一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，包括设置在盒体内的包被板和试剂，所述试剂包括辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、包被溶液、封闭溶液、洗涤液和化学发光液，所述包被板为包被有犬瘟热病毒抗体的发光板，所述犬瘟热病毒抗体的稀释度为1：700-1000，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体稀释度为1：2500。本发明专利技术具有成本低廉、方便、快速及试验条件要求低的特点，不仅提高了检测效率，而且也保证了检测的精确度，可用于出口检验、食品安全检验及动物养殖业现场快速检测。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，包括设置在盒体内的包被板和试剂，所述试剂包括辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、包被溶液、封闭溶液、洗涤液和化学发光液，所述包被板为包被有犬瘟热病毒抗体的发光板，所述犬瘟热病毒抗体的稀释度为1：700-1000，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体稀释度为1：2500。本专利技术具有成本低廉、方便、快速及试验条件要求低的特点，不仅提高了检测效率，而且也保证了检测的精确度，可用于出口检验、食品安全检验及动物养殖业现场快速检测。【专利说明】一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒
本专利技术涉及到病毒免疫与检测用的试剂盒，具体的说是一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒。
技术介绍
犬瘟热(CD)是由犬瘟热病毒(CDV)感染犬所引起的急性、高度接触性传染病。犬瘟热病毒是传染性极强，能导致犬类和其他一些肉食动物患病甚至死亡。3?6个月的幼犬比成年犬更容易感染犬瘟热。犬瘟热病毒经常会导致犬类死亡，所以在出现类似症状早期，用犬瘟热病毒抗原检测试剂盒进行检测是非常有必要的。目前，犬瘟热病毒的传统检测方法有血清学检测方法和病原学检测方法。血清学检测方法主要为血凝试验、酶联免疫吸附试验和免疫胶体金检测方法，但灵敏度不高、特异性不强。病原学检测方法目前常用F81、MDCK等传代细胞系分离培养病毒，病毒分离方法虽然在理论上可以检出一个感染性的病毒粒子，确诊犬瘟热病毒的感染，但也因分离病毒的操作繁琐、代价高及确诊缓慢等因素没有投入临床使用。随着分子生物学的发展，目前已有多种PCR方法用于犬瘟热病毒的检测，虽在灵敏度方面有所改进，但由于需要精密仪器的配套使用，同样也无法满足和现地检测的需要。
技术实现思路
为解决现有犬瘟热病毒检测存在的灵敏度不高、代价高确诊慢等问题，本专利技术提供了 一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒。本专利技术为解决上述技术问题采用的技术方案为:一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，包括设置在盒体内的包被板和试剂，所述试剂包括辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、包被溶液、封闭溶液、洗漆液和化学发光液，所述包被板为包被有犬痕热病毒抗体的发光板，所述犬瘟热病毒抗体的稀释度为1:700-1000，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体稀释度为I:2500 ； 所述发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板； 所述犬瘟热病毒抗体的包被是将犬瘟热病毒抗体置于0.lmol/L的包被溶液中，在4°C的温度下反应包被12h，然后采用封闭溶液密封于发光板上的孔内； 所述包被溶液为碳酸钠和碳酸氢钠溶于水中制成的碳酸盐缓冲液，且碳酸根的浓度为0.lmol/L ； 所述封闭溶液为每IOOml水中加入IOg的BSA制成的BSA溶液，然后向其中依次加入BSA溶液重量5%的脱脂奶粉、1%的明胶和0.05%的NaN3。所述辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体为辣根过氧化酶-羊抗鼠IgG原液稀释得到的。所述化学发光液包括底物A和底物B，底物A为0.0IM鲁米诺溶解到0.0lM PH=8.8Tris缓冲液，底物B为0.0OlM对碘苯酚溶解0.0lM PH=8.8 Tris缓冲液后加入3/10000过氧化氢，所述鲁米诺为发光底物，对碘苯酚为发光增强剂。所述洗涤液为含有质量浓度为0.05%吐温_20、pH值为7.5的0.lmol/L磷酸盐缓冲液。有益效果:本专利技术具有成本低廉、方便、快速及试验条件要求低的特点，不仅提高了检测效率，而且也保证了检测的精确度，可用于出口检验、食品安全检验及动物养殖业现场快速检测。【专利附图】【附图说明】图1为本专利技术具体实施例的实验结果表。【具体实施方式】一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，包括设置在盒体内的包被板和试剂，所述试剂包括辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、包被溶液、封闭溶液、洗涤液和化学发光液，所述包被板为包被有犬瘟热病毒抗体的发光板，所述犬瘟热病毒抗体的稀释度为1:700-1000，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体稀释度为1:2500 ； 所述发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板； 所述犬瘟热病毒抗体的包被是将犬瘟热病毒抗体置于0.lmol/L的包被溶液中，在4°C的温度下反应包被12h，然后采用封闭溶液密封于发光板上的孔内； 所述包被溶液为碳酸钠和碳酸氢钠溶于水中制成的碳酸盐缓冲液，且碳酸根的浓度为0.lmol/L ； 所述封闭溶液为每100ml水中加入IOg的BSA制成的BSA溶液，然后向其中依次加入BSA溶液重量5%的脱脂奶粉、1%的明胶和0.05%的NaN3。所述辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体为辣根过氧化酶-羊抗鼠IgG原液稀释得到的。所述化学发光液包括底物A和底物B，底物A为0.0IM鲁米诺溶解到0.01M PH=8.8Tris缓冲液，底物B为0.0OlM对碘苯酚溶解0.01M PH=8.8 Tris缓冲液后加入3/10000过氧化氢，所述鲁米诺为发光底物，对碘苯酚为发光增强剂。所述洗涤液为含有质量浓度为0.05%吐温_20、pH值为?.5的0.lmol/L磷酸盐缓冲液。利用本专利技术进行检测的步骤如下: (1)配洗液:将50ml洗涤液(20X )加纯化水稀释至1000ml，充分摇匀后备用； (2)编号:试验时应在包被板上设高低质控对照品孔并编号，其余为待检样品孔； (3)加样孔稀释液:用加样器加入样品稀释液，每孔90ul;质控对照品孔不加样品稀释液； (4)加样:分别于质控对照品孔加入对应的质控对照品lOOul，并于各待检样品孔加入待检样品10ul，37±2°C温育30分钟； (5)洗涤:倾出孔中液体，每孔加入洗涤溶液250μ L，洗涤3次，拍干；(6)加酶标羊抗鼠抗体溶液:每孔加入酶标羊抗鼠抗体溶液100μL，37±2°C温育30分钟；(7)洗涤:倾出孔中液体，每孔加入洗涤溶液250μ L，洗涤3次，拍干； (8)加发光溶液:每孔加入发光溶液100μ L ; (9)检测:用化学发光免疫分析仪测定每孔的发光强度。 (10)用十个样本进行检测: 结果如附图1所示=CUt-Off=2.1*4752.5 (阴性对照) cut-off > 1.0 为阳性。【权利要求】1.一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，包括设置在盒体内的包被板和试剂，所述试剂包括辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、包被溶液、封闭溶液、洗涤液和化学发光液，其特征在于:所述包被板为包被有犬瘟热病毒抗体的发光板，所述犬瘟热病毒抗体的稀释度为I =700-1000，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体稀释度为1:2500 ； 所述发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板； 所述犬瘟热病毒抗体的包被是将犬瘟热病毒抗体置于0.lmol/L的包被溶液中，在4°C的温度下反应包被12h，然后采用封闭溶液密封于发光板上的孔内； 所述包被溶液为碳酸钠和碳酸氢钠溶于水中制成的碳酸盐缓冲液，且碳酸根的浓度为0.lmol/L ； 所述封闭溶液为每IOOml水中加入IOg的BSA制成的BSA溶液，然后向其中依次加入BSA溶液重量5%的脱脂奶粉、1%的明胶和0.05%的NaN3。2.根据权利要求1所述的一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，其特征在于:所述辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种犬瘟热病毒抗原化学发光检测试剂盒，包括设置在盒体内的包被板和试剂，所述试剂包括辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体、包被溶液、封闭溶液、洗涤液和化学发光液，其特征在于：所述包被板为包被有犬瘟热病毒抗体的发光板，所述犬瘟热病毒抗体的稀释度为1：700‑1000，辣根过氧化酶标记的羊抗鼠的抗体稀释度为1：2500；所述发光板为乳白色不透明聚苯乙烯96孔化学发光板；所述犬瘟热病毒抗体的包被是将犬瘟热病毒抗体置于0.1mol/L的包被溶液中，在4℃的温度下反应包被12h，然后采用封闭溶液密封于发光板上的孔内；所述包被溶液为碳酸钠和碳酸氢钠溶于水中制成的碳酸盐缓冲液，且碳酸根的浓度为0.1mol/L；所述封闭溶液为每100ml水中加入10g的BSA制成的BSA溶液，然后向其中依次加入BSA溶液重量5%的脱脂奶粉、1%的明胶和0.05%的NaN3。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王善普，吴庭才，王兴兵，王晓军，王宇东，
申请(专利权)人：洛阳莱普生信息科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41
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