一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法技术

本发明专利技术公开了一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法，其特征在于，步骤如下：首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型；然后对细胞进行培养，shRNA表达载体转染细胞，并进行荧光观察；用荧光定量进行检测。在对PERV进行培养的时候，需要及时吸取干净细胞培养液，之后再用洗脱缓冲液进行预热3-10分钟。最后需要在48小时后用荧光显微镜观察细胞转染效率并收集细胞检测shRNA的干扰效果。本发明专利技术的有益效果是，菌块能够彻底混匀，裂解效果良好，提取量和纯度都比较高，操作简便，成本不高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种实验方法，具体来说，。
技术介绍
核糖核酸(英语:Ribonucleic acid,缩写:RNA)是一种重要的生物大分子，因为分子由核糖核苷酸组成而得名。每个RNA分子都由核苷酸单元长链组成，每个核苷酸单元含有一个含氮碱基、一个核糖和一个磷酸基。RNA是具有细胞结构的生物的遗传讯息中间载体，并参与蛋白质合成；还参与基因表达调控。对一部分病毒而言，RNA是其唯一的遗传物质。RNA存在于一切细胞的细胞质和细胞核中，也存在于大多数已知的植物病毒和部分动物病毒以及一些噬菌体中。嘧啶碱有一个不同:RNA是尿嘧啶，DNA则为胸腺嘧啶。五碳糖不同=RNA是核糖，DNA是脱氧核糖，这样一来组成RNA的基本单位就是核糖核苷酸；DNA则为脱氧核苷酸DNA为双链结构，RNA为单链结构。
技术实现思路
为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: ，步骤如下:首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型；然后对细胞进行培养，shRNA表达载体转染细胞，并进行荧光观察；用荧光定量进行检测。本专利技术中，在对PERV进行培养的时候，需要及时吸取干净细胞培养液，之后再用洗脱缓冲液进行预热3-10分钟。本专利技术中，其特征在于，最后需要在48小时后用荧光显微镜观察细胞转染效率并收集细胞检测shRNA的干扰效果。本专利技术的有益效果是，菌块能够彻底混匀，裂解效果良好，提取量和纯度都比较高，操作简便，成本不高。【具体实施方式】，步骤如下:首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型；然后对细胞进行培养，shRNA表达载体转染细胞，并进行荧光观察；用荧光定量进行检测。在对PERV进行培养的时候，需要及时吸取干净细胞培养液，之后再用洗脱缓冲液进行预热7分钟，最后需要在48小时后用荧光显微镜观察细胞转染效率并收集细胞检测shRNA的干扰效果。 以上所述，仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内，根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法，其特征在于，步骤如下：首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型；然后对细胞进行培养，shRNA表达载体转染细胞，并进行荧光观察；用荧光定量进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种对ShRNA干扰片段进行筛选的方法，其特征在于，步骤如下:首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型；然后对细胞进行培养，shRNA表达载体转染细胞，并进行荧光观察；用荧光定量进行检测。2.如权利要求1所述的一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽，
申请(专利权)人：徐丽，
类型：发明
国别省市：