具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物，该提取物来自西瓜藤醇沉水提的石油醚部位。研究发现，该提取物具有良好的抗炎镇痛活性，可应用在临床治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎、骨关节痛、颈椎腰椎痛、软组织痛、扭伤痛等病症中。本发明专利技术充分利用了农作物废弃物——西瓜藤的丰富资源，为今后深入研究开发其药用价值和临床意义提供了有力理论基础，以期为临床提供一种新的具有良好抗炎镇痛作用的现代中药制剂。

【技术实现步骤摘要】
具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物及其制备方法和应用
本专利技术属于中药提取物
，尤其涉及一种具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
风湿性疾病是一类严重危害人类健康的全身性疾病，除了关节疼痛以外，还会累及身体其他部位，轻者疼痛、活动困难，重者关节畸形功能受限，以致不能正常学习、工作和生活，甚至危及生命，给病人带来巨大的生理和心理痛苦，也给家庭和社会带来沉重的经济负担。最近的调研数据显示，全球风湿病患者约有4亿人，是医学领域中最为庞大的一个疾病族群。在中国，有2亿多人不同程度地患有风湿性关节炎或类风湿性关节炎，其中有8000万重症患者。30岁以后的人群中，超过80%的人都有风湿骨痛病史，而且随着年龄的增长，发生率会逐渐增加，因此，对风湿类疾病的治疗以及预防显得尤为重要。常见风湿类疾病主要包括风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎、骨关节痛、颈椎腰椎痛、软组织痛、扭伤痛等。因其病因复杂，目前对该类疾病的治疗主要在于改善症状，对重症疗效较差。而中药在此方面展示了重要的前景，并逐渐被人们所重视。西瓜藤，为葫芦科植物西瓜(Citrullus Ianatus)的藤茎，其作为一种农作物废弃物，资源非常丰富，世界各地均有产出。目前已经证明西瓜具有清热利湿之功效，主治水泻，痢疾，烫伤，萎缩性鼻炎等症。国内学者对西瓜瓤、西瓜皮临床疗效方面也做了大量的报道，表明其具有杀菌抗炎作用，可治疗尿毒症、肾盂肾炎、小儿鹅口疮、慢性腹泻等病症。迄今为止，尚未见有关西瓜藤治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎、骨关节痛、颈椎腰椎痛、软组织痛、扭伤痛等病症有效部位的研究报道和专利。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物及其制备方法和应用，以充分利用农作物废弃物——西瓜藤的丰富资源，便于今后深入研究开发其药用价值和临床意义。为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案:具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物，该提取物来自西瓜藤醇沉水提的石油醚部位。该提取物主要包括以下十种化合物:β_谷留醇(β-sitosterol)、胡萝卜苷(daucosterol)、豆留醇(stigmasterol)、肉豆蘧酸甘油酯(monomyristin)、十六烧酸(palmitic acid)、棕榈酸甘油酯(Monopalmitin)、二十二烧酸甘油酯(monobehenin)、熊果酸(ursolic acid)、二十一烧酸甘油酯(monoheneicosanoin)、硬脂酸(stearic acid)。上述具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物的制备方法，包括以下步骤:取西瓜藤晒干粉碎，按重量体积比5:1用体积浓度80%的乙醇溶液超声2h，然后浸泡10d，过滤，合并滤液，减压浓缩，得墨绿色浸膏 ，冷冻干燥得绿色粉末；按重量体积比3:50将绿色粉末分散于去离子水中，静置过夜，离心分出不溶于水的绿色黏稠固体悬浮物和水溶液；取水溶液用3倍体积的石油醚萃取样品，萃取液减压浓缩，回收溶剂，蒸干，得到石油醚部位。上述具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物在制备治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎、骨关节痛、颈椎腰椎痛、软组织痛、扭伤痛的药物方面的应用。药物为胶囊、颗粒剂、片剂、溶液剂、丸剂或者注射剂。胶囊为软胶囊，颗粒剂为干混悬剂，片剂为分散片、泡腾片、咀嚼片、口崩片，溶液剂为糖浆，丸剂为浓缩丸、滴丸、微丸。上述具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物在制备辅助治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎、骨关节痛、颈椎腰椎痛、软组织痛、扭伤痛的保健食品方面的应用。专利技术人将农作物废弃物西瓜藤中进行醇沉水提，再由石油醚萃取获得石油醚部位的提取物。研究发现，该提取物具有良好的抗炎镇痛活性，可应用在临床治疗风湿性关节炎、类风湿性关节炎、肩周炎、骨关节痛、颈椎腰椎痛、软组织痛、扭伤痛等病症中。专利技术人利用各种柱色谱等分离技术及重结晶等纯化手段对该提取物的化学成分进行分离，从中得到10个化合物，并综合利用现代波谱技术(IR，UV, MS, 1D.2D-NMR)对分离所得化合物的化学结构进行鉴定，首次获得西瓜藤醇沉水提的石油醚部位提取物的主要化学组成的信息。本专利技术充分利用了农作物废弃物——西瓜藤的丰富资源，为今后深入研究开发其药用价值和临床意义提供了有力理论基础，以期为临床提供一种新的具有良好抗炎镇痛作用的现代中药制剂。【附图说明】图1是西瓜藤提取物的制备工艺流程图。图2是西瓜藤石油醚部位的化合物分离工艺流程图。图3是对RAW264.7细胞LPS刺激模型NF- κ B的激活核转运的影响对比图。【具体实施方式】一、西瓜藤提取物的制备如图1所示，取晒干粉碎的西瓜藤10kg，按重量体积比5:1用体积浓度80%的乙醇溶液超声2h，然后浸泡10d，过滤，合并滤液，减压浓缩，得墨绿色浸膏，冷冻干燥得300g绿色粉末；按重量体积比3:50将绿色粉末分散于5000mL去离子水中，静置过夜，离心(3000rpm.min—1)分出不溶于水的绿色黏稠固体悬浮物和水溶液；取水溶液依次用3倍体积的石油醚萃、乙酸乙酯、正丁醇萃取样品，萃取液分别减压浓缩，回收溶剂，蒸干，得到石油醚部位(30g)、乙酸乙酯部位(33g)、正丁醇部位(100g)。二、西瓜藤石油醚部位的化合物分离如图2所示，取石油醚部分通过MCI，除去色素得到样品20g，经硅胶(100-200目)柱层析，用石油醚-丙酮(98:2-0:100)(98: 2，96: 4，95:10，90:20，80:30，1: 1，2: 3，1: 3，丙酮)为梯度洗脱溶剂系统洗脱。石油醚-丙酮(98:2)洗脱部分，第2~5份，石油醚重结晶，得到化合物I (0.6g);第7~8份，吡啶重结晶，化合物2 (0.3g);石油醚-丙酮(96:4)洗脱部分，第11~25份，吡啶重结晶得化合物3(0.05g);石油醚-丙酮(95:10)洗脱部分，第2~7份，氯仿重结晶得化合物4 (0.1g);第13~18份，氯仿重结晶得化合物5 (0.04g),石油醚-丙酮(90:20)洗脱部分，第17~27份，氯仿重结晶得化合物6 (0.03g)，第22~39份,经Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱(氯仿:甲醇=1:1),氯仿重结晶得化合物7(0.08g)和化合物8 (0.05g)。石油醚-丙酮(80:30)洗脱部分，第17~27份，吡啶重结晶得化合物9 (0.5g);第28~37份，吡啶重结晶得化合物10 (0.06g)。利用现代波谱技术(IR，UV, MS, 1D.2D-NMR)对分离所得化合物的化学结构进行鉴定，证实西瓜藤石油醚部位的十种化合物分别为:β-谷留醇(化合物I)、胡萝卜苷(化合物2)、豆留醇(化合物3)、肉豆蘧酸甘油酯(化合物4)、十六烷酸(化合物5)、棕榈酸甘油酯(化合物6)、二十二烷酸甘油酯(化合物7)、熊果酸(化合物8)、二十一烷酸甘油酯(化合物9)、硬脂酸(化合物10)。三、药效学实验:西瓜藤不同部位提取物抗炎活性筛选及其机理研究I材料与仪器1.1细胞来源RAW264.7小鼠巨噬细胞购自中国科学院细胞库。1.2实验材料DMEM高糖培养基(北京Hyclone);胎牛血清(杭州四季青)；24孔、96孔细胞培养板(美国Co本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物，其特征在于该提取物来自西瓜藤醇沉水提的石油醚部位。

【技术特征摘要】
1.一种具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物，其特征在于该提取物来自西瓜藤醇沉水提的石油醚部位。2.根据权利要求1所述的具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物，其特征在于该提取物主要包括以下十种化合物:β-谷留醇、胡萝卜苷、豆留醇、肉豆蘧酸甘油酯、十六烷酸、棕榈酸甘油酯、二十二烷酸甘油酯、熊果酸、二十一烷酸甘油酯、硬脂酸。3.权利要求1所述具有抗炎镇痛作用的西瓜藤提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤:取西瓜藤晒干粉碎，按重量体积比5:1用体积浓度80%的乙醇溶液超声2h，然后浸泡10d，过滤，合并滤液，减压浓缩，得墨绿色浸膏，冷冻干燥得绿色粉末；按重量体积比3:50将绿色粉末分散于去离子水中，静置过夜，离心分出不溶于水的绿色黏稠固体悬浮物和水溶液；取水溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓家刚，王硕，龚小妹，周小雷，周丹丹，戴航，
申请(专利权)人：广西中医药大学，广西壮族自治区药用植物园，
类型：发明
国别省市：