本发明专利技术涉及淫羊藿的多糖提取物，具体地，本发明专利技术涉及从中药材淫羊藿叶中提取的淫羊藿总多糖及其其中的酸性糖组分和非糖组分，以及它们用于制备疫苗佐剂、疫苗制剂、疫苗组合物或抗体的用途。本发明专利技术还涉及包含所述淫羊藿总多糖及其组分的药物组合物、疫苗佐剂、疫苗制剂或疫苗组合物。
【技术实现步骤摘要】
本申请是基于申请号为201110220409.0，申请日为2011年8月3日，专利技术名称为“”的中国专利申请的分案申请。
本专利技术涉及淫羊藿的多糖提取物，具体地，涉及从中药材淫羊藿叶提取的淫羊藿总多糖及其其中的酸性糖组分和非糖组分，本专利技术还涉及所述的淫羊藿总多糖及其其中的酸性糖组分和非糖组分用于疫苗佐剂、疫苗组合物和抗体制备的用途。
技术介绍
淫羊藿(Epimedium)为小檗脸科(Berberidaceae)植物,常用于补肾壮阳、祛风除湿和益气。现代药理研究表明淫羊藿具有镇咳、去痰、平喘、抑菌等活性。淫羊藿中主要化学成分有黄酮、木质素、生物碱以及多糖等。近年来有以下文献报道有关淫羊藿多糖对动物免疫功能的影响，具体内容如下:徐颖等(沈阳药科大学学报，2000，17 (6):434 一 437)采用淫羊藿水煎、醇沉、洗涤和透析获得淫羊藿多糖。该多糖腹腔注射给予环磷酰胺所致的免疫低下小鼠及荷瘤(S180)小鼠，观察对免疫功能的影响。结果表明该多糖50、25mg/kgX7d，可使脾重量指数上升，使下降的溶血素值及空斑形成细胞的溶血能力回升，使下降的白细胞总数上升。小鼠荷瘤后免疫功能低下，皮下注射该多糖50mg/kgX8d可对抗荷瘤引起的胸腺指数下降，，使荷瘤小鼠的血清溶血素、空斑形成细胞的溶血能力及迟发性超敏反应能力有所提高.王刚等(武警医学院学报，2003，12 (3):194 - 196)由水煎煮提取、结晶、透析48h方法获得淫羊藿多糖。该多糖12.5、25.0和50.011^/1^连续给予荷瘤小鼠皮下注射8(1。结果表明淫羊藿多糖可显著提高小鼠因荷瘤所导致的胸腺指数下降，溶血素形成减少，溶血空斑值降低以及迟发性超敏反应低下。靳录洋等(甘肃畜牧兽医，2004，28 (3):7 一 10)观察不同浓度的淫羊藿多糖(EPS，多糖含量为32.30%)对正常罗曼雏鸡免疫功能的影响。试验结果表明EPS可使外周血淋巴细胞转化率和ND-HI抗体效价明显升高。罗艳等采用相同的淫羊藿多糖，探讨淫羊藿多糖(EPS)对雏鸡免疫功能和禽流感一新城疫重组二联苗免疫效果的影响。结果表明不同浓度EPS均能显著提高淋巴细胞转化率、中性粒细胞吞噬力、A1-HI和ND-HI抗体效价、红细胞-C3b花环率，降低红细胞-1C花环率，且中剂量效果较好张述斌等(甘肃畜牧兽医，2004，28 (4):24 — 25)采用Ca (OH) 2水提取工艺制备淫羊藿多糖，苯?)—硫酸法测定糖含量为73.68%。实验结果表明该多糖鸡新城疫疫苗有明显的免疫增强作用，用该多糖免疫后鸡血清中HI抗体效价比对照鸡明显提高，而且维持时间延长。此外，T淋巴细胞ANAE阳性率与HI抗体效价有相应的消长趋势。孔祥峰等(畜牧兽医学报，2004，35(4)，468-472)用新城疫IV系疫苗免疫雏鸡，在免疫前、后分别注射高、低剂量淫羊藿多糖(糖含量为66.38%)，均能不同程度地提高抗体效价，且与给药时间、剂量和免疫接种次数有一定关系。寸.fcVf/^蛋膽柃辑铽<-1轺恶靶将坩~宕Vfz 8寸~ZT S~寸_侧呎鞞頰趔_轺戬螂辰癍1/|蚺 〔￡300〕。农资屮农vf/趄癍靼电3呜谍渺_臌左缠诮Ta^戬螂辰癍运蚺扫頰 〔300〕啐袞孽辰癍！/I蚺扫细椰3^左獅朴卸轺择戬细|^^左獅朴卸轺闳宓蛋0酵电0) 口 Sou?肾蛾韬肾1_坦轺蛋肾(ZT ) I ( T ) Si袞屮坩岿#械~盤蛾獅朴卸SM^I紙恶靶将聰磨ogs。盤蛾獅朴卸面！T载H-M资归银擦岛觸轺鲣宓岛觸择(c 〔2CS.岛觸归银擦〔350〕.fcVf/Oo^蛋膽柃辑铽<-1轺恶靶将坩~宕^8寸~艺呎银grH-幸崦_侧坩。収咭趔_戬螂？rfcVf/ ZL~T P5S.擦戬第Mlr菊螂第yart獅朴卸择(T Si〕S#磘想柃H-袞扫頰喇械^盤蛾铒獅朴卸呎#每)盤蛾獅朴卸电袅?^—！！^^^#〔S50U。旺造辰坦钿铋轺&碰耻吨SNRIISW&聽汍聽汍_济卸s^pira靶诗^3;靶茕tWYira靶 〔=§〕。因要辰坦SIIT睞辍旺eMl劁IIf驾親幻鸯拉軾崦戬秦_龆~辰坦呎^蔣癍匾氣链邀 蔣盤蛾獅朴卸睞规。踅鹼S龆吞铋识蔣迴辍辰坦钿铋旺造迆鏟铋识S钿铋与田识友铽匿*辰坦呎^蔣癍匾氣链邀蔣(％96.88_如盤)盤蛾獅朴卸UKOO-^S-C寸S:艺 Joooa<0UP3T3A)渺P4§s 〔essIIIIITlrzt^^^VNHSA-gl蔣趔镔拉軾崦戬龆蓉伞癍搀恶懈睞规。踅鹼第刼懈VNHSA-Nh 蔣 SI 驾親幻鸯?右IX 友F^ra z III ^ISSlIIT(％S 1卜呎_如盤)盤蛾獅朴卸弈(HTZ-60TZ:艺 *900^SP3T3A)渺 M Ml 〔3 50〕。旺造&雄蚺遯与田0,辰坦驵屮睜漥旺SE S OT I II蔣A I Mh溴农驾親X崦戬驾親aj鸯X银逞秦_龆右拉柃《搀恶懈睞规。旺造辰坦轺钿铋遯与田识友柃Ws资18氣链邀蔣(％s呎_如盤)盤蛾獅朴卸，盤蛾埘氣铽匿(Sg寸TTg荨:9^800^spgA)渺SI 口5S。椰虼恕岛龌蝌||虼转，虼芝椰猶铝蠛渺蠛醚，蠛骧带，遯幻鸯斓袼底带，蠛葉驾親Vf/,蠛骧Wv^旺脚。辰栌驛蓉胡轺姻粽輕靶蚺楚志—喇~旺造铋识逞轺_恶蚺1^盤時盤WVI,盤擗解，盤蠊扣，盤长，盤耍轺匡，盤擁邮，盤徘Mffi^^nm< ?喇盤蛾M5蛾獅朴卸志I择戬蛋獅朴卸多Q6809CTN3 ?蒔1-^乐|匪蛋)渺犁凉05S籁靶撇迟想友！>.拉軾银逞向驿辰坦铋识呎造盤蛾獅朴卸S VSgT^I/SOOT恶懈睞规。踅鹼S龆吞铋识锲友辰坦铋识呎造盤蛾獅朴卸识钿--苐芝Wv雕遯铋鸷搌IXS^KIIr盤蛾獅朴卸轺趔兹晅K-^l/&coLOToOToLO弈(S—S:(寸)0^600^輕银釙凼蓉#)渺三三返〔6000〕罔 6A < gz929co0T Zo(2)步骤I)中所用水为蒸馏水或去离子水；(3)步骤I)中，加入水浸提的温度为4~60°C，优选为20~60°C，更优选为20~500C。在此温度范围内，不会破坏糖的性质，且随温度升高，糖的得率增加。(4)步骤I)中，将浸提后得到的淫羊藿叶按照相同条件进行一次或多次浸提，合并水提液；在本专利技术的一个实施方案中，进行两次浸提。(5)步骤I)中水的用量为淫羊藿叶的5 — 20倍量(L/Kg)；(6)步骤I)中，浸提期间进行搅拌；(7)步骤I)中，将得到的水提液在50°C — 55°C下进行减压浓缩，得到浓缩的水提液；(8)步骤2)中，乙醇沉淀的条件是:醇沉后乙醇的终浓度为60 - 80%，例如70-75% ;优选地，醇沉的时间大于12小时，例如为48-72小时；(9)步骤2)中，将乙醇沉淀后离心得到的沉淀再进行一次或多次乙醇沉淀；(10)步骤2)中，透析所用的透析袋的截留分子量大于1000 ；(11)步骤2 )中 ，用自来水和/或蒸馏水进行透析；(12)步骤2)中，透析时间为24~72小时，透析进行一次或多次；(13)步骤3)中，在冷冻干燥之前，将得到的透析液在50°C — 55°C下进行减压浓缩。在本专利技术的一个实施方案中，所述的淫羊藿多糖是通过以下方法制备的:取淫羊藿叶，向其中加入本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种淫羊藿多糖，其特征在于（1）含糖量为25?45%，例如35.60％（以葡萄糖计算），糖醛酸含量为5?20%，例如7.53％（以半乳糖醛酸计算）；和/或（2）其具有附图1和附图2所示的特征。
【技术特征摘要】
2010.11.05 CN 201010533445.81.一种淫羊藿多糖，其特征在于 (1)含糖量为25-45%，例如35.60%(以葡萄糖计算)，糖醛酸含量为5_20%，例如7.53%(以半乳糖醛酸计算)；和/或 (2)其具有附图1和附图2所示的特征。2.淫羊藿酸性多糖组分，其为权利要求1所述的淫羊藿多糖经DEAE-纤维素柱层析，得到的利用硫酸-苯酚法显色、具有490nm波长吸收的0.25mol/L NaHCO3洗脱部分。3.一种淫羊藿酸性多糖组分，或者权利要求2所述的淫羊藿酸性多糖组分，其特征在于: 包含鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖以及半乳糖醛酸；以及，其分子量为6000~20000。4.权利要求3的淫羊藿酸性多糖组分，其特征在于， (1)含糖量为45-65%，例如58.93%(以葡萄糖计算)，糖醛酸含量为5_15%，例如8.40%(以半乳糖醛酸计算)；和/或 (2)鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的摩尔比为鼠李糖:岩藻糖:阿拉伯糖:...
【专利技术属性】
技术研发人员：单俊杰，王玉霞，朱婷，贾培媛，武军华，赵修南，刁玉林，王晨宇，段丹丹，王佩瑞，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所，
类型：发明
国别省市：
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