本发明专利技术公开了一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒毒株及其应用。所述的病毒毒株的保藏号为CGMCC?NO.7606。该病毒株为鸭源H4N6亚型禽流感病毒，含有CDS序列如SEQ?ID?NO.1～SEQ?ID?NO.8所示的8个片段，分别对应于PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS。本发明专利技术对该病毒株进行了全基因组序列测定，并将其信息用于研究禽流感病毒的检测、分布、流行规律以及控制禽流感的流行和蔓延。本发明专利技术的病毒株补充了我国H4N6亚型禽流感病毒的极有价值的遗传信息，为H4N6亚型禽流感病毒的分子进化和流行病学研究提供了宝贵资料，还能用于制备H4N6亚型禽流感病毒感染的快速诊断试剂和疫苗研究。
【技术实现步骤摘要】
一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒毒株及其应用
本专利技术属于动物病毒学领域，涉及一株分离的病毒新毒株及其应用，具体为一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒毒株及其应用。
技术介绍
禽流感(Avian influenza, Al)是由A型流感病毒引起的一种严重危害禽类健康的传染性疾病。禽类感染禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV)后，症状可表现为非显性感染、亚临诊感染，或轻度呼吸道疾病、产蛋量降低直至急性全身致死性疾病等多种形式。AIV据其致病性可分为高致病性AIV(Highly Pathogenic Avian Influenzavirus, HPAIV)和低致病性 AIV (Low Pathogenic Avian Influenza virus, LPAIV)。H4 亚型属于低致病性AIV，多从水禽和野鸟体内分离到，在鸭、鹅等体内持续存在，并且可能传播给鸡。尽管这些病毒对动物体多呈低致病性，但能够使产蛋量下降，从而给养禽业造成损失。早在1956年，捷克斯洛伐克就在家鸭中分离到了 H4N6，1999年，Alexander首次报道从加拿大患有肺炎的猪体内分离到H4N6亚型AIV，而在俄罗斯和中国也有类似报道，表明该亚型病毒也可以在种间传播。H4亚型AIV的宿主范围比较广，包括鸡、火鸡、鸭、野鸭、鸵鸟、鹦鹉，在死海豹和病猪上也曾分离到了 H4亚型AIV，说明H4亚型AIV对哺乳动物也有一定的致病性。另外，H4亚型AIV感染后，可能再次感染H5、H9或其他亚型AIV，在机体内其NA基因和内部基因可能发生复杂的基因重组，产生新型的重组病毒。因此，在Al监测中，也应该对H4亚型AIV引起高度的关注。AIV存在着广泛的抗原漂移和抗原转变现象，其抗原变异频率很高。因此，若能够对AIV进行全基因组序列测定，对于研究禽流感病毒的检测、分布、流行规律以及控制禽流感的流行、蔓延都将具有非常重大的意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对AIV存在着广泛的抗原漂移和抗原转变现象，其抗原变异频率很高的现状，而对一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒毒株进行全基因组序列测定，并将其信息用于研究禽流感病毒的检测、分布、流行规律以及控制禽流感的流行和蔓延。本专利技术的H4N6亚型禽流感病毒毒株的基因组信息具有重大价值。本专利技术提供的技术方案之一是:一株甲型流感病毒毒株，其保藏号为CGMCCN0.7606。所述的甲型流感病毒毒株为鸭源H4N6亚型禽流感病毒毒株A/duck/Shanghai/Y20/06 (H4N6)，在病毒HA基因切割位点附近的氨基酸序列为“PEKASR丨GLF”，为低致病力禽流感毒株特征。所述的甲型流感病毒毒株于2013年5月13日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)Jia:北京市朝阳区北辰西路I号院3号，中国科学院微生物研究所，其分类命名为:甲型流感病毒，其保藏编号为CGMCC N0.7606。所述的甲型流感病毒毒株，其PB2、PBl、PA、HA、NP、NA、M和NS8个基因片段的CDS序列分别如SEQ ID NO:1~SEQ ID NO:8所示。其中HA和NA基因与H4N6亚型禽流感病毒处于同一分支内；而PB2、PB1、NP、PA基因与目前在我国流行的H6亚型禽流感病毒关系密切；M 基因与 A/environment/Korea/CSM05/2004(H3Nl)处于同一分支；而 NS 基因与 A/wild duck/Korea/YS44/2004(H1N2)同源性最高，因此，这是一株重组禽流感病毒毒株。本专利技术提供的技术方案之二是:前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的制备方法，其包括步骤:将保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株以0.2mL/枚的接种量接种9~10日龄的SPF鸡胚，其中所述毒株的有效剂量为IO4~105EID5Q/mL，然后将接种后的鸡胚置于孵化器中培养48~96h并弃去24h内死亡的鸡胚，收集感染鸡胚的尿囊液即得。本专利技术提供的技术方案之三是:前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株在制备H4N6亚型流感病毒诊断试剂中的应用。本专利技术提供的技术方案之四是:前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株在制备H4亚型禽流感病毒疫苗中的应用。本专利技术提供的技术方案之五是:一种分离的核酸，其核苷酸序列如SEQ ID N0.1、SEQ ID N0.2, SEQ ID N0.3,SEQ ID N0.4, SEQ ID N0.5,SEQ ID N0.6, SEQ ID N0.7 和 SEQID N0.8中的任一种所示。所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.1所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的PB2基因片段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.2所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的PBl基因片 段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.3所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的PA基因片段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.4所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的HA基因片段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.5所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的NP基因片段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.6所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的NA基因片段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.7所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的M基因片段的CDS序列；所述的核苷酸序列如SEQ ID N0.8所示的核酸为前述保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株的NS基因片段的CDS序列。在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。本专利技术所用试剂和原料均市售可得。本专利技术的积极进步效果在于:本专利技术提供了一种重组的鸭源H4N6亚型禽流感病毒。该病毒含有⑶S序列如SEQ ID N0.1~SEQ ID N0.8所示的8个片段，分别对应于PB2、PBl、PA、HA、NP、NA、M和NS。本专利技术的病毒株补充了我国H4N6亚型禽流感病毒的极有价值的遗传信息，为H4N6亚型禽流感病毒的分子进化和流行病学研究提供了宝贵资料，还能用于制备H4N6亚型禽流感病毒感染的快速诊断试剂和疫苗研究。本专利技术的病毒株经全基因组序列测定以及基因进化关系分析，表明该病毒是一株由H4N6、H6N2、H6N5、H3N1和H1N2等不同亚型来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。因此，对H4N6亚型禽流感病毒遗传进化信息的了解，对掌握流感病毒宿主间重组、溯源，丰富病毒库，对相关病原体的监测具有重大意义。生物材料保藏信息本专利技术提供的A/duck/Shanghai/Y20/06 (H4N6)病毒株，已于2013年5月13日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址:北京本文档来自技高网...
【技术保护点】
一株甲型流感病毒毒株，其特征在于，其保藏号为CGMCC?NO.7606。
【技术特征摘要】
1.一株甲型流感病毒毒株，其特征在于，其保藏号为CGMCC N0.7606。2.保藏号为CGMCCN0.7606的甲型流感病毒毒株的制备方法，其特征在于，其包括步骤:将保藏号为CGMCC N0.7606的甲型流感病毒毒株以0.2mL/枚的接种量接种9~10日龄SPF鸡胚，其中所述毒株的有效剂量为IO4~105EID5(l/mL，然后将接种后的鸡胚置于孵化器中培养48~96h并弃去24h内死亡的鸡胚，收集感染鸡胚的尿囊液即得。3.保藏...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨德全，刘佩红，周锦萍，鞠厚斌，葛菲菲，刘健，王建，葛杰，邓波，
申请(专利权)人：上海市动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：
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