一种酪氨酸酶抑制剂微乳及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种酪氨酸酶抑制剂微乳及其制备方法与应用，属于食品、医药和化妆品技术领域。微乳含有基质、酪氨酸酶抑制剂norartocarpetin和水；其中基质由40%～60%的表面活性剂、20%～45%的助表面活性剂和5%～20%的油相组成。微乳由各原料组分按一定配比投料制成。本发明专利技术克服了天然酪氨酸酶抑制剂norartocarpetin在水中溶解度极低的缺陷，提供了一种操作简单自发形成微乳的方法，用水或水溶液稀释形成粒径为纳米级的微乳。所得微乳液能够有效用于抗果蔬酶促褐变、制备美白化妆品、用于预防和治疗黑色素过多导致的人体色素沉着性疾病、黑色素瘤以及其他需要抑制酪氨酸酶活性的药物。

【技术实现步骤摘要】
一种酪氨酸酶抑制剂微乳及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种酪氨酸酶抑制剂微乳及其制备方法与应用，属于食品、医药和化妆品
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技术介绍
酪氨酸酶(EC1.14.18.1)，为多酚氧化酶的一种，广泛存在于生物体中。其通过催化作用，先使单酚羟基化成邻二酚，然后进一步氧化邻二酚成邻二醌类，随后再经过一系列复杂的非酶反应，最终生成黑色素。在这个过程中，酪氨酸酶起着关键的作用。人体中产生的黑色素可以使人体皮肤免受太阳紫外线的伤害，同时，皮肤中不同黑色素的含量和种类决定人类的肤色和头发颜色，但过多黑色素分泌会引起严重的美容问题，如色斑、黑斑、老年斑等。在食品加工过程中，酪氨酸酶由于催化反应导致新鲜水果、蔬菜和饮料产生褐变，从而降低其贮藏周期、营养价值、以及经济价值。酪氨酸酶抑制剂可以抑制酪氨酸酶的活性，从而降低酪氨酸酶引起的不利影响。到目前为止，人们从低等菌类到高等植物中发现了许多天然酪氨酸酶抑制剂，如曲酸(kojic acid)和壬二酸(azelaic acid);从高等植物中获得的酪氨酸酶抑制剂多数属于多酚类物质(主要分为黄酮类和二苯乙烯类)。许多黄酮及其苷类物质显示出酪氨酸酶抑制活性，但只有少数具有很强的酪氨酸酶抑制活性如norartocarpetin,但此类物质却存在几乎不溶于水等缺点，极大限制了其应用前景。所以，虽然天然酪氨酸酶抑制剂作为生物活性物质在食品、医药和化妆品 领域中具有广阔的开发前景，但由于受其有效性、溶解性等因素制约而难于得到广泛应用。微乳是由互不相溶的两相(一般为油相和水相)经过简单搅拌自发形成的热力学稳定的、各向同性的、外观透明或者半透明的分散体系。从结构上来说，分为水包油型(0/W)、油包水型(w/ο)和双连续型三种类型。微乳的油相和水相之间被混合活性剂膜分开，混合活性剂膜由表面活性剂，助表面活性剂以及其中的油、水分子构成。制作合适的微乳液是增加溶解度的一个适当方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的第一个技术问题是提供一种酪氨酸酶抑制剂微乳，尤其是一种高活性、无毒、纳米粒径的天然酪氨酸酶抑制剂微乳，解决天然酪氨酸酶抑制剂在水中不溶及溶解度低的问题。所述微乳含有基质、酪氨酸酶抑制剂和水。所述基质由表面活性剂、助表面活性剂和油相组成，其中表面活性剂质量分数为40%~60%，助表面活性剂质量分数为20%~45%，油相质量分数为5%~20% ;上述质量分数是各组分占基质质量的比例。所述天然酪氨酸酶抑制剂是天然提取物norartocarpetin (去甲木菠萝黄酮),根据需要适量添加。所述水是去离子水、纯净水或自来水，根据需要添加适量水。所述表面活性剂选自下列一种或几种的混合:吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油。所述助表面活性剂选自下列任意一种:乙醇、PEG400。所述油相选自下列任意一种:油酸乙酯、薄荷油、柠檬油。根据酪氨酸酶抑制剂在油中的溶解度进行选择。一种优选的酪氨酸酶抑制剂微乳，其基质是由10%的油酸乙酯、60%的吐温80和30%的乙醇组成(上述质量分数是各组分占基质质量的比例)，所述酪氨酸酶抑制剂中含80%(质量分数)的水和 I.93mg/mL 的 norartocarpetin。所用上述试剂都是食品级。本专利技术要解决的第二个技术问题是提供所述酪氨酸酶抑制剂微乳的制备方法，通过以下步骤实现:按配比将表面活性剂和助表面活性剂混合为混合活性剂，再加入一定比例的油相并搅拌均匀，最后加入一定量的酪氨酸酶抑制剂超声搅拌使其完全溶解，待上述体系混合均匀后，采用滴水法将水慢慢加入上述混合溶液中，充分搅拌直至体系透明澄清，即得到酪氨酸酶抑制剂微乳。本专利技术方法制备的酪氨酸酶抑制剂微乳液在8000r/min下高速离心15min不分层，粒径为20~50nm ;可用于抑制果蔬的酶促褐变、制备美白化妆品，制备用于抑制酪氨酸酶活性的药物。本专利技术具有以下优点和有益效果:(I)本专利技术借助微乳液的超小粒径和超强增溶能力的特性，选用食品级非离子型表面活性剂、助剂和油相，解决了天然酪氨酸酶抑制剂在水中难溶和几乎不溶的问题，将其溶解度提高了 5~100倍，提高了天然酪氨酸酶抑制剂在实际使用中的生物活性，为其在食品、医药和化妆品工业中的应用提供了方法。(2)本专利技术工艺简单，选用的表面活性剂、助剂和油相均为价格较低廉、应用广泛的食品级物质，对人体安全无毒副作用。(3)本专利技术的微乳体系可用任意比例的水稀释，无需复杂的均质工艺，加水搅拌即可自动形成纳米级别微乳，体系澄清稳定，目标物不会析出。本专利技术所制备的微乳，根据不实际需要可配置不同浓度的天然酪氨酸酶抑制剂使用。【附图说明】图1、苹果切片在norartocarpetin微乳及各种溶液中处理后抗褐变的a值。图2、苹果切片在norartocarpetin微乳及各种溶液中处理后抗褐变的L值。图3、苹果切片在norartocarpetin微乳及各种溶液中处理后抗褐变的b值。附图1-3中附图标记含义:—去离子水，.一0.01%(w/v)norartocarpetin微乳水溶液加0.5% (w/v)的维生素C, ▲ —norartocarpetin饱和水溶液，▼—未加目标物的空白微乳水溶液，X一4-己基间苯二酹水溶液加0.5% (w/v)的维生素〇,★ —0.5% (w/V)的维生素C水溶液，? —norartocarpetin微乳水溶液。【具体实施方式】实施例1Norartocarpetin微乳的制备方法一Norartocarpetin是从菠萝蜜中提取,将2kg波罗蜜木材(木材采自海南省文昌县)用6倍量95%乙醇超声波提取2次，每次lh，减压浓缩至干燥，称重。然后以95%乙醇溶解，定性滤纸过滤，加入Amberlite XAD16中，自然晾干或减压蒸干,上Amberlite XAD16层析柱，分别用20%、30%、40%、50%及95%的乙醇洗脱6个柱体积，收集40%乙醇洗脱部分，浓缩得干燥样品，用甲醇溶解后用葡萄糖凝胶柱层析进行分离，甲醇-水(v/v，1:1)洗脱，即得化合物 norartocarpetin。 Norartocarpetin的核磁共振光谱数据如下:1H NMR (DMS0_d6，300ΜΗζ) δ:6.15 (1Η, d, J=L 8Ηζ, Η_6)，6.42 (1Η, dd, J=3.0, 8.7Ηζ，Η-5’), 6.48 (1Η, d, J=L 8Ηζ, Η_8)，6.43 (1Η, d, J=3.0Hz, Η_3’ ),7.00 (1Η, s, Η_3)，7.75 (1Η,d, J=8.7Ηζ, Η-6’);13C NMR(DMS0-d6, 75ΜΗζ) δ: 181.9 (s, C-4)，164.2 (s, C-7)，161.8 (s, C-4’)，161.8 (s, C-2), 161.4 (s, C-9)，159.0 (S，CS), 157.3 (s, C—2，)，129.8 (d, C—6，)，108.5 (s,C-1，)，108.0 (d, C-3)，106.7 (d, C-5’)，103.6 (s, C-10)，103.2 (d, C-3’), 98.6 (d, C-6)，93.8 (d, C-8)。ES1-M本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种酪氨酸酶抑制剂微乳，其特征在于，含有基质、酪氨酸酶抑制剂和水；所述基质由表面活性剂、助表面活性剂和油相组成，其中表面活性剂的质量分数为40%～60%，助表面活性剂的质量分数为20%～45%，油相的质量分数为5%～20%。

【技术特征摘要】
1.一种酪氨酸酶抑制剂微乳，其特征在于，含有基质、酪氨酸酶抑制剂和水；所述基质由表面活性剂、助表面活性剂和油相组成，其中表面活性剂的质量分数为40%~60%，助表面活性剂的质量分数为20%~45%，油相的质量分数为5%~20%。2.根据权利要求1所述的酪氨酸酶抑制剂微乳，其特征在于，所述酪氨酸酶抑制剂是norartocarpetin03.根据权利要求1所述的酪氨酸酶抑制剂微乳，其特征在于，所述水是去离子水、纯净水或自来水。4.根据权利要求1所述的酪氨酸酶抑制剂微乳，其特征在于，所述表面活性剂选自下列一种或几种的混合:吐温20、吐温40、吐温60、吐温80、聚氧乙烯蓖麻油。5.根据权利要求1所述的酪氨酸酶抑制剂微乳，其特征在于，所述助表面活性剂选自乙醇、PEG400中任意一种。6.根据权利要求1所述的酪氨酸酶抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑宗平，陈洁，兰山，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：