一种甜菜内生微杆菌及其用于甜菜病害生物防治中的应用制造技术

本发明专利技术公开一种甜菜内生微杆菌MicrobacteriummaritypicumTNJK2011CGMCCNo.8193及其在在用于甜菜病害生物防治中的应用。通过通过对所获菌株进行形态特征、生理生化特性及16SrDNA序列测定及系统发育分析，初步确定了其分类地位；同时对该细菌TNJK2011的发酵液的抑菌率、生防性、稳定性等特性进行了深入研究，从已经分离的甜菜内生菌中筛选甜菜根腐病、甜菜褐斑病、甜菜立枯病、甜菜蛇眼病内生拮抗细菌，以期获得防治甜菜主要病害的新途径，具有广泛的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种甜菜内生微杆菌及其用于甜菜病害生物防治中的应用
本专利技术涉及农业微生物应用
，具体说，本专利技术涉及一种甜菜内生菌及其用于甜菜病害生物防治中的应用的
。
技术介绍
植物体内的大量微生物，在与植物协同进化的过程中，由于长期生活在植物特定部位，因而与植物形成了一种特殊的关系，这些微生物在植物体内大量繁殖和扩散，有望成为生物防治中有潜力的微生物。内生细菌是植物体内种类和数量最多的微生物，具有在植株体内分布广、定殖能力强、防病效果好及增殖和扩散快等优点，因而成为具有良好应用前景的植物病害生防菌。内生菌普遍存在于植物体内，与宿主形成和谐的共生体，产生大量次生代谢活性物质。据报道，内生菌可增强宿主的抗病性、提高植物的生产力、抗逆抗虫、具有除草剂活性等特性。因此，内生菌可作为生物促生中有潜力的因子，在生态农业和生物农药研制方面具有重要的用途。植物内生细菌(Endophytic bactena )可通过不同途径促进其宿主植物生长，其作用与植物根围细菌相似(PGPR)，植物根围细菌也就是常说植物根围促生细菌(Plant growth -promo ting rAizoAacteria,简称PGPR),生存于植物根际、根表,能够直接或间接地促进或调节植物 以及作物生长。植物内生细菌能固定大气中的氮供给其宿主植物利用；合成铁载体能够溶解并吸收土壤中铁供给其宿主植物利用；合成植物激素促进植物不同生长阶段的生长，具有溶解矿物质如磷的机制，使其更有利于植物利用；作用于生长有关的酶使其调节植物的生长发育。甜菜内生菌0?而—是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康甜菜各种组织和器官内部或细胞间隙的真菌、细菌和放线菌。作为植物微生态系统的天然组成成员，内生细菌可在植物体内长期定殖，某些内生细菌可通过产生抗生素、水解酶类等抗菌活性物质在植物体内长期发挥生防作用；相对于腐生细菌、PGPR (植物促生菌)等生防因子，内生细菌不易受环境条件的影响，可在植物体内定殖和传导，更有利于发挥生防作用，已成为植物病害生物防治上一类极具应用潜能的新资源菌。已有研究者从棉花、水稻、烟草、辣椒、番茄、马铃薯等作物中分离到对宿主植物病害具有良好防治效果的内生细菌，但目前尚未见甜菜内生细菌用于病害生物防治的研究报道。
技术实现思路
针对现有技术未见有关甜菜内生细菌用于病害生物防治的研究报道的技术的现状，本专利技术旨在提供一种甜菜内生微杆菌及其用于甜菜病害生物防治中的应用，本专利技术基于植物内生菌与植物和谐联合的关系，在甜菜中分离出一批内生菌的菌株，从中筛选出一株编号为TNJK2011的菌株，并通过利用该编号为TNJK2011的内生菌有效地防治甜菜生育期的根腐病、褐斑病、立枯病、蛇眼病等病害，将病害对甜菜生产的不利影响降低到最低限度，有利于提高甜菜的产量和品质，获得良好的技术效果，作为甜菜病害生物防治中具有广泛而适用的价值。本专利技术采用主要的技术方案: 通过甜菜内生菌的分离筛选，在甜菜中分离出一批甜菜内生的微生物菌株，经过进一步筛选、驯化选育，获得一株编号为TNJK2011。通过对所获菌株进行形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列测定及系统发育分析，初步确定了其分类地位；同时对该细菌TNJK2011的发酵液的抑菌率、生防性、稳定性等特性进行了深入研究，从已经分离的甜菜内生菌中筛选甜菜根腐病、甜菜褐斑病、甜菜立枯病、甜菜蛇眼病内生拮抗细菌，以期获得防治甜菜主要病害的新途径。通过内生菌有效地防治甜菜生育期的各类病害，将病害对甜菜生产的不利影响降低到最低限度，证明了编号为TNJK2011是一种优良的内生生防菌，有利于提高甜菜的产量和品质，充分保障糖厂原料的充足供应，对于稳定甜菜生产，提高农民种植甜菜的积极性，实现农户、糖厂的增产增收，增强新疆糖业的市场竞争力有着深远的意义。通过将此内生菌在甜菜栽培上的应用获得良好作用，具有突出的技术效果。本专利技术具体提供的一种甜菜内生微杆菌Microbac terium mari typicum,通过在甜菜中分离、筛选和培养，获得一批内生的微生物菌株，从中筛选出一株编号为TNJK2011的菌株，经微生物学分类与鉴定，属于内生微杆菌#丨crobac teri um mari typi cum。具体的，本专利技术提供的一种甜菜内生微杆菌Mi crobac teri um mari typi cum,菌株编号为TNJK2011。该菌株已于申请日前保藏于布达佩斯条约微生物国际保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)。地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编:100101。保藏日期是2013年9月16日，保藏号是CGMCC N0.8193。该菌株最适生长条件为:温度32°C，培养基采用胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)培养基，培养条件:pH7.2，时间48h;该菌株菌落较大且平滑，呈透明、黄色、表面湿润、边缘整齐，生长较快；通过革兰氏染色，镜检观察，发现该菌株为革兰氏阳性菌，经微生迦学鉴定％ Microbacterium mari typicum菌。依照第九版《伯杰氏系统细菌学鉴定手册》(JiBergey，s Manual of` Systematic和《常用细菌系统鉴定手册》对TNJK2011菌株进行形态学测定，生理生化检测确定TNJK2011Microbacterium属中的成员。通过BLAST同源比对，菌株TNJK2011的16S rDNA序列在NCBI数据库中进行BLAST分析后，构建系统进化树，该菌株TNJK2011maritypicumDSM 12512处于最小分支，是其近似种；进而将该菌株TNJK2011确定mari typi cum。本专利技术提供的内生促生菌#/^/0如<^ teria? mari typicum TNJK2011培养时使用的主要氮源包括但不限于蛋白胨酵母粉；使用的主要碳源包括但不限于蔗糖、甘露糖、甘油、麦芽糖；使用的无机组分包括包括但不限于氯化钾、氯化钠、磷酸二氢钠、氢二钾、磷酸三钙、二水氯化钙、七水合硫酸镁、七水和硫酸亚铁。本专利技术的根际促生菌发酵可在20-37 °C, pH5.5-9.1的环境下进行。并且该内生拮抗菌TNJK2011能有效抑制根腐病、褐斑病、立枯病、蛇眼病病原菌生长。进一步，本专利技术提供一种甜菜内生微杆菌Microbacteriutn mari typicumTNJK2011 CGMCC N0.8193在用于甜菜病害生物防治中的应用。通过将该菌种TNJK2011菌株对于甜菜具有抑制根腐病、褐斑病、立枯病、蛇眼病病原菌作用，获得良好的技术效果。本专利技术进一步提供了甜菜内生微杆菌mari typicum TNJK2011CGMCC N0.8193的保存条件，采用TSA培养基成分:TSA胰蛋白胨17g，大豆蛋白胨3g，葡萄糖 2.5g，氯化钠 5g K2HPO4 2.5g PH=7.2 定容至 1000ml ;培养条件:28°C, PH=7.0。通过实施本专利技术具体的
技术实现思路
，可以达到以下有益效果: 本专利技术分离筛选提供的甜菜内生微杆菌crobac teri um mari typi cum TNJK2011CGM本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种甜菜内生微杆菌Microbacterium?maritypicum?TNJK2011，其特征在于，所述的甜菜内生微杆菌Microbacterium?maritypicum?TNJK2011的菌种保藏号为CGMCC?No.?8193。

【技术特征摘要】
1.一种甜菜内生微杆菌#/^(9如maritypicum TNJK2011，其特征在于，所述的甜菜内生微杆菌如cteri训？ maritypicum TNJK2011的菌种保藏号为CGMCC N0.8193。2.—种如权利要求1所述的甜菜内生微杆菌#/^(9/?况teri?舰TNJK2011在...

【专利技术属性】
技术研发人员：史应武，杨红梅，高雁，张涛，林青，常玮，李玉国，欧提库尔玛合木提，娄恺，
申请(专利权)人：新疆农业科学院微生物应用研究所，
类型：发明
国别省市：