一种利用黄鲫蛋白抗菌肽液热反应物分离前列腺癌PC-3抗癌肽的方法及其抗癌肽技术

本发明专利技术涉及一种利用黄鲫蛋白抗菌肽液热反应物分离前列腺癌PC-3抗癌肽的方法及其抗癌肽，其特征在于步骤为：1)制备黄鲫蛋白抗菌肽液，调节黄鲫蛋白抗菌肽液的pH值至5.0～7.0；2)对黄鲫蛋白抗菌肽液热处理，在100～121℃杀菌锅中加热30～60min，以制得黄鲫蛋白抗菌肽液的热反应产物；3)从黄鲫蛋白抗菌肽液热反应产物中分离抗癌肽。与现有技术相比，本发明专利技术的优点在于：以黄鲫蛋白抗菌肽液为出发底物，经二步凝胶分离，从黄鲫蛋白抗菌肽液的热反应产物中分离得到前列腺癌PC-3抗癌肽纯度高于94%，分子量小，易于人体吸收不易引起过敏反应。该抗癌肽的化学合成肽对前列腺癌PC-3肿瘤细胞的增殖抑制表现出剂量依赖特点，并且对PC-3肿瘤细胞有非常明显的诱导凋亡作用，能将细胞分裂阻滞于S期。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用黄鲫蛋白抗菌肽液热反应物分离前列腺癌PC‑3抗癌肽的方法，其特征在于步骤为：1）制备黄鲫蛋白抗菌肽液，调节黄鲫蛋白抗菌肽液的pH值至5.0～7.0；2）对黄鲫蛋白抗菌肽液热处理，在100～121℃杀菌锅中加热30～60min，以制得抗癌型黄鲫蛋白抗菌肽液热反应产物；3）从黄鲫蛋白抗菌肽液热反应产物中分离前列腺癌PC‑3抗癌肽，上述黄鲫蛋白抗菌肽液热反应产物经Bio‑Gel P‑4凝胶色谱洗脱分离，上样量为柱体积的1～3%，以摩尔浓度20～200mM（含0.15～0.45mol/L NaCl）的磷酸盐缓冲液（pH值5.0～7.0）为洗脱剂，洗脱速度1.5～2.5mL/min，检测波长280nm，分别合并各个分离峰，旋转蒸发浓缩，冻干，测定各分离峰对前列腺癌PC‑3肿瘤细胞的增殖抑制率，将Bio‑Gel P‑4凝胶色谱分离的抗癌活性最高峰用交联葡聚糖G25凝胶色谱进行二次分离，上样量为柱体积的1～3%，去离子水洗脱同时实现脱盐处理，洗脱速度0.5～2.5mL/min，检测波长280nm，收集分离图谱中各分离峰，旋转蒸发浓缩，冻干，分别测定各分离峰对前列腺癌PC‑3肿瘤细胞的增殖抑制率，反复收集抗癌活性最高峰，经旋转蒸发浓缩，冻干，即得到所述抗癌肽粉。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：宋茹，韦荣编，
申请(专利权)人：浙江海洋学院，
类型：发明
国别省市：浙江;33