一种量子点标记的试条卡制造技术

本发明专利技术涉及体外诊断领域，具体涉及一种自身带有被检物标准曲线或系数参数等检测用信息、结合具有信号检测功能的仪器能快速定量样品单一组分或多组分浓度的量子点标记的试条卡。所述试条卡检测样品具有简便快速、灵敏度高、结果客观、使用灵活等特点。

【技术实现步骤摘要】
一种量子点标记的试条卡
本专利技术属于体外诊断领域，具体涉及一种自身带有被检物标准曲线或系数参数等检测用信息、结合具有信号检测功能的仪器能快速定量样品单一组分或多组分浓度的量子点标记的试条卡。
技术介绍
胶体金免疫层析技术(Gold-1mmunochromatography Assay, GICA)现已广泛应用于免疫检测的各个方面，其以微孔滤膜为载体，利用微孔滤膜的毛细管作用，使滴加在膜条一端的液体样品慢慢向微孔滤膜另一端渗移，若液体中有特异抗原或抗体，它们可以和免疫金结合后再与包被在微孔滤膜上的相应抗体或抗原结合而显示免疫金颜色(红色)。该技术简单快速，几分钟就能用肉眼观察结果。不足之处是:(1)只能定性检测样品，难能实现样品定量。(2)难能做到样品多组分同时检测，检测效率低。(3)对于某些抗原或抗体含量极低的样本，胶体金颜色很浅很难用肉眼判断结果，检测灵敏度低。实现样品多组分快速定量检测，一直是人们长期追求的目标。近年发展的纳米量子点(quantum dots, QDs)，具有独特优良光学性质:荧光发光效率高，激发谱线范围宽，能“一元激发，多元发射”，发射谱线范围窄且对称，光漂白速度慢，荧光寿命长，粒径与生物分子相近，表面修饰后能多功能化，不同粒径和种类的量子点混合物产生的特征波长荧光光谱不交叠，非常适于样品多组分分析。Sweeny等将三种一抗分别与三种不同发射波长的量子点(λ em=705nm,605nm和655nm)通过生物素-亲和素的特异性结合形成抗体-量子点复合物，通过荧光成像实现了扁桃体中3种不同抗体的同时分析，证明应用多色量子点可在同一样品中同时定位多种生物标志物。Nie等用4种不同发射波长的量子点标记4种抗体实现了对霍奇金淋巴瘤中病理标志性细胞HRS (Hodgkin，s and Reed-Sternberg)的成像检测，提高了检测灵敏度和特异性，有利于临床快速准确地诊断霍奇金淋巴瘤。Kobayashi等和Chan等分别用两种不同颜色的近红外量子点成像分析小鼠的淋巴管流路和左右胸腔，证明了近红外量子点的多重成像分析作用。利用量子点的荧光特性除了进行成像分析外还可以实现对多种病原体、毒素、抗原、抗体、酶、小分子物质以及离子等的定性定量分析。Zahavy 等制备突光探针 QD585_IgG α B.anthracis 和 QD655_IgG α Y.pestis,结合流式细胞仪实现了两种致病菌的同时定量检测，检测限可达到103cfu/mL。Goldman课题组用多色量子点实现了葡萄球菌产生的肠毒素B和2，4，6-三硝基甲苯以及霍乱毒素、蓖麻毒素、志贺毒素和葡萄球菌毒素四种毒素的同时检测。除此之外，在微流体蛋白质芯片中用量子点作荧光标记，利用其荧光多色性能够同时快速检测肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)和甲胎蛋白(AFP)，检测限低至250fmol/L，比用有机荧光染料检测高4个数量级。Giorgio等将血管内皮生长因子A (VEGF A)和血管生成素(angiopoietin)分别与不同发射波长的量子点构成荧光探针，通过抗原抗体特异性结合反应引起量子点的聚集，用流式细胞仪定量检测特征荧光信号从而得到相应抗原的浓度，检测限为lpmol/L，实现了多种抗原的同时检测。近些年来，不少研究者利用量子点编码的方法进行多组分分析。这一技术主要是借助量子点荧光颜色和荧光强度的丰富性进行编码，能够同时测定更多的组分，可实现对蛋白质分析、DNA分析及药物筛选等研究中所蕴藏的海量信息的同步分析。理论上，种强度《种颜色能够产生Z-1种代码，利用解码技术可以实现对Z-1种目标物的分析检测。根据计算，只需用5~6种颜色与6种不同发光强度的量子点纳米粒子进行组合，就能得到10000~40000个可识别的纳米粒子编码微球。如果与10种不同发光强度的量子点纳米粒子进行组合，则能得到100万个可识别的纳米粒子编码微球，这些微球理论上可以对100万个不同的DNA或蛋白质进行编码标记，从而实现对样品中的100万个不同的DNA或蛋白质进行同时检测！ Nie等将红、绿、蓝三种不同颜色的量子点以的比例包裹入聚苯乙烯微球进行编码，通过所得荧光光谱的不同特性实现了三种目标DNA的同时检测。采用类似技术，Gu和Sha等将两种不同发射波长的量子点以三种强度分别对DNA敏感型的水凝胶和微球进行编码分别实现了多种不同序列的单链DNA的定量检测和多种寡核苷酸的高通量筛选分型。Wilson和Cooper等分别利用此技术实现了三种血清蛋白(鸡卵白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA、人血清白蛋白HAS)以及四种免疫球蛋白G (人IgG、兔IgG^^ IgG、羊IgG)的同时检测。中国申请号专利200410010736.3，用胶体金标记抗体与目标物结合，通过免疫反应与膜上包被量子点标记的抗体结合，形成检测带，在用肉眼对检测带进行初步定性或半定量检测的基础上，再利用胶体金对荧光纳米粒子的荧光淬灭作用，通过检测荧光信号的淬灭程度对检测条带进行定量检测。该专利要用两种粒子标记，方法不够简单；采用荧光信号的淬灭程度进行定量检测，干扰因素多，检测灵敏度低。中国申请号专利200610024086.7披露了一种量子点标记快速免疫层析试纸条的检测方法。该专利虽能实现多组分同时检测，但请求保护的是一种方法，没有提出请求保护基于量子点标记快速免疫层析试纸条产品。而且，该方法存在不足:(1)实现样品多组分检测需要在分析膜上同时设置多条相应的检测线，即每条检测线只用于检测样品中的一种指标，检测效率低。如果检测者想要同步检测样品中大量组分、通量组分、甚至海量组分，一个小小试条不可能通过设置如此众多相应的检测线来实现检测目标。(2)采用紫外灯照射试纸条检测带与质控带以观察其荧光线有无或者强弱从而判断样品中是否含有目标物，真正意义上说，此仍是一种定性检测，或者至多只能达到对某种被检物的最低可检限测定，不能从根本上实现样品中任意组分的准确浓度检测，灵敏度仍低。采用被检物标准品标准曲线定量被检物浓度，是检测领域定量样品浓度的主要方法。信息领域近来发展的存贮介质，如RFID标签(又称射频识别标签)、IC芯片、磁码、条码等，用于信息存取识别现已广泛用于计算机、通讯、电子、商业、交通运输控制管理等领域，其中，尤其是RFID标签，体积小，存储信息容量大，识别无须人工干预，更是信息存取识别的理想手段，但目前很少有人将其用于生物医学检测。本专利技术针对现有技术的不足和缺陷，提供一种其上安装有存贮介质12的量子点标记试条卡，该存贮介质12储存有同批次量子点标记试条2定量被检物浓度用的标准曲线或系数参数等检测用信息。样品在试条2上完成试条反应后，由具有信号检测功能的仪器采集试条卡卡盒3内试条2检测带6和质控带7的特征信号并结合该仪器从存贮介质12同时读取来的被检物标准曲线或系数参 数而计算获得样品单组分或多组分浓度。本专利技术用于定量样品浓度特别是样品多组分浓度具有简便快速、灵敏度高、结果客观、使用灵活等特点。
技术实现思路
本专利技术技术方案如下: 本专利技术所述的量子点标记的试条卡，包括卡盒3和其内的量子点标记试条2。所述量子点标记试条2包括顺次搭接固定在底衬I上的样品垫4、标记垫5、分析膜8、吸水垫9本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种量子点标记的试条卡，包括卡盒（3）和其内的量子点标记试条（2），量子点标记试条（2）包括顺次搭接固定在底衬（1）上的样品垫（4）、标记垫（5）、分析膜（8）、吸水垫（9），分析膜（8）具有检测带（6）和质控带（7），检测带（6）为一条或多条，卡盒（3）的上盒面在对应于试条样品垫（4）位置处开有加样孔（10），卡盒（3）的上盒面在对应于试条分析膜（8）位置处开有检测窗（11），其特征在于：所述卡盒（3）上安装有一存贮介质（12）；所述量子点标记试条（2）的标记垫（5）包被有单一量子点标记的某一目标被检物检测相关的单一特异分子，或：包被有不同单一量子点对应标记的各目标被检物检测相关的特异分子的混合物；所述量子点标记试条（2）的检测带（6）包被有某一目标被检物检测相关的另一特异分子，或：包被有各目标被检物检测相关的另一特异分子的混合物；所述量子点标记试条（2）的质控带（7）包被有包括二抗的质控物；所述量子点标记试条（2）的标记垫（5）的所述单一量子点包括ZnS、CdS、HgS、ZnSe、CdSe、HgSe、CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/PbS、CdS/Cd(0H)2、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、SrS、SrSe、SeTe、BaS、BaSe、BaTe、CdS:Mn、ZnS:Mn、CdS:Cu、ZnS:Cu、CdS:Tb、ZnS:Tb中的任意一种或任意几种纳米粒子的组合，以及由上述任意一种量子点为核、二氧化硅为壳的核?壳型纳米复合粒子；所述存贮介质（12）包括RFID标签、IC芯片、磁码、或条码；所述存贮介质（12）储存有同批次量子点标记试条（2）定量样品浓度用的被检物标准曲线或系数参数、试条质控带光密度参考监控值、试条批号、试条效期、存储介质密码、临床指标参考值、试条生产厂商信息，且可读入被测对象身份信息、检测者信息、样品名称、样品编号、检测日期、检测结果信息；所述存贮介质（12）储存的被检物标准曲线有多种形式可供选择，其包括：被检物标准品系列浓度与OD检测带/OD质控带之间的对应关系曲线；或，被检物标准品系列浓度与OD检测带/（OD检测带+OD质控带）之间的对应关系曲线；其中，OD检测带为被检物标准品系列浓度测得的检测带光密度值，OD质控带为被检物标准品系列浓度测得的质控带光密度值；所述量子点标记试条（2）的标记垫（5）为玻璃纤维膜，所述量子点标记试条（2）的分析膜（8）为硝酸纤维素膜、尼龙膜、或硝酸纤维素/醋酸纤维素混合膜；所述量子点标记试条（2）的底衬（1）为聚脂或塑料板；所述卡盒（3）为聚脂、塑料、或硬性纸质材料做成；具有信号检测功能的仪器采集其试条（2）检测带（6）和质控带（7）的特征信号并结合该仪器从存贮介质（12）同时读取的被检物标准曲线或系数参数而计算获得样品单组分或多组分浓度。...

【技术特征摘要】
1. 一种量子点标记的试条卡，包括卡盒(3)和其内的量子点标记试条(2),量子点标记试条(2)包括顺次搭接固定在底衬(I)上的样品垫(4)、标记垫(5)、分析膜(8)、吸水垫(9)，分析膜(8)具有检测带(6)和质控带(7)，检测带(6)为一条或多条，卡盒(3)的上盒面在对应于试条样品垫(4)位置处开有加样孔(10)，卡盒(3)的上盒面在对应于试条分析膜(8)位置处开有检测窗(11)，其特征在于: 所述卡盒(3 )上安装有一存贮介质(12); 所述量子点标记试条(2)的标记垫(5)包被有单一量子点标记的某一目标被检物检测相关的单一特异分子，或:包被有不同单一量子点对应标记的各目标被检物检测相关的特异分子的混合物； 所述量子点标记试条(2)的检测带(6)包被有某一目标被检物检测相关的另一特异分子，或:包被有各目标被检物检测相关的另一特异分子的混合物； 所述量子点标记试条(2)的质控带(7)包被有包括二抗的质控物； 所述量子点标记试条(2)的标记垫(5)的所述单一量子点包括ZnS、CdS> HgS> ZnSe>CdSe、HgSe、CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/PbS、CdS/Cd (OH) 2、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、CdTe/HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、SrS、SrSe、SeTe, BaS, BaSe, BaTe, CdS:Mn, ZnS:Mn, CdS:Cu、ZnS:Cu、CdS:Tb、ZnS:Tb 中的任意一种或任意几种纳米粒子的组合，以及由上述任意一种量子点为核、二氧化硅为壳的核-壳型纳米复合粒子； 所述存贮介质(12)包括RFID标签、IC芯片、磁码、或条码； 所述存贮介质(12)储存有同批次量子点标记试条(2)定量样品浓度用的被检物标准曲线或系数参数、试条质控带光密度参考监控值、试条批号、试条效期、存储介质密码、临床指标参考值、试条生产厂商信息，且可读入被测对象身份信息、检测者信息、样品名称、样品编号、检测日期、检测结果信息； 所述存贮介质(12)储存的被检物标准曲线有多种形式可供选择，其包括:被检物标准品系列浓度与OD/OD之间的对应关系曲线；或，被检物标准品系列浓度与OD(0D+ODm)之间的对应关系曲线；其中，ODs3^为被检物标准品系列浓度测得的检测带光密度值，OD为被检物标准品系列浓度测得的质控带光密度值； 所述量子点标记试条(2 )的标记垫(5 )为玻璃纤维膜，所述量子点标记试条(2 )的分析膜(8)为硝酸纤维素膜、尼龙膜、或硝酸纤维素/醋酸纤维素混合膜；所述量子点标记试条(2)的底衬(I)为聚脂或塑料板；所述卡盒(3)为聚脂、塑料、或硬性纸质材料做成； 具有信号检测功能的仪器采集其试条(2)检测带(6)和质控带(7)的特征信...

【专利技术属性】
技术研发人员：马义才，顾敏，马灵，
申请(专利权)人：成都领御生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：