一种定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶制造技术

本发明专利技术公开了一种定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：2所示。它是由氨基酸序列为SEQ?ID?NO：3所示的来源于谷氨酸棒杆菌ATCC13032的三磷酸胞苷合成酶进行定点突变改造得到，其第160位氨基酸由天冬氨酸突变成了谷氨酸，第162位氨基酸由谷氨酸突变成了丙氨酸，第168位氨基酸由谷氨酸突变成了赖氨酸。本发明专利技术所述的基因工程CTP合成酶大大降低了产物CTP对该酶的抑制，而且催化活力更加优良，为实现大规模生产CTP奠定了基础。

A site directed mutation of three cytidine phosphate synthetase

The present invention discloses a site directed mutation of a three cytidine phosphate synthetase, whose amino acid sequences, such as SEQ, ID, NO:2, are shown. It is composed of the amino acid sequence of SEQ? ID? NO:3 shown in Corynebacterium glutamicum ATCC13032 three cytidine triphosphate synthetase was transformation of site directed mutagenesis, its 160th amino acid mutation into glutamic acid, 162nd amino acid from glutamic acid mutation into alanine, 168th amino acid from glutamic acid mutation into lysine. The gene engineering CTP synthetase greatly reduces the inhibition of the product CTP to the enzyme, and has better catalytic activity, and lays the foundation for realizing large-scale production of CTP.

【技术实现步骤摘要】
一种定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶
本专利技术属于基因工程
，涉及一种定点突变方法制备具有耐受高浓度三磷酸胞苷(CTP)的三磷酸胞苷合成酶(CTP合成酶，简称CTPS)。
技术介绍
:胞嘧啶核苷三磷酸(CTP)是一种高能磷酸化合物，是嘧啶合成途径中非常重要的终产物。其参与机体细胞膜磷脂，卵磷脂等重要磷脂类化合物的合成代谢，也是合成DNA，RNA等重要物质前体。胞嘧啶核苷三磷酸合成酶(CTPs)在激活剂ATP，GTP，，Mg+及氨基供体(谷氨酰胺或者氨)等存在下，能以UTP为底物，生成CTP.反应方程式如下:

【技术保护点】
一种定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：2所示。

【技术特征摘要】
1.一种定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶，其氨基酸序列如SEQ ID N0:2所示。2.根据权利要求1所述的定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶，其特征在于，它是由氨基酸序列为SEQ ID N0:4所示的来源于谷氨酸棒杆菌ATCC13032的三磷酸胞苷合成酶进行定点突变改造得到，其第160位氨基酸由天冬氨酸突变成了谷氨酸，第162位氨基酸由谷氨酸突变成了丙氨酸，第168位氨基酸由谷氨酸突变成了赖氨酸。3.编码权利要求1所述的定点突变改造的三磷酸胞苷合成酶的基因，其特征在于其核苷酸序列如SEQ ID No:1所示。4.一种重组质粒，其包含了权利要求3所述的核苷酸序列。5.一种重组细胞，其包含...

【专利技术属性】
技术研发人员：应汉杰，朱梦珠，谢婧婧，孙梧进，王艳，郭亭，朱晨杰，陈勇，陈晓春，吴菁岚，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：