一种新型导流柱式抗体结合收集管制造技术

技术编号:9859276 阅读:184 留言:0更新日期:2014-04-02 19:18
本实用新型专利技术公开一种新型导流柱式抗体结合收集管。它包括抗体结合收集管管体,在抗体结合收集管管体内还具有圆柱体。本实用新型专利技术在抗体结合收集管管体内设置圆柱体,其能够起到很好的引流作用,使抗体和Protein A或G琼脂糖树脂珠的混合液在低转速条件下能够轻易温和的流动,从而更好的混合均匀,使抗体更加均匀有效的结合到Protein A或G琼脂糖树脂珠上。(*该技术在2023年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】
一种新型导流柱式抗体结合收集管
:本技术属于生物器械领域,具体涉及一种新型导流柱式抗体结合收集管。
技术介绍
:目前在科研和检测工作中验证蛋白质之间的相互作用的方法主要有,酵母双杂交,Pulldown和免疫共沉淀等,其中免疫共沉淀(Co-1mmunoprecipitation, Co-1P)是最为有效、直接的证明蛋白之间相互作用的方法,现在几乎所有的文献报道中证明蛋白之间相互作用的实验都是使用免疫共沉淀的方法来证实。其具体的原理是,利用抗体将相应特定分子沉淀的同时,与该分子特异性结合的其他分子也会被带着一起沉淀出来的技术。这种技术常用于验证蛋白质之间相互特异性结合。即:先将抗兴趣蛋白的抗体与琼脂糖树脂珠一起抚育,使其结合到琼脂糖树脂珠上的Protein A或G上,即抗体结合实验部分。然后将含有我们感兴趣的蛋白的细胞裂解液加入到之前结合了抗体的琼脂糖树脂珠收集管中进行抚育,孵育后若细胞中含有与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目的蛋白一兴趣蛋白一抗兴趣蛋白抗体一Protein A或G琼脂糖树脂珠”,然后经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于测定两种目标蛋白质是否在体内结合;也可用于确定一种特定蛋白质的新的作用搭档。其主要具有一下优点:(I)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态。(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响。(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。然而,现行的免疫共沉淀试剂盒中抗体结合的试验部分,存在一定的问题即:抗体与Protein A或G琼脂糖树脂珠结合时由于混合液体表面张力大,难以形成液流,使其难以均匀有效的结合,导致抗体与兴趣蛋白的结合效率下降,可能使得结果出现假阴性,进而影响实验的结论可靠性。具体为抗体和Protein A或G琼脂糖树脂珠及一些试剂加到抗体结合收集管中时,由于形成的混合液浓度及成分的变化,使其混合液体表面的张力和粘度增大,因此在均匀摇动的过程中需要很高的转速才能使得液体冲破表面张力,形成液流。但是在这种高转速的情况下形成的液流速度过大,抗体和Protein A或G琼脂糖树脂珠很难结合,导致抗体结合的效率大幅度减小,如果抗体结合的少,将影响其后面的与蛋白结合,进而影响拉下目的蛋白的实验,可能使实验出现假阴性或是弱阳性的结果,致使整体实验的结论受到影响,因此保证抗体与Protein A或G琼脂糖树脂珠的结合率对用免疫共沉淀法来验证蛋白之间的相互作用尤为重要。具体的原因是目前的抗体结合收集管(图1所示),由于其内壁光滑,无任何导流装置,对液体没有导流作用,抗体与Protein A或G琼脂糖树脂珠形成的混合液表面张力很大,不在高转速条件下,难以形成流动液流,难以摇匀,而在这种高速转动的条件下,即使形成液体的混合流动,抗体与Protein A或G琼脂糖树脂珠也难以均匀有效结合的。
技术实现思路
:本技术的目的是提供一种能够在低转速的情况下,也能形成混合液液流,从而使抗体与Protein A或G琼脂糖树脂珠能均勻有效结合的新型导流柱式抗体结合收集管。本技术是通过以下技术方案予以实施的:本技术的新型导流柱式抗体结合收集管,包括抗体结合收集管管体,其特征在于,在抗体结合收集管管体内还具有圆柱体。优选,所述的圆柱体的直径(横截面)为抗体结合收集管内壁直径的1/5,长度为抗体结合收集管管身长度的2/3。所述的圆柱体只要放于抗体结合收集管管内都能起到效果,优选竖直贴于抗体结合收集管的内壁上。本技术在抗体结合收集管管体内设置圆柱体,其能够起到很好的引流作用,使抗体和Protein A或G琼脂糖树脂珠的混合液在低转速条件下能够轻易温和的流动,从而更好的混合均匀,使抗体更加均匀有效的结合到Protein A或G琼脂糖树脂珠上。其原理在于,液体对突起弧线有一定的吸附作用,在有突起弧线存在的条件下,液体会对弧形突起有一定的吸附作用更易随着突起线条流动。这样就可以减少液体冲破表面张力所需要的动量,减少形成液流所需的转速,使得摇匀时转速条件更加温和,这样Protein A或G琼脂糖树脂珠就能够在底转速的条件下,温和的在混合液中悬浮流动,抗体也更容易均匀地与Protein A或G琼脂糖树脂珠有效结合。本技术的新型导流柱式抗体结合收集管相比于现有技术的抗体结合收集管,其具有以下优点:1、相比目前通用的光滑内壁的抗体结合收集管更加容易使得液体在内壁产生流动,这样可以在摇床上任意转速下随意的控制液体的流动速度,更好的控制抗体与琼脂糖树脂的抚育结合。2、本技术的新型导流柱式抗体结合收集管还可以用于其它的实验用途,如一些药物的摇匀,防止沉积。溶液的混匀,磁珠的混匀,各种液体物质的均匀混合等。3、本技术的新型导流柱式抗体结合收集管能够很好的应用与免疫沉淀实验中抗体的抚育,有利于更好的纯化蛋白质。4、本技术的新型导流柱式抗体结合收集管能够更温和的摇匀,更好的保护抗体和蛋白质的天然活性状态,进而得到理想的实验效果。5、本技术的新型导流柱式抗体结合收集管的结构简单,增强抗体和ProteinA或G琼脂糖树脂珠结合的效果明显。【附图说明】:图1是现有技术中的抗体结合收集管的结构示意图;图2是本技术的新型导流柱式抗体结合收集管的结构示意图;其中1、抗体结合收集管管体;2、圆柱体。【具体实施方式】:以下是对本专利技术的进一步说明,而不是对本专利技术的限制。实施例1:如图2所示,本实施例的新型导流柱式抗体结合收集管,包括抗体结合收集管管体I,在抗体结合收集管管体内壁上还竖直贴有一圆柱体2,圆柱体的直径(横截面)为抗体结合收集管内壁直径的1/5,长度为抗体结合收集管管身长度的2/3。本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种新型导流柱式抗体结合收集管,包括抗体结合收集管管体,其特征在于,在抗体结合收集管管体内还具有圆柱体。

【技术特征摘要】
1.一种新型导流柱式抗体结合收集管,包括抗体结合收集管管体,其特征在于,在抗体结合收集管管体内还具有圆柱体。2.根据权利要求1所述的新型导流柱式抗体结合收集管,其特征在于,所述的圆柱体的...

【专利技术属性】
技术研发人员:李志远尹士魁李彩月马文波
申请(专利权)人:中国科学院广州生物医药与健康研究院
类型:新型
国别省市:广东;44

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