一种对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸制造技术

本实用新型专利技术对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸，包括：等宽的条带状样品垫[1]、结合垫[2]、分析膜[3]、吸水垫[4]、粘性底衬[5]和Max线指示贴[6]，吸水垫与分析膜形成第一结合区，结合垫与分析膜形成第二结合区，样品垫与结合垫形成第三结合区，Max线指示贴粘贴于结合垫与样品垫上，一侧与结合垫边缘平齐，另一侧比样片垫略短，各结合区长度以及略短长度为相应垫体长度的1/2-3/5。本实用新型专利技术具有牢固稳定、尺寸精准、针对性强的特点，尤其适宜在现场对尿液中的氯胺酮进行快速定量检测。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本技术对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸，包括：等宽的条带状样品垫、结合垫、分析膜、吸水垫、粘性底衬和Max线指示贴，吸水垫与分析膜形成第一结合区，结合垫与分析膜形成第二结合区，样品垫与结合垫形成第三结合区，Max线指示贴粘贴于结合垫与样品垫上，一侧与结合垫边缘平齐，另一侧比样片垫略短，各结合区长度以及略短长度为相应垫体长度的1/2-3/5。本技术具有牢固稳定、尺寸精准、针对性强的特点，尤其适宜在现场对尿液中的氯胺酮进行快速定量检测。【专利说明】一种对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸专利
本技术涉及一种基于上转发光免疫层析技术的试纸结构，特别涉及一种可对尿液中氯胺酮浓度进行精确定量检测的基于上转发光免疫层析技术的试纸。
技术介绍
氯胺酮(KET)是苯环己哌啶(phencyclidine)的衍生物，别名K粉，是新型毒品的一种，是我国法律法规所规定管制的直接作用于人的中枢神经系统，使人兴奋或抑制，连续使用能使人产生依赖性的精神药物。吸食氯胺酮短期可使说话迷糊，并能引起幻觉、情绪抑郁、镇静、催眠，甚至昏睡。长期滥用可使人记忆力衰退及认知能力障碍，并会导致心功能受损害，亦可给人带来躯体和心理依赖，并会因出现幻觉而伤及自己或他人。K粉通常可以采取气雾法摄取、口服、静脉注射、肌注、鼻吸等多种方式吸食，能兴奋心血管，吸食过量可致死，具有很强的精神依赖性。K粉成瘾后，在毒品作用下，吸食者会疯狂摇头，很容易摇断颈椎；同时，疯狂的摇摆还会造成心力、呼吸衰竭。吸食过量或长期吸食，可以对心、肺、神经都造成致命损伤，对中枢神经的损伤比冰毒还厉害。氯胺酮的检测方法几乎包含了现代分析化学的各个领域，有色谱法、光谱法、质谱法等，还涉及生物学检测的多种经典技术，如免疫层析法、酶联免疫吸附法等。由于技术水平的限制，目前国际上对氯胺酮的检测主要采用先筛查后确证的方法，即先采用快速定性检测方法对吸毒群体进行筛查，然后再用精确定量方法对初筛阳性的样本进行确证。主流的初筛方法是胶体金免疫层析法，它是一种基于多种微孔材料侧向毛细虹吸以达到特定靶标捕获与示踪的固相标记免疫测定技术。该方法具有简便、快速和价格低廉等优势，但是存在敏感性差、肉眼主观判读结果、无法精确定量等无法克服的技术缺陷。另外一些在初筛中涉及的技术还包括放射免疫分析法和酶联免疫吸附法(ELISA)。放射免疫分析法的样品用量少且无需预处理，准确度较高，但是对操作人员和环境有较大危害；ELISA成本较低，速度较快，灵敏度高，但是样品需要一定的预处理，检测时间长达2-3小时，需要酶标仪，且对操作人员的专业水平要求较高，难以实现真正意义的现场在线监控和检测。确证方法主要有高效液相色谱法(HPLC)和气/质联用分析法(GC-MS)。HPLC和GC-MS法具有准确、重复性好，适用于定量检测等优点，是目前应用最广泛、最权威的确证毒品的定量方法。但是这两种方法都需要对样品进行预处理，操作繁琐，对操作人员的专业素质和技术熟练水平有较高的要求；而且，这两种方法的仪器比较昂贵，成本较高，因此只能定位为“初筛完成后针对阳性样品，由专业技术人员在实验室中进行结果复核”，不适合现场快速初筛。针对氯胺酮初筛所依赖的免疫层析技术存在的技术缺陷，一种新型上转发光材料(Up-Converting Phosphor, UCP)的出现为其提供了解决的突破点。UCP是新型的稀土金属晶体光学材料，其独特的物理结构以及化学组成使其具有自然界中不存在的上转发光现象，即UCP颗粒可由红外光激发、发射可见光，由此为所有以UCP颗粒作为生物示踪物的检测技术奠定了高信噪比、精确量化分析的坚实基础；依靠上转发光技术(Up-convertingPhosphor Technology, UPT)促成了免疫层析技术与UCP结合成为上转发光免疫层析技术(Up-converting Phosphor Technology based Lateral Flow assay, UPT-LF assay),即通过一系列表面修饰与活化后将UCP颗粒作为示踪物应用于免疫层析，在红外光照射下以独特的上转发光现象揭示生物活性分子之间高敏感特异的识别。使用上转发光免疫分析仪即可对UPT免疫层析试纸上由UCP产生的特异检测信号进行激发、接收、转换，从而实现目标被检物的准确定量。UPT-LF试纸检测过程中样品无需预处理，加样后数分钟可完成检测，市售上转发光免疫分析仪价格低廉、操作简便、易于携带，可在数秒内扫描获取定量结果，因此无专业背景人员也可在现场快速实现特定靶标的精确定量检测。由此可见，通过UCP独特的光学特性针对性的解决了传统免疫层析技术敏感性差、不可精确定量的问题，同时保留了层析技术简便快捷的技术优势。综上所述，利用UPT-LF对尿液中氯胺酮浓度进行精确定量检测，将会大幅提升氯胺酮现场初筛的准确性、可靠性。然而，目前已有的免疫层析试纸各区域结构相对松散，存在试纸装载中易于散落的缺点，且试纸结构对氯胺酮特性针对性较差，因此有必要设计针对氯胺酮定量检测的上转发光免疫层析试纸。专利技术技术为了克服现有技术中存在的缺陷，本技术目的在于提供一种结构更牢固的对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析(UPT-LF)试纸。本技术提供的一种对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析(UPT-LF)试纸，包括:等宽的条带状样品垫、结合垫、分析膜、吸水垫、粘性底衬和Max线指示贴，其中，样品垫、结合垫、分析膜和吸水垫依次粘贴于粘性底衬上，其中分析膜贴于粘性底衬的中间，吸水垫贴于分析膜的一侧且与分析膜形成第一结合区，结合垫贴于分析膜的另一侧且与分析膜形成第二结合区，样品垫贴于结合垫的另一侧之上且与结合垫形成第三结合区，Max线指示贴粘贴于结合垫与样品垫上且覆盖结合垫；所述第一结合区长度为吸水垫长度的1/2-3/5，所述第二结合区长度为结合垫长度的1/2-3/5 ;所述第三结合区长度为样品垫长度的1/2-3/5。其中，Max线指示贴与结合垫重叠一侧的边缘与结合垫平齐，与样品垫重叠一侧的边缘比样片垫略短，略短部分长度为样品垫长度的1/2-3/5。具体的，所述第一结合区长度为吸水垫长度的11/20 ;所述第二结合区长度为结合垫长度的11/20 ;所述第三结合区长度为样品垫长度的11/20 ；分析膜上在长度方向间距设置有平行的检测带T和质控带C，检测带T中包被有氯胺酮-牛血清白蛋白交联抗原，质控带C中包被有兔抗羊IgG。结合垫中固定有UCP结合物混合物，UCP结合物混合物中包括:检测结合物和质控结合物，检测结合物为UCP -氯胺酮单克隆抗体结合物，质控结合物为UCP -羊IgG结合物；样品垫为经缓冲液、表面活性剂、封闭蛋白、无机盐处理的滤尿垫。采用以上方案，本技术对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析(UPT-LF)试纸，整个试纸涉及的重叠区域包括“吸水垫与分析膜重叠的第一结合区”、“结合垫与分析膜重叠的第二结合区”、“样品垫与结合垫重叠的第三结合区”，均采用中度偏重度重叠方式，根据所确定的检测目标物氯胺酮与试剂的结合及其在试纸上的移动特点，设计重叠幅度为各自的1/2-3/5 (即10本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种对尿液中氯胺酮浓度进行定量检测的上转发光免疫层析试纸，其特征在于，该试纸的组成结构包括：等宽的条带状样品垫[1]、结合垫[2]、分析膜[3]、吸水垫[4]、粘性底衬[5]、Max线指示贴[6]，其中，样品垫[1]、结合垫[2]、分析膜[3]和吸水垫[4]依次粘贴于粘性底衬[5]上，其中分析膜[3]贴于粘性底衬[5]的中间，吸水垫[4]贴于分析膜[3]的一侧且与分析膜[3]形成第一结合区，结合垫[2]贴于分析膜[3]的另一侧且与分析膜[3]形成第二结合区，样品垫[1]贴于结合垫[2]的另一侧之上且与结合垫[2]形成第三结合区，Max线指示贴[6]粘贴于结合垫[2]与样品垫[1]上且覆盖结合垫[2]；所述第一结合区长度为吸水垫[4]长度的1/2?3/5，所述第二结合区长度为结合垫[2]长度的1/2?3/5；所述第三结合区长度为样品垫[1]长度的1/2?3/5。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周蕾，杨笑熳，杨瑞馥，黄艳鹏，李靖，林长青，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院微生物流行病研究所，中海智北京科技有限公司，北京热景生物技术有限公司，
类型：实用新型
国别省市：