一种利用酰胺键断裂检测过氧化亚硝酰的荧光探针及其应用制造技术

一种利用酰胺键断裂检测过氧化亚硝酰的荧光探针及其应用涉及一类在ONOO-存在下荧光波长发生明显位移的荧光探针。本发明专利技术提供了一种可用于选择性检测细胞内ONOO-的荧光探针。本发明专利技术分别采用BODIPY染料和萘酰亚胺染料作为荧光母体，通过引入o-苯硒（碲）苯甲酰胺结构作为与ONOO-反应的活性中心，利用有机硒（碲）醚被氧化后能使酰胺键断裂的过程，以实现选择性地检测ONOO-；利用酰胺键断裂前后对整个化合物荧光波长的影响作为探针识别的检测信号，并将探针用于检测细胞内ONOO-的荧光成像。

【技术实现步骤摘要】
一种利用酰胺键断裂检测过氧化亚硝酰的荧光探针及其应用
本专利技术涉及一类用于检测过氧化亚硝酰(0N00-)的荧光探针，具体地说，是一类在0N00_存在下荧光波长发生明显变 化的荧光探针。
技术介绍
过氧化亚硝酰(ONOCT)是一种具有强氧化性的短寿命活性物种，在人体内由一氧化氮和超氧负离子反应产生。0N00—能作用于被免疫系统识别的病菌等有害物质而使之失活，从而保护机体免受有害物质侵害，维持细胞和组织的正常功能。但是，在细菌感染等病理条件下，大量ONOCT的产生会导致缺血再灌注损伤、风湿性关节炎、败血症、中风、多发性硬化、动脉硬化、肠炎、癌症及多种神经退行性疾病。然而，长久以来，检测手段的缺乏阻碍了人们对0N00_在生命体系中作用行为的研究。荧光探针是有效检测生命体内0N00_的手段之一。一个具有应用前景的荧光探针应具有作用前后荧光变化明显、对目标分子响应快、选择性好、可用于实时可逆检测等优点。Tetsuo Nagano等公开了一类用以检测高反应性活性氧的突光探针HPF及APF (结构见图 1，T.Nagano et.al, J.Bi0.Chem, 2003，278，3170)，与 ONOCT 作用后荧光增强从而检测0N00-的存在。但是这类荧光探针同时对羟自由基、次氯酸根等活性物种响应灵敏，不能用于专一性地检测0N00_。Dan Yang等公开了一种检测0N00_的突光探针HKGreen-1 (结构见图1，Dan Yang et.al, J.Am.Chem.Soc, 2006，128，6004)，次氯酸根不干扰 ONOCT 的检测，但轻自由基对0N00_检测的干扰很大。最近，Dan Yang等公开了一种检测0N00_的突光探针 HKGreen-2 (结构见图 1，Dan Yang et.al, Org.Lett.，2009，11，1887),该探针仍然对轻自由基有较强响应。上述探针都是荧光增强型探针，没有波长的变化，无法实现定量检测。双波长变化的比率型探针由于可以建立内标，可大大降低外部环境的干扰，实现定量检测。因此，开发具有良好选择性，可进行比率检测生物体系中0N00_的荧光探针具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术就是针对上述问题，提供了一种可用于选择性检测细胞内0N00-的荧光探针，此探针可以选择性地与0N00_作用，作用后荧光波长发生明显改变，可实现对0N00_比率检测。为了实现本专利技术的上述目的，本专利技术采用如下技术方案:本专利技术分别采用BODIPY染料和萘酰亚胺染料作为荧光母体，通过引入ο-苯硒(碲)苯甲酰胺结构作为与0N00—反应的活性中心，利用有机硒(碲)醚被氧化后能使酰胺键断裂的过程，以实现选择性地检测0N00—;同时利用酰胺键断裂前后对整个化合物荧光性质的影响调变探针分子的荧光性质。所述的突光探针的通式为:通式本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种荧光探针，其特征在于，所述的荧光探针的通式为：通式Ⅰ通式Ⅰ中，R1、R2为H、C1?20的烷基、羟基、烷氧基、氰基、烷基仲胺基、硝基、卤素或磺酸基；R3为C1?5烷基、苯基或苄基；X为Se或Te；Y与R3NH?中的N以C?N键相连构成荧光染料F，并且R3NH?中H被o?(R1PhX)?R2PhC=O取代，即通式I中除Y?N?R3部分；F为在酰胺基和氨基两种状态下，其荧光波长发生明显位移的荧光染料，Y为荧光染料F结构中除去R3NH?的部分。FDA00001965587200011.jpg

【技术特征摘要】
1.一种荧光探针，其特征在于，所述的荧光探针的通式为: 2.根据权利要求1荧光探针，其特征在于: 所述荧光染料F为含R3NH-的多甲川菁染料、含R3NH-的罗丹名类染料、含R3NH-的BODIPY类染料、含R3NH-的萘酰亚胺类染料或含R3NH-的香豆素类染料。3.根据权利要求1或2所述荧光探针，其特征在于:所述通式I化合物，当X被氧化后，使邻位的酰胺键断裂。4.一种权...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩克利，王炳帅，于法标，李鹏，孙小飞，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：