一种将质粒片段胶回收的方法技术

本发明专利技术公开了一种将质粒片段胶回收的方法，其特征在于，步骤如下：首先将具有单一目的ＤＮＡ的目的片段条从琼脂糖凝胶上切下，并放入事先消毒杀菌的离心管中；向吸附柱中加入平衡液中；高速离心，１－２分；然后向胶块中注入300ul稀释溶液以及BL；待凝胶溶液温度降至室温后，静置；将上一步得到的溶液导入漂洗液中，再加入纯无水乙醇，至少30毫升；彻底晾干；向吸附膜中间悬空递进缓冲液；最后注入缓冲液之前，需要在零下二十度的环境下冷藏至少12小时；,所述无水乙醇倒入之前，需要反复冲洗吸附柱。本发明专利技术的有益效果是，成本较低、重复性好，转化效率低，而且可以比较完全的对比目的片段。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生化实验室的试验方法，具体来说。
技术介绍
质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构形，然而目前也发现有少数的质粒属于线性构形，它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，乃至于植物的线粒体等胞器中。天然质粒的DNA长度从数千碱基对至数十万碱基对都有。质粒天然存在于这些生物里面，有时候一个细胞里面可以同时有一种乃至于数种的质粒同时存在。质粒的套数(copy number)在细胞里从单一到数千都有可能。有时有些质粒含有某种抗药基因(如大肠杆菌中就有含有抗四环素基因的质粒)。有一些质粒携带的基因则可以赋予细胞额外的生理代谢能力，乃至于在一些细菌中提高它的致病力。一般来说，质粒的存在与否对宿主细胞生存没有决定性的作用。它是基因工程最常见的运载体。
技术实现思路
为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: ，步骤如下:首先将具有单一目的D N A的目的片段条从琼脂糖凝胶上切下，并放入事先消毒杀菌的离心管中；向吸附柱中加入平衡液中；高速离心，I 一 2分；然后向胶块中注入300ul稀释溶液以及BL ;待凝胶溶液温度降至室温后，静置；将上一步得到的溶液导入漂洗液中，再加入纯无水乙醇，至少30毫升；彻底晾干；向吸附膜中间悬空递进缓冲液。本专利技术中，最后注入缓冲液之前，需要在零下二十度的环境下冷藏至少12小时。本专利技术中，所述无水乙醇倒入之前，需要反复冲洗吸附柱。本专利技术的有益效果是，成本较低、重复性好，转化效率低，而且可以比较完全的对比目的片段。【具体实施方式】，步骤如下:首先将具有单一目的D N A的目的片段条从琼脂糖凝胶上切下，并放入事先消毒杀菌的离心管中；向吸附柱中加入平衡液中；高速离心，I 一 2分；然后向胶块中注入300ul稀释溶液以及BL;待凝胶溶液温度降至室温后，静置；将上一步得到的溶液导入漂洗液中，再加入纯无水乙醇，至少30毫升；彻底晾干；向吸附膜中间悬空递进缓冲液；最后注入缓冲液之前，需要在零下二十度的环境下冷藏至少12小时；所述无水乙醇倒入之前，需要反复冲洗吸附柱。以上所述，仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内，根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或 改变，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种将质粒片段胶回收的方法，其特征在于，步骤如下：首先将具有单一目的ＤＮＡ的目的片段条从琼脂糖凝胶上切下，并放入事先消毒杀菌的离心管中；向吸附柱中加入平衡液中；高速离心，１－２分；然后向胶块中注入300ul稀释溶液以及BL；待凝胶溶液温度降至室温后，静置；将上一步得到的溶液导入漂洗液中，再加入纯无水乙醇，至少30毫升；彻底晾干；向吸附膜中间悬空递进缓冲液。

【技术特征摘要】
1.一种将质粒片段胶回收的方法，其特征在于，步骤如下:首先将具有单一目的D NA的目的片段条从琼脂糖凝胶上切下，并放入事先消毒杀菌的离心管中；向吸附柱中加入平衡液中；高速离心，I 一 2分；然后向胶块中注入300ul稀释溶液以及BL ;待凝胶溶液温度降至室温后，静置；将上一步得到的溶液导入漂洗液中...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘军，
申请(专利权)人：刘军，
类型：发明
国别省市：