【技术实现步骤摘要】
检测维生素BI 2的酶联免疫试剂盒及其应用
本专利技术涉及酶联免疫检测技术,具体涉及一种用于检测维生素B12的酶联免疫试剂盒,其适用于谷物类(玉米面、黄豆面、小米面、大米面)、牛奶、奶粉中维生素B12的测定。技术背景维生素是各种生物维持正常生理功能所必需的一类低分子有机化合物,它们大多数是生化代谢过程中的主要辅酶,在体内参与、调节、控制许多合成和分解代谢,当生物体缺乏维生素时,就会引发物质代谢障碍,引起多种疾病。维生素B12又叫钴胺素,其主要生理功能是参与制造骨髓红细胞,防止恶性贫血,防止大脑神经受到破坏。维生素B12对于促进畜禽生长特别是在促进幼畜生长发育方面效果显著,在畜禽体内主要以参与一碳单位和丙酸代谢发挥作用,影响遗传物质的合成,还能维持神经功能的完整性,是畜禽不可缺少的营养原料。养殖生产过程中,常规饲料中的维生素B12—般作为安全用量,额外添加适量维生素B12可以提高畜禽生产性能,带来可观的经济效益。近年来,余林梁等报道了以HPLC测定维生素H,邓富良等用HPLC同时测定注射用水溶性维生素中维生素H和叶酸,任一平、龙朝阳等以HPLC测定食品中的叶酸,杨谊等以HPLC测定维生素B12。隋玉荣等用离子对色谱法测定了维生素B12及叶酸的含量,H.B.L1、Heudi用不同波长同时测定了维生素H、叶酸和维生素B12,宋金春等通过优化色谱条件,建立了同一波长条件下HPLC同时测定注射用水溶性维生素中维生素H、叶酸及维生素B12含量的方法。另外维生素B12的测定方法主要有比色法、电化学分析法、离子交换法、激光共振拉曼光谱法等,这些方法均是先测定样品中 ...
【技术保护点】
一种检测维生素B12的酶联免疫检测试剂盒,其特征在于包括有:(1)包被有维生素B12偶联抗原的酶标板;(2)维生素B12特异性抗体;(3)酶标记抗抗体;(4)维生素B12标准品溶液;(5)底物显色液;(6)终止液;(7)浓缩洗涤液;(8)复溶液。
【技术特征摘要】
1.一种检测维生素B12的酶联免疫检测试剂盒,其特征在于包括有: (1)包被有维生素B12偶联抗原的酶标板; (2)维生素B12特异性抗体; (3)酶标记抗抗体; (4)维生素B12标准品溶液; (5)底物显色液; (6)终止液; (7)浓缩洗涤液; (8)复溶液。2.如权利要求1所述的试剂盒,其特 征在于所述维生素B12偶联抗原是由维生素B12半抗原与载体蛋白偶联得到,所述维生素B12半抗原结构如下: 3.如权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:所述维生素Β12半抗原的制备方法主要包括如下步骤: 0.50g维生素B12、0.1Og琥珀酸酐和Iml吡啶在20ml DMSO中的混合液,在80°C下搅拌反应40小时,蒸除溶剂,乙醇-水体系多次重结晶后得到邻苯二甲酸单维生素B12酯。4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述的维生素B12特异性抗体为维生素B12单克隆抗体。5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述酶标记抗抗体的标记酶为辣根过氧化物酶;酶标记抗抗体是采用过碘酸钠法将标记酶与抗抗体偶联得到。6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的终止...
【专利技术属性】
技术研发人员:万宇平,吴鹏,罗晓琴,冯静,杨秀贤,韩雪倩,顾蓉蓉,蒲小容,
申请(专利权)人:北京勤邦生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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