一种在慢性乙肝病毒感染状态下诱导机体产生特异性免疫的乙肝疫苗制造技术

本发明专利技术公开了一种乙肝疫苗。具体而言，本发明专利技术公开了一种包含一种免疫增强剂的乙肝疫苗，其能够在慢性乙肝病毒感染状态下诱导机体产生特异性免疫。本发明专利技术的乙肝疫苗包含Toll样受体的激动剂作为免疫增强剂。

【技术实现步骤摘要】
一种在慢性乙肝病毒感染状态下诱导机体产生特异性免疫的乙肝疫苗
本专利技术涉及乙肝疫苗。具体而言，本专利技术涉及一种包含免疫增强剂的乙肝疫苗，其能够在慢性乙肝病毒感染状态下诱导机体产生特异性免疫反应。本专利技术的乙肝疫苗包含Toll样受体的激动剂作为免疫增强剂。此外，本专利技术还涉及To 11样受体的激动剂在乙肝疫苗中作为免疫增强剂的用途。
技术介绍
在中国，乙型肝炎病毒(HBV)感染已经成为最严重的公共卫生问题之一，约60%的人群感染过HBV。根据2006年全国流行病学的调查结果，目前中国慢性乙肝表面抗原(HBsAg)携带率仍然高达7.2%，约有9300万的HBV感染患者和3000万的慢性乙肝患者。目前，临床上对慢性乙肝患者的治疗主要是采取非特异性的抗病毒疗法，包括使用核苷类似物和I型干扰素。核苷类似物药物对于HBV的特异性不强，并且，HBV病毒基因在核苷类似物药物使用后容易发生变异，治疗效果不好；1型干扰素的治疗疗程长、费用高，患者持久应答率也仅为10-47%，平均24%。这种非特异性的抗病毒疗法的治疗策略，对乙肝患者的治疗效果不理想。常规重组乙型肝炎疫苗主要用于特异性预防新生儿和易感人群的HBV感染。新生儿乙肝疫苗免疫接种有效地预防了新发HBV感染。其中以天然结构的乙肝表面抗原(HBsAg)为靶抗原。但是，这一手段仅能在未经感染的健康人体内诱导产生抗体，发挥预防效果，是一种预防性疫苗。慢性HB V感染的持续状态主要是由于机体对乙肝病毒抗原的免疫耐受。而目前常规使用的重组乙型肝炎疫苗，即免疫预防性乙肝疫苗，对已患有慢性HBV感染者无效，也无任何治疗效果。慢性HBV感染患者如不做任何治疗，据统计将有25-40%的感染者会进展为失代偿性肝硬化或者肝癌。因此，目前全世界许多学者尝试通过诱导慢性HBV感染者产生针对HBV病毒抗原的特异性免疫应答反应，通过调动机体本身的特异性免疫力，清除慢性HBV感染性肝细胞的治疗性疫苗。治疗性疫苗是指在已感染病原微生物或已患有某些疾病的机体中，通过诱导特异性的免疫应答，达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工合成或用基因重组技术表达的产品或制品，其能激发和诱导机体对相关抗原的特异性免疫应答，可明显改善病情甚至可以使疾病痊愈。治疗性疫苗与传统意义上的预防性疫苗有着明显的区别。首先，治疗性疫苗的使用者为已感染患者，他们往往存在不同程度上的免疫缺陷或免疫耐受，而预防性疫苗的使用者为健康人；其次，预防性疫苗主要是产生中和性抗体，而治疗性疫苗除了需要诱导更高水平的抗体外，还需要诱导产生特异性CD4及CD8T细胞应答，才足以清除病毒感染性细胞，终止病毒感染。乙肝治疗性疫苗的研制是发现和设计HBV相关抗原，并通过联合高效的免疫佐剂(免疫增强剂)，以达到有效刺激乙肝慢性携带者的免疫系统，从而打破免疫耐受，杀伤病毒感染性肝细胞，特异性地抑制和清除病毒，最终达到治疗的目的。其具有费用相对低、以及特异性强、疗效好等特点。从发展趋势来看，乙肝治疗性疫苗有望成为治愈慢性乙型肝炎的有效途径。因此，研制经济而有效的乙肝治疗性疫苗，是一项世界性的重大而迫切的任务，这一任务对于亚非发展中国家显得更为重要。而目前乙肝治疗性疫苗多停留在实验室研究或临床实验阶段，迄今没有治疗性疫苗被批准在任何国家上市。现阶段研究较多的治疗性疫苗种类主要有蛋白疫苗、核酸疫苗(如DNA疫苗)、T细胞表位肽疫苗等。现有的治疗性乙肝疫苗具有某些优点，但也存在着一些问题。如DNA疫苗能诱导强烈的细胞免疫和体液免疫应答，可打破特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL)耐受，但其安全性(包括环境安全性和人体安全性)和标准化问题尚待深入研究。多表位基因疫苗或多表位多肽疫苗为多价疫苗研究提供了新的思路，但是由于MHC分子的限制性，其仅局限于表达某些特定MHC分子的患者，并且还需要克服表位疫苗免疫原性弱的固有缺点。抗原抗体复合物治疗性疫苗由于采用的是常规的铝盐佐剂，其免疫原性也具有一定的局限性。乙肝病毒核心抗原(HBcAg)是乙肝治疗性疫苗研发过程中一个重要抗原，其是HBV的一种非分泌性的衣壳结构蛋白，具有较高的免疫原性。在自发恢复的急性乙肝感染患者中可以检测到强烈的HBcAg特异性的T细胞应答，而在慢性乙肝感染患者中检测不到。因此，HBcAg被认为是宿主控制HBV感染中的一个重要靶标，而其特异性T细胞的存在和慢性HBV感染的清除有关=HBcAg特异性的Th细胞能帮助B细胞产生抗HBs，而其诱导产生的特异性CTL将更有助于清除HBV感染细胞。HBsAg是HBV的表面结构蛋白，含有病毒感染细胞的受体，特异性抗-HBs的产生，可以终止病毒感染的进一步发生。因此从免疫原选择方面，本专利技术即选用了 HBsAg及HBcAg作为免疫原，以诱导更有效的抗病毒免疫应答。目前在人体使用最广泛的佐剂是铝佐剂，同时它也是目前商品化乙肝预防性疫苗所采用的佐剂。铝佐剂主要诱导体液免疫应答，而不能诱导针对靶蛋白的细胞免疫应答。因此，对于乙肝治疗性疫苗 来讲，单纯使用铝佐剂是不足够的。近年来随着免疫学的研究进展，已发现有许多分子具有佐剂的特性，它们可以活化特定种类的抗原提呈细胞(APC)并诱导不同类型的细胞免疫应答。专利技术概述本专利技术一方面提供了 Toll样受体(TLR)的激动剂作为佐剂或者免疫增强剂在制备乙肝疫苗中的用途，其中所述Toll样受体(TLR)的激动剂用于增强所述乙肝疫苗在慢性乙肝病毒感染状态下的对象中所诱导的针对乙肝病毒的免疫反应。在一个实施方案中，本专利技术提供了 TLR7和/或TLR8的激动剂CL097作为免疫增强剂在制备乙肝疫苗中的用途，其中所述乙肝疫苗包含乙肝表面抗原(HBsAg)和铝佐剂，并且所述乙肝疫苗能够在慢性乙肝病毒感染状态下的对象中诱导出针对乙肝病毒的特异性免疫反应，所述CL097具有如下结构式:本文档来自技高网...

【技术保护点】
CL097作为免疫增强剂在制备乙肝疫苗中的用途，其中所述乙肝疫苗包含乙肝表面抗原(HBsAg)和铝佐剂，并且所述乙肝疫苗能够在慢性乙肝病毒感染状态下的对象中诱导出针对乙肝病毒的特异性免疫反应，所述CL097具有如下结构式：FDA00001962178900011.jpg

【技术特征摘要】
1.CL097作为免疫增强剂在制备乙肝疫苗中的用途，其中所述乙肝疫苗包含乙肝表面抗原(HBsAg)和铝佐剂，并且所述乙肝疫苗能够在慢性乙肝病毒感染状态下的对象中诱导出针对乙肝病毒的特异性免疫反应，所述CL097具有如下结构式: 2.权利要求1的用途，其中所述乙肝疫苗还包含乙肝核心抗原(HBcAg)。3.权利要求1或2的用途，其中所述乙肝疫苗中所使用的CL097和铝佐剂的质量比在1:10至1:100之间，例如1:40。4.权利要求3的用途，其中所述乙肝疫苗中所使用的CL097和乙肝表面抗原(HBsAg)的质量比在1:1至1:10之间，例如1:1。5.权利要求2的用途，其中所述乙肝疫苗中所使用的CL097和乙肝核心抗原(HBcAg)的...

【专利技术属性】
技术研发人员：曲春枫，汪颖，吴志远，
申请(专利权)人：中国医学科学院肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：