分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株制造技术

本发明专利技术公开了一种分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株以及所述的杂交瘤细胞株在制备猪圆环病毒2型Cap蛋白的单克隆抗体中的应用，其中所述杂交瘤细胞株保藏编号CGMCC No.8169，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明专利技术所涉及的杂交瘤细胞具有稳定的抗体分泌能力，所分泌的单克隆抗体与猪圆环病毒2型Cap蛋白具有良好的反应特异性。此研究为以后进行PCV2病原学及其致病机理的研究奠定了良好的物质基础。

【技术实现步骤摘要】
分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株
本专利技术属于生物制药领域，具体而言，涉及分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用。
技术介绍
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起世界养猪国家经济损失的重要病原之一。临床上引起的疾病统称为猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)或猪圆环病毒病(PCVD)，包括断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、繁殖障碍、肠炎、增生性坏死性肺炎和猪呼吸道病复合体(PRDC)等，已经给全世界养猪业带来了巨大损失。PCV2无囊膜，PCV2基因组含有2主要的开放阅读框，即ORFl和0RF2。0RF2编码病毒结构蛋白，即Cap蛋白。Cap蛋白是病毒的主要免疫原性蛋白，长233个氨基酸(aa)，在抗病毒感染免疫中发挥着重要作用。目前，国内外已经制备出多个抗Cap蛋白单克隆抗体，鉴此阐明的Cap蛋白抗原表位有69-83、117-131、132-146、156-162、175-192、195-202 和 230_233aa，其中 156-162、175-192、195-202 和 231_233aa 包含中和表位的空间构象表位。但是，目前该蛋白的核定位信号肽序列部位(l_50aa)的抗原表位尚未报道。PCV2抗体检测方法有ELISA、IPMA和IFA等，病毒抗原检测方法有病毒分离鉴定、IPMA和IFA和PCR等，其敏感性和特异性较好，但操作耗时费力，对技术和设备要求高，因此无法推广应用。双抗体夹心ELISA 虽然在其他病原检测中有报道，但由于受到抗体的限制，在PCV2检测中尚无报道。因此，如何快速获得能够检测PCV2抗原的ELISA试剂盒是本领域亟待解决的技术难题。微生物信息本专利技术的一个优选实施方式以及【具体实施方式】中所使用的分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株(分类命名:分泌PCV2抗体的杂交瘤细胞)已经保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC N0.8169，保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为2013年9月18日。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于所述杂交瘤细胞株保藏编号CGMCC N0.8169，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，或者是与CGMCC N0.8169的分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有95%以上亲缘性的杂交瘤细胞株。在本专利技术的一个方面，所述的杂交瘤细胞株具有稳定分泌抗PCV2单克隆抗体的能力，体外连续培养20代，分泌的抗体ELISA效价一致(表1);表1不同代次杂交瘤细胞培养上清效价本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于所述杂交瘤细胞株保藏编号CGMCC NO.8169，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，或者是其直接传代物；或者是与CGMCC NO.8169的分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株具有95％以上亲缘性的杂交瘤细胞株。

【技术特征摘要】
1.一种分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其特征在于所述杂交瘤细胞株保藏编号CGMCC N0.8169，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，或者是其直接传代物；或者是与CGMCC N0.8169的分泌猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜平，翟淑燕，白娟，
申请(专利权)人：南京农业大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32