一种促凝血补骨脂有效成分及其提取分离方法、应用技术

本发明专利技术属于中药提取技术领域，具体涉及一种促凝血补骨脂有效成分及其提取分离、应用。该促凝血补骨脂有效成分由补骨脂中提取分离得到，同时，该有效成分可以缩短血浆复钙时间，从而起到促凝血的作用，可应用于制备促凝血药物。

【技术实现步骤摘要】
一种促凝血补骨脂有效成分及其提取分离方法、应用
本专利技术属于中药提取
，具体涉及一种促凝血补骨脂有效成分及其提取分离方法、应用。
技术介绍
补骨脂Fructus为豆科植物补骨脂corylifolia Linn.的干燥果实，又名破故纸、黑故子等，为常用中药，味辛、苦、性温，归肾、脾经，具有补肾助阳，纳气平喘，温脾止泻的功效。现代研究表明，补骨脂含黄酮类、香豆素类、脂肪酸类和单萜酚类等多种化学成分，具有抗氧化、降血糖、扩张血管、保肝、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、雌激素样和抑制葡萄糖苷酶等作用。补骨脂甲素(bavachin)，别名:补骨脂二氢黄酮；分子式=C2tlH2tlO4 ;分子量:324.37 ；CAS登录号:19879_32_4 ;本品为一种查尔酮类化合物，其开环生成的查耳酮具有扩张冠脉的作用；能显著提高ALP活性，并能促进骨细胞的增殖和分化的作用，可用于骨质疏松的治疗。另外，补骨脂甲素对猪油有一定的抗氧化作用；能直接抑制sinilan病毒SV40DNA聚合酶的复制；其为补骨脂的主要抑菌活性成分，对苹果腐烂病菌具有很高的抑制活性，其EC5tl为6.144 g/L，EC9tl为89.631 g/L，显示出一定的农用价值。此外，补骨脂甲素有较强的由于毒性所至的抗诱变活性。大豆苷元(da idzein)，别名:大豆甙元、黄豆苷元、大豆素、大豆黄酮；分子式:C15H10O4 ;分子量:254.24 ；CAS登录号:486_66_8 ;本品是一种异黄酮类植物雌激素，呈白色粉状，无毒、无味、不溶于水，在醇、酮类溶剂中有一定的溶解度，极易溶于二甲亚砜中，主要存在于黄豆、鹰嘴豆、小扁豆和蚕豆等豆类中，具有抗氧化、抗动脉粥样硬化、抑制血管平滑肌细胞增殖、抗心律失常、保护急性心肌缺血和脑缺血、弱雌激素样(在内源性雌激素水平低时)与抗雌激素样作用(体内雌激素水平较高时)、免疫调节、抗肿瘤、抑制前列腺增生等作用。另有研究证实可抑制嗜酒大鼠的酒精消耗，显著抑制豚鼠离体胆囊肌条自发性收缩活动，使收缩力降低，紧张性下降，还可对抗乙酰胆碱、组胺引起的离体胆囊肌条收缩运动。目前，大豆苷元主要以口服制剂应用，用于高血压、冠心病、骨质疏松、前列腺癌、乳腺癌、脑血栓、眩晕症、突发性耳聋的辅助治疗，也可用于妇女更年期综合征。紫云英苷(astragalin),别名:黄苗苷、茨非醇K-葡萄糖苷、山柰酹-3-葡萄糖苷、百蕊草素II ;分子式=C21H20O11 ;分子量:448.38 ；CAS登录号:480-10_4，具有降血压、解痉、利尿、利胆和镇咳剂等作用。血液为人体重要的物质，临床上各种原因引起的出血较为常见，如不及时有效的制止，致使血液耗损，而造成机体衰弱，甚至危及生命。一些临床症状，如①先天性缺陷症:凝血因子珊、IX、XI先天性缺乏或蛋白分子异常症、凝血因子VI1、X、V先天性缺乏症或蛋白分子异常症、纤维蛋白原或凝血酶原先天性缺乏症或蛋白分子异常症。②获得性缺乏症:严重肝病使凝血因子合成减少，如重症肝炎、慢性肝炎、肝硬化；维生素K缺乏或利用障碍，如吸收不良综合症、脂肪泻、阻塞性黄疸、广谱抗生素治疗、口服抗凝剂；消耗过多，如原发性或继发性纤溶亢进。③循环抗凝物增加或肝素治疗等均可导致血浆复钙时间延长，使血液不停地流。止血药可通过收缩小动脉及毛细血管，或增强血小板功能，或加速、加强血液凝固过程，或抑制血块溶解过程而产生止血作用。目前临床应用的止血药除少量传统药物如维生素K、氨甲环酸、卡巴克络等，大部分为生化药物如从动物血中提取的凝血酶、从动物器官中提取的抑肽酶，使用这些药品可能会发生过敏、出现血清肌酐一过性增高等不良反应。目前尚无来自于补骨脂中补骨脂甲素、大豆苷元和紫云英苷对血浆复钙时间影响的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种促凝血补骨脂有效成分，同时提供一种促凝血补骨脂有效成分的提取分离方法和应用。为了实现以上目的，本专利技术采用以下技术方案: 一种促凝血补骨脂有效成分的提取分离方法，包括以下步骤: 1)补骨脂粉碎，用甲醇浸提，浸提液合并、过滤、浓缩得补骨脂甲醇浸膏，补骨脂甲醇浸膏分散于(75-85%v/v)甲醇水溶液中，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，所得乙酸乙酯萃取物即为乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即为正丁醇部位； 2)乙酸乙酯部位进行200-300目硅胶柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，体积比例为80:1飞:5，以TLC检测合并，各组分反复经硅胶H柱色谱、LC3000型高效液相柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和重结晶得到化合物I和化合物2 ； 3)正丁醇部位经反复硅胶柱色谱，用氯仿-甲醇梯度洗脱，体积比例为100:f 7:3，经LC3000型高效液相柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱分离得到化合物3。按照以上提取分离方法得到的促凝血补骨脂有效成分。促凝血补骨脂有效成分在促凝血方面的应用。促凝血补骨脂有效成分在制备促凝血药物方面的应用。所述补骨脂甲醇浸膏的具体制备方法为:补骨脂粉碎后，用甲醇(90% v/v以上)室温浸提2-3次，每次2-4d，浸提液合并、过滤、浓缩得补骨脂甲醇浸膏。化合物1、2、3分别是补骨脂甲素、大豆苷元和紫云英苷，其结构如下:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种促凝血补骨脂有效成分的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤：1）补骨脂粉碎，用甲醇浸提，浸提液合并、过滤、浓缩得补骨脂甲醇浸膏，补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，所得乙酸乙酯萃取物即为乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即为正丁醇部位；2）乙酸乙酯部位进行200~300目硅胶柱色谱，用石油醚?乙酸乙酯梯度洗脱，比例为80:1~5:5，以TLC检测合并，各组分反复经硅胶H柱色谱、LC3000型高效液相柱色谱、Sephadex?LH?20柱色谱和重结晶得到化合物1和化合物2；3）正丁醇部位经反复硅胶柱色谱，用氯仿?甲醇梯度洗脱，比例为100:1~7:3，经LC3000型高效液相柱色谱、Sephadex?LH?20柱色谱分离得到化合物3；化合物1、2、3即为促凝血补骨脂有效成分。

【技术特征摘要】
1.一种促凝血补骨脂有效成分的提取分离方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)补骨脂粉碎，用甲醇浸提，浸提液合并、过滤、浓缩得补骨脂甲醇浸膏，补骨脂甲醇浸膏分散于甲醇水溶液中，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，所得乙酸乙酯萃取物即为乙酸乙酯部位，所得正丁醇萃取物即为正丁醇部位； 2)乙酸乙酯部位进行200-300目硅胶柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，比例为80:1飞:5，以TLC检测合并，各组分反复经硅胶H柱色谱、LC3000型高效液相柱色谱、Seph...

【专利技术属性】
技术研发人员：张伟，康文艺，尹震花，彭涛，
申请(专利权)人：黄河科技学院，
类型：发明
国别省市：