大兴安岭野生泽漆总黄酮的制备方法技术

本发明专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生泽漆里提取总黄酮的新方法，特别是涉及一种利用超高压(离子液体作为溶剂)提取，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，高速逆流色谱分离纯化总黄酮的新方法。本发明专利技术优点：1、离子液体与超高压结合，具有提取更快、更高效的优势。并且工艺简便易行，有效成分提取充分，生物碱含量高。2、聚酰胺藕联大孔树脂吸附纯化技术，能很好的富集总生物碱，进一步纯化有效成分。树脂易处理、分离速度快、费用低，可以工业化使用。3、高速逆流色谱技术具有操作灵活、高效、分离速度快、制备量大、费用低等优点，并且可以工业化使用。本发明专利技术利用上述技术所得总黄酮含量高，纯度高达98.3％。

【技术实现步骤摘要】

:本专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生泽漆里提取总黄酮的新方法，特别是涉及一种利用超高压(离子液体作为溶剂)提取，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，高速逆流色谱分离纯化总黄酮的新方法。
技术介绍
:泽漆，别名五朵云、五风草，一年生或二年生草本。高10~30cm，无毛或仅分枝略具疏毛，基部紫红色，上部淡绿色。叶互生；倒卵形或匙形，长I~3cm，宽0.7~1cm，先端微凹，边缘中部以上有细锯齿，无柄。蒴果球形，直径约3mm，3裂，光滑。种子褐色，卵形，长约2_，有明显凸起网纹，具白色半圆形种阜。含有黄酮类化合物槲皮素_3，5- 二半乳糖甙，泽漆皂甙、泽漆醇。泽漆辛、苦、微寒，有毒；有利尿消肿、化痰散结、解毒杀虫之功效。中医及临床常用其治疗腹水、水肿、肺结核、痰多喘咳、癣疮等。国内一般用有机溶剂提取法提取总黄酮，常用甲醇、乙醇为溶剂。近年来也有采用微波辅助离子液体法提取总黄酮，用大孔树脂进行纯化的报道。传统方法提取总黄酮需要几小时至十几小时，操作温度高且得率低，能耗大。本专利技术的不同之处在于主要采用超高压技术(离子液体作为溶剂)提取，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化。通过以上技术提取、纯化的总黄酮具有较强的抗氧化能力， 产品不仅得率高，而且纯度高，采用HPLC法进行检测，含量最高可达98.3%。
技术实现思路
:本专利技术优点:提取快捷、产品纯度高，大大提高了提取速度，同时极大提高总黄酮有效成分含量，克服了常规提取纯度低、得率低的缺点。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是:—种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其步骤如下:(I)超高压提取:泽漆全草切断，以不同浓度离子液体溶液为溶剂，在一定料液t匕、适当超高压力下处理几分钟；(2)精滤处理:采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1y m，在一定温度和压力下精滤处理；(3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:采用一定目数的聚酰胺粉末，控制上样液浓度，上样液体积，室温下以一定流速吸附饱和；解吸时先除杂，再用一定浓度的乙醇溶液解吸，控制流速，收集洗脱液，检测总黄酮含量;(4)大孔树脂二次吸附及洗脱:选用不同型号的大孔树脂，控制上样液质量浓度，上样速率；先用2BV去离子水冲洗树脂，再用不同浓度的乙醇溶液，以一定流速洗脱，收集洗脱液，检测总黄酮含量；(5)真空冷冻干燥:收集总黄酮溶液，在适当温度、干燥压力下冷冻干燥；(6)分相:称取总黄酮提取物，选择HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜。分相平衡后分出上相和下相；(7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，分离总黄酮提取物；(8)检测:采用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，泽漆总黄酮纯度为95%以上。【具体实施方式】:实施案例1:一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其步骤如下:(I)超高压提取:1kg泽漆全草切断，以50%浓度的1-辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐溶液为溶剂，料液比1:8，200MPA压力下处理4min ；(2)精滤处理:收集提取液，采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1 ii m，在60°C，0.2MPa压力下精滤处理；(3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:采用80目的聚酰胺粉末，上样液浓度控制在0.5mg / mL,上样液体积2BV，室温下以2BV / h流速吸附饱和；解吸时先`用2BV水除杂，再用75%乙醇解吸，洗脱体积为4BV，流速2BV / h，收集洗脱液。经测定，总黄酮纯度为72.36% ；(4)大孔树脂二次吸附及洗脱:接着用DM130大孔树脂二次吸附纯化，上样液质量浓度为3mg / ml,上样速率2BV / h，上样体积4BV / h;洗脱时先用2BV去离子水冲洗树脂，再用80%浓度的乙醇溶液，以IBV / h流速洗脱，洗脱体积为5BV ;收集洗脱液，经测定，总黄酮纯度为81.29% ；(5)真空冷冻干燥:收集总黄酮溶液，在预冻温度_15°C，工作压力20Pa，升华温度55°C，解析温度60°C下冷冻干燥；(6)分相:称取总黄酮提取物300mg，采用乙酸乙酯-甲醇-水(4:1:3) HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜。分相平衡后分出上相和下相；(7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速700r / min,以2.0mL / min流速泵入流动相,分离总黄酮提取物；(8)检测:采用高效液相色谱法，紫外检测器进行检测，总黄酮纯度为97.7%。实施案例2:-种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其步骤如下:(I)超高压提取:2kg泽漆全草切断，以60%浓度的1- 丁基-3-甲基咪唑溴盐溶液为溶剂，料液比1:10，300MPA压力下处理3min ；(2)精滤处理:收集提取液，采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.liim，在65°C，0.3MPa压力下精滤处理；(3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:采用100目的聚酰胺粉末，上样液浓度控制在1.5mg / mL,上样液体积3BV，室温下以3BV / h流速吸附饱和；解吸时先用3BV水除杂，再用80%乙醇解吸，洗脱体积为5BV，流速3BV / h，收集洗脱液。经测定，总黄酮纯度为73.65% ；(4)大孔树脂二次吸附及洗脱:接着用D312大孔树脂二次吸附纯化，上样液质量浓度为4mg / ml，上样速率3BV / h，上样体积5BV / h;洗脱时先用3BV去离子水冲洗树脂，再用90%浓度的乙醇溶液，以2BV / h流速洗脱，洗脱体积为6BV，收集洗脱液，经测定，总黄酮纯度为80.17%，；(5)真空冷冻干燥:收集总黄酮溶液，在预冻温度_20°C，工作压力25Pa，升华温度50°C，解析温度65°C下冷冻干燥；(6)分相:称取总黄酮提取物200mg，采用正己烷-醋酸乙酯-乙醇-水(5:3:2:4)HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜。分相平衡后分出上相和下相；(7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速800r / min,以3.0mL / min流速泵入流动相,分离总黄酮提取物；(8)检测:采用 高效液相色谱法，紫外检测器进行检测，总黄酮纯度为97.1%。实施案例3:一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其步骤如下:(I)超高压提取:5kg泽漆全草切断，以70%浓度的1-羟乙基-3-甲基六氟磷酸盐溶液为溶剂，料液比1:12，400MPA压力下处理2min ；(2)精滤处理:收集提取液，采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1 ii m，在60°C，0.4MPa压力下精滤处理；(3)聚酰胺树脂吸附及洗脱:采用200目的聚酰胺粉末，上样液浓度控制在1.0mg / mL,上样液体积2BV，室温下以4BV 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其步骤如下：(1)超高压提取：泽漆全草切断，以不同浓度离子液体溶液为溶剂，在一定料液比、适当超高压力下处理几分钟；(2)精滤处理：采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1μm，在一定温度和压力下精滤处理；(3)聚酰胺树脂吸附及洗脱：采用一定目数的聚酰胺粉末，控制上样液浓度，上样液体积，室温下以一定流速吸附饱和；解吸时先除杂，再用一定浓度的乙醇溶液解吸，控制流速，收集洗脱液，检测总黄酮含量；(4)大孔树脂二次吸附及洗脱：选用不同型号的大孔树脂，控制上样液质量浓度，上样速率；先用2BV去离子水冲洗树脂，再用不同浓度的乙醇溶液，以一定流速洗脱，收集洗脱液，检测总黄酮含量；(5)真空冷冻干燥：收集总黄酮溶液，在适当温度、干燥压力下冷冻干燥；(6)分相：称取总黄酮提取物，选择HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜。分相平衡后分出上相和下相；(7)HSCCC分离纯化：以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，分离总黄酮提取物；(8)检测：采用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，泽漆总黄酮纯度为95％以上。...

【技术特征摘要】
1.一种采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其步骤如下: (1)超高压提取:泽漆全草切断，以不同浓度离子液体溶液为溶剂，在一定料液比、适当超高压力下处理几分钟； (2)精滤处理:采用聚四氟乙烯膜，过滤精度0.1y m，在一定温度和压力下精滤处理； (3)聚酰胺树脂吸附及洗脱: 采用一定目数的聚酰胺粉末，控制上样液浓度，上样液体积，室温下以一定流速吸附饱和；解吸时先除杂，再用一定浓度的乙醇溶液解吸，控制流速，收集洗脱液，检测总黄酮含量; (4)大孔树脂二次吸附及洗脱: 选用不同型号的大孔树脂，控制上样液质量浓度，上样速率；先用2BV去离子水冲洗树月旨，再用不同浓度的乙醇溶液，以一定流速洗脱，收集洗脱液，检测总黄酮含量； (5)真空冷冻干燥:收集总黄酮溶液，在适当温度、干燥压力下冷冻干燥；` (6)分相:称取总黄酮提取物，选择HSCCC溶剂系统，按比例将各种溶剂加入分液漏斗中，震荡使溶液充分混合，放置过夜。分相平衡后分出上相和下相； (7)HSCCC分离纯化:以溶剂系统的上相为固定相，下相为流动相，调整转速，以一定流速泵入流动相，分离总黄酮提取物； (8)检测:采用高效液相色谱法，紫外检测器在一定波长进行检测，泽漆总黄酮纯度为95%以上。2.根据权利要求1所述的采用超高压提取技术(离子液体作为溶剂)，聚酰胺藕联大孔树脂吸附，再用高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度总黄酮的新方法，其特征是:在所述的步骤(1)中，离子液体为1-辛基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐、1-丁基-3-甲基咪唑溴盐、1-羟乙基-3-甲基六氟磷酸盐中的任意一种，体积浓度为50-70%，料液比1:8-12，超高压力为200-400MPA，处理时间2-4min。3.根据权利要求2所述的超高压提取技术(离子液体作为溶剂)...

【专利技术属性】
技术研发人员：张亚红，曲晓颖，李为海，
申请(专利权)人：大兴安岭嘉迪欧营养原料有限公司，
类型：发明
国别省市：