一种高纯芦丁的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高纯芦丁的制备方法，以芦丁粗品为原料，利用有机溶剂热溶解、热过滤，将滤液以大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺为混合填料进行色谱柱分离得到高纯芦丁，经HPLC测定其纯度最高可达98%以上，产量可达千克量级。本发明专利技术工艺稳定快速，操作简单，成本低廉，适合工业化大规模生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及天然药物的制备领域，具体涉及。
技术介绍
芦丁(Rutin)又名芸香叶苷、维生素P，是一种来源很广的黄酮类化合物。黄酮类化合物在心脑血管疾病的治疗上起到举足轻重的作用，芦丁便是其中的一个典型代表。同时芦丁具有抗自由基活性、抗病毒、抗脂质过氧化、抗急性胰腺炎等药理作用，可用于多种疾病的治疗。国内外医药行业以芦丁为原料生产的曲克芦丁、芦丁镁铬盐、多维葡萄糖羟丁芦丁、槲皮素等药物扩大了芦丁产品的应用范围和疗效，同时芦丁还可以作为天然黄色素使用，也是一种理想的天然广谱防晒剂。随着研究的深入，芦丁在在各领域的得到了更广泛应用，这就使其需求量进一步加大。我国是芦丁的生产和消费大国，目前全球芦丁原料药总产量已达3000~3600吨，而我国芦丁总产量在1200吨左右，约占全球芦丁总产量的1/3。因此，快速稳定地获取高纯度芦丁则可以产生更好的经济效益和社会效益。实验室及工业化生产提取芦丁时，通常采用的是碱提酸沉法。该方法是利用芦丁的酸性及溶解度极小的特性，与碱成盐而易溶于水，酸化后其溶解度骤降而游离析出的原理，再经数次重结晶得到较纯的芦丁。该方法工艺成熟，操作简单，多年来一直被视为较理想的方法，但该方法得到的芦丁纯度一般仅为80~90%，难以满足越来越广泛的应用需求。芦丁是一种黄酮类化合物，其结构中存在有一对邻二酚羟基，化学性质活泼，由于光照、温度等的影响，邻二酚羟基易发生结构变化、氧化或分解。芦丁在酸性环境其所含双糖也易被水解而转化为槲皮素，因此高纯芦丁的制备在技术上存在很大的难度。CN1153174A采用分子形态转变法精制芦丁所得纯品芦丁收率高、质量好，但是该方法所用粗品芦丁原料的纯度要求在90%左右，若应用于工业化大规模生产，无疑大大增加了生产成本。CN1546506A采用三氯醋酸法脱蛋白及改良的Sevage法脱蛋白来纯化芦丁，该法操作简单、节省劳力，但是所用试剂毒性较高，而且纯度仅为90%，难以满足当前对高纯芦丁的需求。CN101260132A采用高速逆流色谱法精制高纯度芦丁，该方法所制备芦丁纯度可达98%以上，但是使用多种有机溶剂，对环境有一定影响，同时其制备只有克量级，成本高，不利于工业化生产。CN102718820A采用树脂进行柱层析精制芦丁，该方法将所得芦丁用去离子水淋洗，在80~90°C条件下干燥10~14个小时，因为较高温度下长时间干燥尤其有空气或光照存在的情况下易发生部分芦丁的氧化或分解，因此存在一定的缺陷。鉴于此，寻找一种快速制备高纯芦丁的新方法并使之可以工业化大规模投产，已是目前芦丁生产工艺研究的当务之急。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，以解决现有技术在制备高纯芦丁时不能同时达到原料芦丁纯度要求低、产品芦丁纯度高、制备过程稳定快速、制备成本低、试剂毒性低等要求的缺陷。为解决上述缺陷，本专利技术采用以下技术方案:，包括如下步骤:步骤一、以芦丁粗品为原料，与有机溶剂按1g:6~13mL混合，加热搅拌至完全溶解，热过滤得滤液；步骤二、将步骤一所得滤液进行柱色谱分离，以大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺为混合填料，有机溶剂湿法装柱，依次用体积百分比为10~20%有机溶剂水溶液、90~99%有机溶剂水溶液作为洗脱剂，洗脱流速为100~200ml/min，其中，大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺的质量比m/m为 1:3 ~6:1 ;步骤三、根据洗脱液颜色由无色变有色开始第一次收集，至棕黄色变为浅黄色收集结束，将第一次收集所得洗脱液静置析晶；步骤四、将步骤三中洗脱液静置析晶所析出的固体过滤，并用有机溶剂淋洗2~3次，40~50°C条件下真空干燥得到高纯芦丁。步骤一、步骤二和步骤四所述的有机溶剂同为甲醇或乙醇。步骤一所述加热搅拌的温度为70~80°C。步骤二所述混合填料的质量是步骤一所述芦丁粗品质量的6~10倍。步骤三还包括:根据洗脱液颜色由浅黄色变棕黄色开始第二次收集，至变为无色收集结束，第二次收集的洗脱液通过减压蒸馏，回收有机溶剂及获取芦丁浸膏，所述芦丁浸膏在40~50°C条件下真空干燥，所得产物作为制备高纯芦丁的原料。本专利技术的有益效果:1、本专利技术所用的色谱柱填料为首次使用的不同材料的混合填料，价格适中，分离效果好、分离效率高。2、本专利技术对原料芦丁粗品纯度要求低，纯度在80%以上均适用，而制备的高纯芦丁的纯度最高可达98%以上，产量可达千克量级。3、本专利技术所用试剂仅甲醇低毒，水和乙醇绿色环保且价格低廉。4、本专利技术所制备的高纯度芦丁可用于药品、食品添加剂、化妆品、芦丁标准品的研发与应用，同时该制备方法稳定快速，操作简单，成本低廉，适合大规模工业化生产。【附图说明】图1是实施例1制备的高纯芦丁的色谱出峰图谱。图2是实施例2制备的高纯芦丁的色谱出峰图谱。图3是实施例3制备的高纯芦丁的色谱出峰图谱。图4是实施例4制备的高纯芦丁的色谱出峰图谱。【具体实施方式】下面结合实施例和附图对本专利技术做更进一步地解释。下列实施例仅用于说明本专利技术，但并不用来限定本专利技术的实施范围。，包括如下步骤:步骤一、以芦丁粗品为原料，与有机溶剂按Ig: 6~13mL混合，在70~80°C条件下搅拌至完全溶解，热过滤得滤液；步骤二、将步骤一所得滤液进行柱色谱分离，以大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺为混合填料，有机溶剂湿法装柱，依次用体积百分比为10~20%有机溶剂水溶液、90~99%有机溶剂水溶液作为洗脱剂，洗脱流速为100~200ml/min，其中，大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺的质量比m/m为1:3~6:1 ;混合填料的质量是芦丁粗品质量的6~10倍；步骤三、根据洗脱液颜色由无色变有色开始第一次收集，至棕黄色变为浅黄色收集结束，将第一次收集所得洗脱液静置析晶；步骤四、将步骤三中洗脱液静置析晶所析出的固体过滤，并用少量有机溶剂淋洗2~3次，40~50°C条件下真空干燥得到高纯芦丁。步骤一、二和四所述的有机溶剂相同，可以为甲醇或乙醇。洗脱液第一次收集之后，根据洗脱液颜色由浅黄色变棕黄色开始第二次收集，至变为无色收集结束，第二次收集的洗脱液通过减压蒸馏，回收有机溶剂及获取芦丁浸膏，所述芦丁浸膏在40~50°C条件下真空干燥，所得产物作为制备高纯芦丁的原料，以提高原料的利用率，降低制备成本。以下实施例采用的大孔树脂是由山东鲁抗立科药物化学有限公司提供的DM-18非极性大孔树脂。聚酰胺为柱层析用聚酰胺，以下实施例采用的是浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂提供的柱层析用聚酰胺。微晶纤维素为柱层析用微晶纤维素，以下实施例采用的是国药集团化学试剂有限公司提供的柱层析用微晶纤维素。 本专利技术对所用原料芦丁粗品纯度要求不高，纯度在80%以上均可适用，以下实施例采用的芦丁粗品，以槐米为原料按碱提酸沉法提取并重结晶I~2次获得，纯度为80~85%。原料芦丁粗品和实施例所得产品高纯芦丁的纯度按《中华人民共和国药典》(2010年版)的规定方法测定，测试手段为高效液相色谱法(HPLC)，产品的纯度最高可达98%以上。实施例1步骤一、取纯度为83%的芦丁粗品500g，与甲醇按lg:6mL的比例在75°C条件下搅拌至完全溶解、热过滤，得滤液。步骤二本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯芦丁的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一、以芦丁粗品为原料，与有机溶剂按1g:6～13mL混合，加热搅拌至完全溶解，热过滤得滤液；步骤二、将步骤一所得滤液进行柱色谱分离，以大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺为混合填料，有机溶剂湿法装柱，依次用体积百分比为10～20%有机溶剂水溶液、90～99%有机溶剂水溶液作为洗脱剂，洗脱流速为100～200ml/min，其中，大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺的质量比m/m为1:3～6:1；步骤三、根据洗脱液颜色由无色变有色开始第一次收集，至棕黄色变为浅黄色收集结束，将第一次收集所得洗脱液静置析晶；步骤四、将步骤三中洗脱液静置析晶所析出的固体过滤，并用有机溶剂淋洗2～3次，40～50℃条件下真空干燥得到高纯芦丁。

【技术特征摘要】
1.一种高纯芦丁的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: 步骤一、以芦丁粗品为原料，与有机溶剂按Ig:6~13mL混合，加热搅拌至完全溶解，热过滤得滤液； 步骤二、将步骤一所得滤液进行柱色谱分离，以大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺为混合填料，有机溶剂湿法装柱，依次用体积百分比为10~20%有机溶剂水溶液、90~99%有机溶剂水溶液作为洗脱剂，洗脱流速为100~200ml/min，其中，大孔树脂/聚酰胺、大孔树脂/微晶纤维素或微晶纤维素/聚酰胺的质量比m/m为1:3 ~6:1 ； 步骤三、根据洗脱液颜色由无色变有色开始第一次收集，至棕黄色变为浅黄色收集结束，将第一次收集所得洗脱液静置析晶； 步骤四、将步骤三中洗脱液静置析晶所析出的固体过滤，并用...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖志新，贾海洋，刘世军，刘超，叶润，
申请(专利权)人：东南大学，
类型：发明
国别省市：