The invention relates to a plasmid standard molecule for qualitatively detecting a variety of transgenic rice. The plasmid standard molecules containing exogenous regulatory elements using high frequency in transgenic rice (P-CaMV35S gene), T-NOS, P-Ubi gene fragment, exogenous marker gene Bar, Hpt fragment and SPS gene in rice standard and PEPC fragment. The experiment proved that the plasmid standard molecule could be used as a positive standard for qualitative screening and monitoring of transgenic rice.
【技术实现步骤摘要】
可检测多种转基因水稻的质粒标准分子
本专利技术涉及一种转基因水稻定性筛选检测用质粒DNA，具体涉及一种可检测多种转基因水稻的质粒标准分子。
技术介绍
在转基因生物安全管理体系建设中，转基因安全监管问题是当务之急。其中，转基因生物的检测是安全监管的重要组成部分。在转基因生物的检测中，需要对检测活动设置阳性对照，以进行检测结果的监控。通常以从已知的转基因产品中提取的基因组作为阳性对照，但由于我国对转基因产品控制严格，很难得到传统的阳性对照材料，因此亟需研制新型阳性对照材料。质粒标准分子以其制备快捷，成本经济，易于复制等优点，在转基因检测中具有较好的应用前景。尽管质粒标准分子已开始出现在转基因作物的定性筛选、监测、定量检测等领域。如转基因水稻克螟稻2号质粒标准分子(中国生物工程杂志，2012)、转基因水稻华恢I号质粒分子(生物技术通报，2012)、转基因玉米NK603质粒分子(农业生物技术学报，2011 )、转基因大豆M0N89788质粒分子(中国专利，专利号201010106138)等等。但是，上述报道的质粒分子只能针对单一水稻转化体，而实践中当需要检测多种转基因水稻或检测对象不确定是哪种转化体时，就必须多次检测，既繁琐，且检测成本高，花费时间长。
技术实现思路
本专利技术的目的是构建一个可检测转基因水稻质粒标准分子，在转基因水稻筛选检测时，用其作为阳性对照品可检测多种转基因水稻，达到覆盖面积广，单次检测就可获得多重结果的目的。本专利技术通过分析我国转基因水稻的转化元件、标记基因等信息和分子特征，筛选出了检测覆盖率可达到98.5%的组合元件，包括？-...
【技术保护点】
一种定性检测多种转基因水稻的质粒标准分子，其特征是含有选自SEQ?ID?NO:3～SEQ?ID?NO:7中任意一个或几个核苷酸片段，且含有SEQ?ID?NO:8和SEQ?ID?NO:9中任意一个或两个核苷酸片段。
【技术特征摘要】
1.一种定性检测多种转基因水稻的质粒标准分子，其特征是含有选自SEQ ID NO:3~SEQ ID NO: 7中任意一个或几个核苷酸片段，且含有SEQ ID NO: 8和SEQ ID NO: 9中任意一个或两个核苷酸片段。2.权利要求1所述的质粒标准分子，含有SEQID N0:3~SEQ ID N0:9共7个核苷酸片段。3.权利要求1所述的质粒标准分子，含有SEQID NO:1和SEQ ID NO: 2的核苷酸片段。4.权利要求3所述的质粒标准分子，其特征是将以下核苷酸片段共同构建于载体: 1)选自SEQID N0:3~SEQ ID NO:7中任意连接顺序的一个或几个核苷酸片段，和 2)选自SEQID N0:8和SEQ ID NO:9中任意连接顺序的一个或两个核苷酸片段。5.权利要求4所述的质粒标准分子，所述共同构建是将I)和2)片段分别以平端克隆方式共同构建于pUC57-Amp载体的EcoRV位点。6.权利要求2~5中任一所述的质粒标准分子的构建方法，其特征是由下列5个引物对分别进行特异性扩增，并将扩增子进行融合得到SEQ ID N0:1:引物对 I:SEQ ID NO: 10 和 SE...
【专利技术属性】
技术研发人员：金芜军，
申请(专利权)人：中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：
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