【技术实现步骤摘要】
—种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO中的表达方法
本专利技术涉及一种生化的检测方法,具体来说,一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO中的表达方法。
技术介绍
血管内皮生长因子C(VEGF -C)属VEGF/PDGF家族成员,其受体为VEGFR -2,VEGFR -3。VEGF通过VEGFR -2调节血管和淋巴管的增生,而VEGFR-3表达则局限于淋巴管内皮,VEGF -C为VEGFR-2的结合,产生生物学效应的所需浓度远高于VEGFR -C,因此,VEGFR -3是淋巴管增生特异性调节因子,用VEGF -C转基因鼠实验证实,VEGF-C的高表达可以选择性地引起淋巴管增生[2],经研究,VEGF -C表达与肿瘤淋巴管增生和转移的关系是VEGF -C高表达可促进肿瘤的淋巴转移,其机理是VEGF -C促进了肿瘤周围及间质的淋巴管生长以及肿瘤组织中淋巴管增生。为进一步研究VEGF -C在淋巴管增生中的作用及其机制,我们构建了携带人VEGF -C cDNA的基因片段的真核表达载体,研究了它在真核细胞内的表达,为探讨VEGF -C与淋巴管增生的关系,VEGF -C基因用于治疗淋巴水肿和某些癌肿的可行性提供实验依据。
技术实现思路
为克服上述技术问题,我们提出了以下技术方案: 一种检测血管内 皮生长因子C在真核细胞CHO中的表达方法,根据人VEGF -C CDNA的序列,设计合成一对特异性引物,用RT -PCR法克隆乳腺癌细胞MCF - 7VEGF -C基因的cDNA,回收PCR产物连接于克隆载体。本专利技术中,在所述步骤之后要扩增,质粒提取,酶切鉴 ...
【技术保护点】
一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO?中的表达方法,其特征在于,根据人VEGF??C?cDNA?的序列,?设计合成一对特异性引物,?用RT??PCR?法克隆乳腺癌细胞MCF???7VEGF??C?基因的cDNA?,?回收PCR?产物连接于克隆载体。
【技术特征摘要】
1.一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO中的表达方法,其特征在于,根据人VEGF -C cDNA的序列,设计合成一对特异性引物,用RT -PCR法克隆乳腺癌细胞MCF -7VEGF -C基因的cDNA,回收PCR产物连接于克隆载体。2.如权利要求1所述的一种检测血管内皮生长因子C在真核细胞CHO中的表达方法,其特征在于,在所述步骤之后要扩增,...
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