一种清除管路残留蛋白的生物洗涤剂的制备和使用方法技术

本发明专利技术提供了一种可有效清除管路残存蛋白质的生物洗涤剂制备及其使用方法，主要内容为，在pH2～3、温度30℃～40℃的盐酸溶液中加入胃蛋白酶，配置成生物洗涤剂，此时胃蛋白酶的催化活性最大，即水解蛋白质的能力最强。本发明专利技术步骤简单，使用快捷、方便，易于日常工作；且能快速、安全地清除试剂过滤装置烧结滤头分子筛微孔中和生物设备管路中残留的蛋白质成分。

Preparation and use method of biological detergent for removing residual protein in pipeline

The present invention provides a biological detergent preparation can effectively remove pipeline residual proteins and methods of use, the main content is that the addition of pepsin at pH2 ~ 3, the temperature of 30 DEG C to 40 DEG C in hydrochloric acid solution, configured as a biological detergent, the catalytic activity of pepsin, namely protein hydrolysate had the strongest ability. The method has the advantages of simple steps, quick and convenient use, easy daily operation, and fast and safe removal of the reagent filtrating device, and the residual protein components in the microporous molecular sieve pipe and the biological equipment pipeline are sintered.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医药
，具体涉及。
技术介绍
在生物医学、化学、药剂学等领域的工作中，溶剂过滤装置和生物样本测量设备是使用频率较高的仪器设备之一。溶剂过滤装置主要应用于溶剂分离、液体纯化、过滤等操作中；生物样本测量设备主要应用于生物样本、生物制剂的测量，他们的共同特点是都会接触生物样本。众所周知，生物样本中含有大量的蛋白质成分，蛋白质具有一定的空间结构有较强的吸附性，容易附着在试剂过滤装置烧结滤头不规则微孔内或生物设备管路的内壁上，并且堵塞孔径的蛋白质不易被去除。如果这些设备在使用后不能迅速清除残存的蛋白质，在日积月累的使用过程中就会越积越多，而且还会滋生各类细菌。轻者会降低溶剂过滤装置的使用效率、使生物样本测量设备吸液/放液不顺畅，严重时会堵塞烧结滤头的微孔使之无法正常使用、使生物样本测量设备测量结果不准确。因此，制备一种能有效清除蛋白质的生物洗涤剂对保证溶剂过滤装置和生物样本测量设备是十分必要的。目前，去除溶剂过滤装置管路残存蛋白质的方法有很多，如:“一种医疗器械用生物酶清洗剂及其制备方法”的专利公开了一种采用配制5种不同的生物酶清洗剂来清洗医疗器械的技术方案，其配方较复杂，使用步骤较繁琐，不适于日常工作。其他去除蛋白质的方法也有各种缺陷:比如应用活性炭吸附的原理去除蛋白质的方法不适用于溶剂过滤装置微孔和生物设备管路的清洗；利用弱酸清洗法去除蛋白质的效果不明显；利用弱碱清晰、超声波清洗等方法会对仪器设备的一些重要部件造成物理或化学损伤等。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种可有效清除微孔、管路残存蛋白质的生物洗涤剂制备方法及其使用方法。为实现上述目的，本专利技术的技术方案如下:一种可有效清除管路残存蛋白质的生物洗涤剂，通过以下步骤制得:步骤1.秤去一定量的去离子水，在30°C~40°C恒温环境下孵育30分钟；步骤2.往经步骤I处理后的去离子水中加入浓度为重量百分比为36%~38%的浓盐酸溶液，配制成0.01mol/L的盐酸溶液；步骤3.将步骤2制得的0.01mol/L的盐酸溶液搅拌3分钟后，放入30°C~40°C恒温环境下孵育待用；步骤4.向步骤3制得的0.01mol/L的盐酸溶液中加入胃蛋白酶试剂并搅拌5~6分钟，使溶液中胃蛋白酶的催化活性浓度达到800-1500U/L ；步骤5.将步骤4制得的生物洗涤剂放入30°C~40°C恒温环境下孵育，并在3小时内使用。所述步骤1、步骤3和步骤5中的孵育温度优选为36°C。所述步骤4中加入的胃蛋白酶试剂酶活力大于1200.0U/g。所述步骤4制得溶液中胃蛋白酶的催化活性浓度优选为1000U/L。一种使用上述生物洗涤剂去除烧结滤头分子筛微孔中蛋白质的方法，包括以下步骤:步骤I，将烧结滤头完全浸入盛有生物洗涤剂的烧杯中，将烧杯放入35°C~37 °C恒温水浴箱中孵育I~2小时；步骤2，取出烧结滤头用自来水冲洗3~4次，用去离子水浸泡I~2小时后，再用去尚子水冲洗6~8次晾干待用。一种使用上述生物洗涤剂去除生物样本测量设备管路中蛋白质的方法，包括以下步骤:步骤I，把预热到30°C~40°C的生物洗涤剂灌注到管路中，浸泡0.5小时~I小时； 步骤2，将管路中的生物洗涤剂排空，用去离子水冲洗管路6~8次。本专利技术具有以下有益效果:(1)能快速、安全地清除试剂过滤装置烧结滤头分子筛微孔中和生物设备管路中残留的蛋白质成分；(2)清除蛋白质效果明显；(3)对玻璃材质的烧结滤头无腐蚀性，不会影响到生物设备管路的完整性；(4)使用快捷、方便，易于日常工作；(5)可生物降解，属于环保生态型清洗液，稀释后可直接排入污水中。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术作进一步详细说明。胃蛋白酶是一种非限制性水解酶，其主要功能是水解各种生物大分子蛋白质中的肽键，使之生成各种小分子的游离肽甚至氨基酸残基，这些蛋白残基不易再次凝结、聚合形成蛋白附着物附着在管壁、微孔壁堵塞管路、微孔通路。胃蛋白酶等生物酶制剂在不同的温度、pH条件下催化活性不同，适宜的pH、温度会增加酶的活性。在pH2~3、温度30°C~45°C时胃蛋白酶的催化活性最大，即水解蛋白质的能力最强。另一方面，蛋白质本身具有两性电离特点，由于各类生物蛋白具有不同的等电点(pH多为5.0左右)，加入强酸时，蛋白质的解离会发生改变，以离子形式存在的蛋白质增加，在胃蛋白酶等水解酶作用下，这类蛋白质被水解的速度和量会明显增加，使胃蛋白酶溶解管壁、微孔壁残存蛋白的效果明显增强。易于以上原理，一种可有效清除管路残存蛋白质的生物洗涤剂，通过以下步骤制得:步骤1.在试剂瓶中加入约600ml去离子水后放入已加热到36°C的501型超级恒温器内孵育30分钟；步骤2.在1000ml的烧杯内加入0.5ml浓度为36%~38%的浓盐酸试剂，用A级容量瓶准确量取500ml已孵育好的去离子水轻轻贴壁倒入烧杯中，配制成0.01mol/L的盐酸溶液；步骤3.加入搅拌转子在81-2型恒温磁力搅拌器上混匀3分钟，放入已加热到36°C的501型超级恒温器中孵育待用；步骤4.用赛多利斯天平精确称量酶活力大于1200.0U/g的胃蛋白酶试剂4.5g~5.5g，溶解在预温至30°C~40°C的500mL 0.01mol/L的盐酸溶液中，加入搅拌转子在81_2型恒温磁力搅拌器上混匀5~6分钟；步骤5.将步骤4制得的生物洗涤剂放入已加热到36°C的501型超级恒温器中，3小时内使用。通过上述步骤制得的生物洗涤剂，去除烧结滤头分子筛微孔中蛋白质的方法，包括以下步骤:步骤1，将烧结滤头完全浸入盛有生物洗涤剂的烧杯中，将烧杯放入35°C~37°C恒温水浴箱中孵育I~2小时；步骤2，取出烧结滤头用自来水冲洗3~4次，用去离子水浸泡I~2小时后，再用去尚子水冲洗6~8次晾干待用。通过上述步骤制得的生物洗涤剂，去除烧结滤头分子筛微孔中蛋白质的方法，包括以下步骤:一种使用上述生物洗涤剂去除生物样本测量设备管路中蛋白质的方法，包括以下步骤:步骤I，把预热到30°C~40°C的生物洗涤剂灌注到管路中，浸泡0.5小时~I小时；步骤2，将管路中的生物洗涤剂排空，用去离子水冲洗管路6~8次。通过以上步骤制备的生物洗涤剂并按提出的清洗方法清洗过滤100ml混合血清使用的试剂过滤装置的烧结滤头分子筛微孔中残存的蛋白质后，采用瓦里安CarylOO紫外/可见分光光度计在(200nm~800nm)波长范围内分别测量清洗前后生物洗涤剂的吸收峰后，在不同波长下(280nm，260nm, 275nm)依次测量生物洗涤剂浸泡前后的吸光度值并计算差值，通过公式“蛋白质浓度(g/L) =1.45*A280-0.74*A26Q”计算出生物洗涤剂清除的分子筛微孔中的蛋白质含量(g/L)。为了与酸性洗液等一般清洗方式的清洗效果进行比较，同时采用酸溶液进行相同的处理和数据分析。将两种清洗方法的相关数据进行比较如下(见表1 )，通过清洗烧结滤头前后的生物洗涤剂吸光度测量结果和清洗烧结滤头前后的酸溶液吸光度测量结果，依据公式蛋白质浓度(g/L) =1.45*A28(1-0.74*A26(i可计算出蛋白质含量(g/L)。表1 结果 280nm 260nm 275nm 项 11___清洗烧结清洗前本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种可有效清除管路残存蛋白质的生物洗涤剂，通过以下步骤制得：步骤1.秤去一定量的去离子水，在30℃～40℃恒温环境下孵育30分钟；步骤2.往经步骤1处理后的去离子水中加入浓度为重量百分比为36%～38%的浓盐酸溶液，配制成0.01mol/L的盐酸溶液；步骤3.将步骤2制得的0.01mol/L的盐酸溶液搅拌3分钟后，放入30℃～40℃恒温环境下孵育待用；步骤4.向步骤3制得的0.01mol/L的盐酸溶液中加入胃蛋白酶试剂并搅拌5～6分钟，使溶液中胃蛋白酶的催化活性浓度达到800?1500U/L；步骤5.将步骤4制得的生物洗涤剂放入30℃～40℃恒温环境下孵育，并在3小时内使用。

【技术特征摘要】
1.一种可有效清除管路残存蛋白质的生物洗涤剂，通过以下步骤制得: 步骤1.秤去一定量的去离子水，在30°c~40°C恒温环境下孵育30分钟； 步骤2.往经步骤I处理后的去离子水中加入浓度为重量百分比为36%~38%的浓盐酸溶液，配制成0.01mol/L的盐酸溶液； 步骤3.将步骤2制得的0.01mol/L的盐酸溶液搅拌3分钟后，放入30°C~40°C恒温环境下孵育待用； 步骤4.向步骤3制得的0.01mol/L的盐酸溶液中加入胃蛋白酶试剂并搅拌5~6分钟，使溶液中胃蛋白酶的催化活性浓度达到800-1500U/L ； 步骤5.将步骤4制得的生物洗涤剂放入30°C~40°C恒温环境下孵育，并在3小时内使用。2.如权利要求1所述的一种可有效清除管路残存蛋白质的生物洗涤剂，其特征在于步骤1、步骤3和步骤5中的孵育温度为36°C。3.如权利要求1所述的一种可有效清除...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈宝荣，胡滨，邵燕，孙慧颖，李月玲，陈琦，
申请(专利权)人：北京航天总医院，
类型：发明
国别省市：