃，待蒴果表面酒精燃烧完后，切开蒴果，取出种子，放入装有营养液的玻璃试剂瓶内，振荡10~20分钟后，将种子用无菌不锈钢小勺均匀分散于培养基表面。种子前处理营养液中含有I/2MS、萘乙酸(NAA) 0.5mg/1、蔗糖20g/1和蛋白胨.0.5g/l，营养液的pH值为5.25~5.3 ;所述无菌播种培养基中含有1/2MS、萘乙酸(NAA).0.5mg/l、蔗糖20g/l、活性碳0.5g/l、蛋白胨0.5g/l和琼脂6g/l，培养基的pH值为5.25~5.3。暗培养种子萌发是:将连同培养基的种子置于无光、培养温度为23±0.2°C的环境温度下放置。原球茎增殖是:待原球茎萌发至长度为2~5mm时，原球茎材料每隔60天转入一次增殖培养基，转入增殖培养基后将玻璃瓶置于温度为23±0.2°C的环境中，并且光照8小时/天，光照强度为15001ux±100 lux ;所述增殖培养基中含有1/2MS、2，4_D2mg/l、蔗糖20g/l、活性碳0.5g/l、蛋白胨0.5g/l和琼脂6g/l，所述增殖培养基的pH值为5.25~5.3。种子直接成苗是:待原球茎萌发的幼芽长度为2~5mm时，向玻璃瓶内转入二次培养基；所述二次培养基中含1/2MS、萘乙酸(NAA) 0.5mg/l、蔗糖20g/l、活性碳0.5g/l、蛋白胨0.5g/l和琼脂6g/l，二次培养基的pH值为5.25~5.3。茎诱芽是:待原球茎萌发的幼芽长度为I~2cm时，转入诱芽培养基，置于23±0.2°C的环境中2~3个月，期间光照12小时/天，光照强度为20001ux±100 lux ;所述诱芽培养基中含1/21^、萘乙酸(應么)0.lmg/l、6-BAlmg/l、蔗糖20g/l、蛋白胨0.5g/l和琼脂6g/l，所述诱芽培养基的pH值为5.25~5.3。根诱导是:待原球茎萌发的幼芽长度为2~3cm时，向玻璃瓶内转入生根壮苗培养，置于23±0.2°C的环境中，并且光照10小时/天，光照强度15001ux±100 lux ;所述生根壮苗培养基中含1/21^、萘乙酸(應么)0.5mg/l、6-BA0.5mg/l、蔗糖20g/l、蛋白胨0.5g/1、活性碳0.5g/l和琼脂6g/l，所述生根壮苗培养基的pH值为5.25~5.3。组培苗移栽炼苗是:在小苗生长至8~10 cm、形成3~4个叶片、根长5~8cm、根数2~3条时出瓶移栽至移栽基质，移栽后浇透水，置于光照10小时/天、光照强度20001ux±100 lux、温度为20~25°C、湿度为80~85%的环境中；所述移栽基质由小号松鳞和珍珠岩以质量比为8:2的比例混合。温室栽培的温度 条件为18~30°C，湿度为75~85%，自然光照，每3~5天浇一次透水，温室保持良好通透性，喷施广谱性杀菌剂杀虫剂，每一星期喷施I次1/2MS培养液或浓度为I %。的兰菌王。本专利技术所具有的优点: 1、本专利技术提出当花期不遇时，短期保存花粉采用冷藏花蕊柱的方法，利用植物营养体短期保鲜的方法，使花粉最大程度的保持活力和洁净度，提高杂交成功率和种子育性。根据花蕊柱萎缩的程度，在花蕊柱腐败前取出花粉继续保存，可延长花粉的活性，提高杂交成功率。2、本专利技术对播种前无菌种子进行振荡前处理，使种子充分与营养液接触，尽量克服其种皮不易透水性，使种子胚能尽早接触到营养液，加快其萌发速度。取分散于营养液的种子倒入培养基，种子连同营养液能均匀的分布于培养基表面，整个操作方便高效，污染几率极低。3、本专利技术利用不同配方培养基，可采用播种培养基直接对原球茎诱芽诱根，快速成苗，再利用根茎周围少量原球茎继代增殖实现株系的快繁。原球茎也可直接继代增殖，扩大株系群体，再进行诱芽诱根壮苗培养。使多种育种途径可自由转换，更好的达到育种者的目标。4、本专利技术的炼苗间采用精确控制温度、湿度和光照，大大提高小苗成活率和质量的同时，节省了经济成本。5、本专利技术栽培小苗的基质为小号松鳞加珍珠岩，是酥松透气的软质料，保水性能好，对组培苗根系生长十分适合，材料收集容易，成本低廉。【专利附图】【附图说明】图1为宜春仙春兰的开花照片。图2为大花蕙兰的开花照片。图3为杂交蒴果照片。图4为种子无菌播种照片。图5为原球茎萌发照片。图6为直接成苗照片。图7为原球茎增殖照片。图8为原球茎诱芽照片。图9为原球茎诱根照片。图10为组培苗照片。 图11为小苗出瓶照片。图12为炼苗室炼苗照片。图13为温室栽培照片。【具体实施方式】本专利技术结合附图和实施例作进一步的说明，但本专利技术的内容不是仅限于此。本例采用春兰宜春仙为母本，大花蕙兰为父本，进行杂交无菌播种育苗，具体步骤: 1、人工授粉:在I月下旬，两亲本同时开花时，春兰宜春仙(附图1)开花两天后，去除鼻头和花粉块，在鼻头下蕊柱腔授入红花大花蕙兰品本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种春兰与大花蕙兰杂交种育苗的方法，其特征在于以春兰为母本，大花蕙兰为父本，母本在开花2天后去雄，父本取开花后3～5天的花粉，通过人工授粉获得杂交种，在杂交种的蒴果未开裂前采收，经表面消毒和种子用营养液前处理后进行无菌播种，经暗培养种子萌发、种子直接成苗或原球茎增殖，原球茎再经芽诱导、根诱导、组培苗炼苗，然后进行温室栽培。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：孙叶，包建忠，刘春贵，李风童，马辉，陶凡，张甜，张靓，陈秀兰，
申请(专利权)人：江苏里下河地区农业科学研究所，
类型：发明
国别省市：