棉花转基因事件MON88701及其使用方法技术

本发明专利技术提供棉花事件MON88701以及包含事件MON88701的植物、植物细胞、种子、植物部分和商品。本发明专利技术还提供事件MON88701特异性的多核苷酸以及包含事件MON88701特异性多核苷酸的植物、植物细胞、种子、植物部分和商品。本发明专利技术还提供与事件MON88701相关的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】棉花转基因事件MON88701及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2011年3月30日提交的美国临时申请号61／469,118的利益，将其全文通过引用并入本文。序列表并入在名称为“MONS302WO.txt”的文件中包含的序列表通过电子提交与本文一起提交并通过引用并入本文，所述文件为21千字节(在Microsoft中测量的大小)并在2012年3月9日产生。专利
本专利技术涉及转基因棉花(Gossypiumhirsutum)事件MON88701。所述事件表现出对麦草畏和草铵膦除草剂的耐受性。本专利技术还涉及与事件MON88701相关的植物、植物部分、植物种子、植物细胞、农产品和方法，并提供了所述事件独有的并与转基因DNA插入棉花植物的基因组中相关联而产生的核苷酸分子。专利技术背景棉花(陆地棉)在世界上许多地区是重要的作物，并且为了生产具有所需性状的棉花，已将生物技术方法应用于这种作物。一种这样的所需性状是除草剂耐受性。除草剂耐受性转基因在植物中的表达能够赋予植物所需的除草剂耐受性状，但是转基因的表达可能受到转基因插入的染色体位置和基因组结果的影响。例如，已经在植物中观察到，在转基因的染色体插入位点方面不同但在其他方面都相同的单个事件之间，通常存在着转基因表达水平和模式的变异。在事件之间还可能存在不想要的和／或想要的表型或农学差异。因此，为了选择具有所需性状和使其适合于商业化目的所需的最适表型和农业特性两者的事件，通常需要产生并分析大量单个植物转化事件。这样的选择通常需要经过多年、在多个地点并在多种不同条件下对许多事件进行温室和田间试验，以便可以收集到大量农艺学、表型和分子数据。然后必须由科学家和农学家对得到的数据和观察进行分析，其目的是选择商业上适合的事件。这样的事件一旦被选择，随后可能用于使用植物育种方法将所需性状渗入到其他遗传背景中，并由此产生含有所需性状并适当地适应于特定当地生长条件的大量不同作物品种。专利技术概述本专利技术提供了包含事件MON88701的转基因棉花植物，其对麦草畏和草铵膦除草剂的施用表现出可接受的耐受性，并且代表性种子样品已在专利保藏名PTA-11754下保藏于美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection)。本专利技术还提供了与棉花事件MON88701相关的新的DNA分子以及使用这些分子的方法。本专利技术还提供了包含事件MON88701的棉花植物的种子、后代、植物部分、细胞和商品。本专利技术还提供了使用棉花事件MON88701的方法以及生产对麦草畏和草铵膦除草剂两者耐受的棉花的方法。本专利技术提供了与棉花事件MON88701相关的重组DNA分子。这些重组DNA分子可能包含具有代表了转基因插入侧翼的基因组DNA的区域，和／或转基因插入的区域，和／或任何这些区域的连续序列(例如棉花事件MON88701的转基因插入片段与侧翼基因组DNA之间的连接区域)的核苷酸序列的核苷酸分子。本专利技术还提供了可用作诊断棉花事件MON88701的引物和探针的DNA分子以及诊断棉花事件MON88701的存在的扩增子。还公开了包含这些分子的棉花植物、植物细胞、植物部分、商品、后代和种子。本专利技术提供了可用于检测源自于棉花事件MON88701的DNA的存在和／或不存在，并因此可用于检测所述事件的存在和／或不存在的方法、组合物和试剂盒。本专利技术提供了一种用于通过将包含DNA的样品与当与来自于包含事件MON88701的棉花植物或种子的基因组DNA一起在核酸扩增反应中使用时产生可用于诊断棉花事件MON88701的扩增DNA的引物组相接触，进行核酸扩增反应由此产生所述扩增DNA，以及检测所述扩增DNA的存在和／或不存在而检测MON88701的方法。本专利技术还提供了一种用于通过将包含DNA的样品与当与来自于棉花事件MON88701的DNA一起在杂交反应中使用时与棉花事件MON88701特有的DNA分子杂交的探针相接触，从而进行杂交反应，以及检测所述探针与所述DNA分子的杂交而检测MON88701的方法。还提供了可用于检测源自于棉花事件MON88701的DNA的存在的包含本专利技术的方法和组合物的试剂盒。本专利技术提供了源自于包含棉花事件MON88701的植物、植物细胞或种子的棉花植物、种子、植物细胞、后代植物、植物部分或商品。本专利技术还提供包含重组DNA分子的棉花植物、种子、植物细胞、后代植物、植物部分或商品，所述重组DNA分子具有选自SEQIDNO：1—10及其互补序列和片段的核苷酸序列。本专利技术还提供了源自于包含棉花事件MON88701并包含重组DNA分子的植物或种子的棉花植物、种子、植物细胞、后代植物、植物部分或商品，所述重组DNA分子在DNA扩增方法中产生包含选自SEQIDNO：1—10的序列的扩增的DNA分子。本专利技术提供了用于控制田间杂草的方法，所述方法包括种植包含事件MON88701的棉花植物，然后施用能够控制杂草而不伤害含有棉花事件MON88701的植物的有效剂量的麦草畏、草铵膦或麦草畏和草铵膦除草剂两者。本专利技术还提供了用于控制田间杂草的方法，所述方法包括施用有效剂量的至少麦草畏、草铵膦或麦草畏和草铵膦除草剂以控制田间杂草，然后将包含事件MON88701的棉花植物种植在田地中。本专利技术还提供了用于生产基本上不含杂草种子的棉花种子或棉绒的方法，所述方法包括将包含MON88701的麦草畏和草铵膦耐受棉花植物的种子种植在田地中，向所述田地施用足以杀死杂草物种的萌发后有效剂量的至少麦草畏、草铵膦或麦草畏和草铵膦除草剂，以及从所述田地收获种子或棉绒。本专利技术提供了用于生产耐受麦草畏和草铵膦除草剂施用的棉花植物和／或种子的方法，所述方法包括将含有棉花事件MON88701的包含选自SEQIDNO：1—10的序列的植物与第二棉花植物进行有性杂交，由此产生种子，生长所述种子以产生后代植物，用麦草畏和／或草铵膦处理所述后代植物，以及选择对麦草畏和草铵膦两者耐受的后代植物。该方法还可以包括将所选择的后代植物自交以产生多个第二代后代植物，并从其中选择麦草畏和草铵膦耐受植物。所述方法还可以包括将所选择的后代植物与另一种棉花植物进行有性杂交以产生种子，生长所述种子以产生第二代后代植物，用麦草畏和／或草铵膦处理所述第二代后代植物，以及选择耐受麦草畏和草铵膦的第二代后代植物。本专利技术提供了生产耐受麦草畏和草铵膦除草剂施用的棉花植物和／或种子的方法，所述方法包括对包含事件MON88701的含有选自SEQIDNO：1—10的序列的麦草畏和草铵膦耐受棉花植物进行自交，由此产生种子，生长所述种子以产生后代植物，用麦草畏和／或草铵膦处理所述后代植物，以及选择耐受麦草畏和草铵膦的后代植物。本专利技术提供了确定含有棉花事件MON88701的植物或种子的接合性的方法，所述方法包括将棉花DNA样品与包含SEQIDNO：11、12和14的引物组及包含SEQIDNO：13和15的探针组相接触；然后进行所述样品、引物组和探针组的核酸扩增反应；然后在所述核酸扩增反应中检测诊断事件MON88701的第一荧光信号以及与所述第一荧光信号不同而诊断对应于事件MON88701转基因的插入位置的天然棉花基因组DNA的第二荧光信号；以及分析所述核酸扩增反应中所述第一荧光信号和所述第本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组DNA分子，其包含选自SEQ?ID?NO：1?10的核苷酸序列及其互补序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.03.30 US 61/469,1181.一种重组DNA分子，其包含选自SEQIDNO：1-8和10的核苷酸序列及其互补序列，其中所述DNA分子源自于包含事件MON88701的转基因棉花植物，包含棉花事件MON88701的种子的代表性样品已以ATCC登记号PTA-11754保藏。2.权利要求1的重组DNA分子，其中所述DNA分子在棉花植物、植物细胞、种子、植物部分或商品中。3.权利要求1的重组DNA分子，其中所述DNA分子是诊断源自于事件MON88701的DNA的存在的扩增子。4.SEQIDNO：10的足够长的连续核苷酸的核苷酸序列或其互补序列作为检测样品中源自于包含事件MON88701的棉花植物的DNA分子的存在的DNA探针的用途，所述序列在严格杂交条件下与包含选自SEQIDNO：1-8和10的核苷酸序列的DNA分子杂交，并且在严格杂交条件下与不包含选自SEQIDNO：1-8和10的核苷酸序列的DNA分子不杂交。5.SEQIDNO：10的足够长的连续核苷酸的核苷酸序列或其互补序列中的两个序列作为产生诊断样品中的棉花事件MON88701DNA的扩增子的DNA引物对的用途。6.一种检测样品中源自于包含事件MON88701的棉花植物的DNA分子的存在的方法，所述方法包括：a)将所述样品与权利要求4中所述的DNA探针相接触；b)使所述样品和所述DNA探针经受严格杂交条件；以及c)检测所述DNA探针与所述样品中的DNA分子的杂交，其中所述DNA探针与所述DNA分子杂交表明所述样品中存在源自于棉花事件MON88701的DNA分子。7.一种检测样品中源自于包含事件MON88701的棉花植物的DNA分子的存在的方法，所述方法包括：a)将所述样品与权利要求5中所述的DNA引物对相接触；b)进行足以产生包含选自SEQIDNO：1-8和10的序列及其互补序列的DNA扩增子的扩增反应；以及c)检测所述反应中所述DNA扩增子的存在，其中在所述反应中存在所述DNA扩增子表明所述样品中存在源自于包含事件MON88701的棉花植物的DNA分子。8.一种DNA检测试剂盒，其包含至少一个DNA分子，所述DNA分子由SEQIDNO：10的足够长的连续核苷酸的核苷酸序列及其互补序列组成，以起到特异性检测源自于包含事件MON88701的棉花植物的DNA的存在的DNA引物或探针的作用，其中所述DNA的检测对样品中事件MON88701DNA的存在具有诊断作用。9.一种非存活的重组棉花植物部分，其包含权利要求1的重组DNA分子。10.权利要求9的重组棉花植物部分，其中所述棉花植物部分对麦草畏和草铵膦除草剂的处理具有耐受性。11.权利要求9的重组棉花植物部分，当在DNA扩增方法中测试时，其基因组产生包含选自SEQIDNO：1-8和10及其互补序列的DNA分子的扩增子。12.一种非存活的包含事件MON88701的棉花植物部分，包含事件MON88701的种子的代表性样品已以ATCC登记号PTA-11754保藏。13.权利要求12的棉花植物部分，其中所述棉花植物部分是具有至少一个包含棉花事件MON88701的亲本的杂体。14.一种无生命植物材料，其包含权利要求1的重组DNA分子。15.一种非存活的商品，其包含权利要求1的重组DNA分子。16.一种控制田间杂草的方法，所述方法包括将包含事件MON88701的棉花植物种植在田间，并施用有效剂量的麦草畏或者草铵膦或者麦草畏和草铵膦除草剂以控制所述田间的杂草而不损伤所述包含事件MON88701的棉花植物，其中包含棉花事件MON88701的种子的代表性样品已以ATCC登记号PTA-11754保藏。17.权利要求16的方法，其中所述有效剂量的麦草畏除草剂是在生长季内总共0.005磅每英亩至16磅每英亩的麦草畏除草剂。18.权利要求16的方法，其中所述有效剂量的麦草畏除草剂是在生长季内总共0.5磅每英亩至2磅每英亩的麦草畏除草剂。19.权利要求16的方法，其中所述有效剂量的草铵膦除草剂是在生长季内总共0...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·J·布林克尔，W·C·伯恩斯，P·C·C·冯，J·A·肯迪格，S·莱克勒尔，J·L·卢特克，M·玛尔文，
申请(专利权)人：孟山都技术公司，
类型：
国别省市：