壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法技术

技术编号:9810268 阅读:143 留言:0更新日期:2014-03-26 18:15
本发明专利技术涉及壶瓶碎米荠培养领域,具体涉及一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法,其包括如下步骤:取材及处理、愈伤诱导、不定芽的诱导、生根培养以及移栽。本发明专利技术培养方法简便,都使用常用的培养基,成本低,成活率高,是一种值得推广的壶瓶碎米荠的快速培养方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及壶瓶碎米荠培养领域,尤其涉及一种。
技术介绍
壶瓶碎米荠,是我国特有的十字花科碎米荠属植物新种,当地百姓做野生蔬菜经常采食,单株重达400克,具有超强的富硒能力,但是限于其产量较低,急需一种简易的培养技术。
技术实现思路
本专利技术提供一种,其方法简便、成活率高。本专利技术实施例提供一种,其包括如下步骤: 取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄,清水冲洗后消毒处理; 愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上,在温度20-25摄氏度、光照强度20-27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天的环境下培养13~15天,壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成; 不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35天,至愈伤组织上形成绿色芽点,继续培养12~17天,大量丛生芽生成; 生根培养:丛生芽长至2-3厘米时,将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上,25~30天根系形成,成为再生苗; 移栽:选根系发达的再生苗,炼苗4~8天后洗净培养基,移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中,覆盖塑料薄膜,弱光环境下生长8~12天后移至自然条件下生长。对上述技术方案的进一步改进为:所述取材及处理步骤中消毒处理后将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米Χ0.5厘米小方块。优选地,所述消毒处理步骤具体为:在2飞摄氏度低温处理6~15小时后,用50%~90%酒精浸泡2~10秒,用无菌水冲洗数次,用0.05%~0.2%的氯化汞溶液浸泡消毒数分钟,再用无菌水冲洗数次。其中,所述诱导分化培养基为:MS+6_BA 2.0毫克/升+NAA 0.1,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,pH为5.8,在110-130摄氏度下湿热灭菌10-30分钟。其中,所述生根培养基为:1/2MS+NAA 0.3,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,pH为5.8,在110~130摄氏度下湿热灭菌10~30分钟。所述移栽步骤中,蛭石、泥炭土和珍珠岩的比例为1:1:1。所述取材及处理中,清水冲洗时间为广2小时。优选地,所述愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养步骤中,培养环境为温度20~25摄氏度、光照强度20~27摩尔/平方米/秒、光照10~17小时/天。本实施例,有益效果是: 通过在培养基上经过愈伤诱导、不定芽的诱导以及生根培养后移栽培育,培养方法简便,都使用常用的培养基,成本低,成活率高,是一种值得推广的壶瓶碎米荠的快速培养方法。【具体实施方式】为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将对本专利技术作进一步地详细描述。实施例1: 本实施例提供一种,其包括如下步骤: 制作培养基: 诱导分化培养基:用MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,调节PH至5.8,在121摄氏度下湿热灭菌20分钟。生根培养基:用1/2MS+NAA 0.3,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,调节pH至5.8,在121摄氏度下湿热灭菌20分钟。取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄,清水冲洗2小时,在4摄氏度低温处理12小时后,用75%酒精浸泡7秒,用无菌水冲洗3次,用0.1%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟,再用无菌水冲洗3次,将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上,在温度23摄氏度、光照强度24摩尔/平方米/秒、光照14小时/天的环境下培养,4天后培养基出现愈伤组织,呈现淡绿色,14天后,80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长30天,至愈伤组织上形成绿色芽点,继续培养15天,大量丛生芽生成。生根培养:丛生芽长至2-3厘米时,将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上,相同的培养环境下培养30天后根系形成,生根率为100%,成为再生苗。移栽:选根系发达的再生苗,炼苗7天后洗净培养基,移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中,覆盖塑料薄膜,弱光环境下生长10天后移至自然条件下生长即可。经检测,上述移栽的壶瓶碎米荠再生苗成活率达90%以上。实施例2: 本实施例提供一种,其包括如下步骤: 制作培养基: 诱导分化培养基:用MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,调节PH至5.8,在110摄氏度下湿热灭菌10分钟。生根培养基:用1/2MS+NAA 0.3,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,调节pH至5.8,在110摄氏度下湿热灭菌10分钟。取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄,清水冲洗I小时,在2摄氏度低温处理6小时后,用50%酒精浸泡2秒,用无菌水冲洗3次,用0.05%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟,再用无菌水冲洗3次,将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上,在温度20摄氏度、光照强度20摩尔/平方米/秒、光照10小时/天的环境下培养,3天后培养基出现愈伤组织,呈现淡绿色,13天后,80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长25天,至愈伤组织上形成绿色芽点,继续培养12天,大量丛生芽生成。生根培养:丛生芽长至2-3厘米时,将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上,相同的培养环境下培养25天后根系形成,生根率为100%,成为再生苗。移栽:选根系发达的再生苗,炼苗4天后洗净培养基,移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中,覆盖塑料薄膜,弱光环境下生长8天后移至自然条件下生长即可。实施例3: 本实施例提供一种,其包括如下步骤: 制作培养基: 诱导分化培养基:用MS+6-BA 2.0毫克/升+NAA 0.1,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,调节pH至5.8,在130摄氏度下湿热灭菌30分钟。生根培养基:用1/2MS+NAA 0.3,并添加30克/升蔗糖和7克/升琼脂,调节pH至5.8,在130摄氏度下湿热灭菌30分钟。取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄,清水冲洗2小时,在6摄氏度低温处理15小时后,用90%酒精浸泡10秒,用无菌水冲洗3次,用0.2%的氯化萊溶液浸泡消毒10分钟,再用无菌水冲洗3次,将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米的小方块。愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上,在温度25摄氏度、光照强度27摩尔/平方米/秒、光照17小时/天的环境下培养,4天后培养基出现愈伤组织,呈现淡绿色,15天后,80%以上叶柄外植体可见有绿色愈伤组织形成。不定芽的诱导:形成的愈伤组织在相同的培养基及培养环境下继续生长35天,至愈伤组织上形成绿色芽点,继续培养17天,大量丛生芽生成。生根培养:丛生芽长至2-3厘米时,将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上,相同的培养环境下培养30天后根系形成,生根率为100%,成为再生苗。移栽:选根系发达的再生苗,炼苗8天后洗净培养基,移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩比例1:1:1的混合基质中,覆盖塑料薄膜,弱光环境下生长12天后移至自然条件下生长即可。经检测,上述移栽的壶瓶碎米荠再生苗成活率达90%以上。以上是本专利技术的优选实施方式,应当指出,对于本
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【技术保护点】
一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,包括依次进行的如下步骤:取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄,清水冲洗后消毒处理;愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上培养13~15天,?壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成;不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35?天,至愈伤组织上形成绿色芽点,继续培养12~17?天,大量丛生芽生成;生根培养:丛生芽长至2?3?厘米时,将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上,25~30?天根系形成,成为再生苗;移栽:选根系发达的再生苗,炼苗4~8天后洗净培养基,移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中,覆盖塑料薄膜,弱光环境下生长8~12?天后移至自然条件下生长。

【技术特征摘要】
1.一种壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于,包括依次进行的如下步骤: 取材及处理:取壶瓶碎米荠的茎、幼叶或叶柄,清水冲洗后消毒处理; 愈伤诱导:将壶瓶碎米荠接种在诱导分化培养基上培养13~15天,壶瓶碎米荠外植体可见有绿色愈伤组织形成; 不定芽的诱导:形成的愈伤组织续生长25~35天,至愈伤组织上形成绿色芽点,继续培养12~17天,大量丛生芽生成; 生根培养:丛生芽长至2-3厘米时,将丛生芽进行切割后接种到生根培养基上,25~30天根系形成,成为再生苗; 移栽:选根系发达的再生苗,炼苗41天后洗净培养基,移栽到蛭石、泥炭土和珍珠岩的混合基质中,覆盖塑料薄膜,弱光环境下生长8~12天后移至自然条件下生长。2.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于, 所述取材及处理步骤中消毒处理后将壶瓶碎米荠材料剪成0.5厘米X0.5厘米小方块。3.如权利要求1所述壶瓶碎米荠的组织培养与快速繁殖方法,其特征在于: 所述消毒处理步骤具体为:在2飞摄氏度低温处理6~15小时后,用50%~90%酒精浸泡2^10秒,用无菌水冲洗数次,用0...

【专利技术属性】
技术研发人员:白宏锋
申请(专利权)人:湖北盛硒生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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