性控精液的分离方法技术

本发明专利技术涉及动物繁殖领域，特别涉及性控精液的分离方法，包括以下步骤：将原精通过40-60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；检测滤后精液的活力，得到活力为0.6-0.85的待染色滤后精液；将活力为0.6-0.85的待染色滤后精液进行染色，得到染色精液；将染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液。本发明专利技术提供的性控精液的分离方法，能够保证待染色滤后精液染色的均匀性和稳定性，进而利于将含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液高效的分离。此外，滤后精液不易出现堵塞流式细胞仪的喷嘴的现象，进而保证整个分离过程的顺畅进行。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及动物繁殖领域，特别涉及，包括以下步骤：将原精通过40-60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；检测滤后精液的活力，得到活力为0.6-0.85的待染色滤后精液；将活力为0.6-0.85的待染色滤后精液进行染色，得到染色精液；将染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液。本专利技术提供的，能够保证待染色滤后精液染色的均匀性和稳定性，进而利于将含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液高效的分离。此外，滤后精液不易出现堵塞流式细胞仪的喷嘴的现象，进而保证整个分离过程的顺畅进行。【专利说明】
本专利技术涉及动物繁殖领域，具体而言，涉及一种。
技术介绍
动物的性别控制(sex control)技术是通过对动物的正常生殖过程进行人为干预，使成年雌性动物产出人们期望性别后代的一门生物技术；具体的，该技术是利用动物的含有X染色体和含有Y染色体的精液中DNA含量的差异，借助特异性染色剂染色，然后根据发出的荧光强度，通过计算机判别精子类别，再通过给精液液滴附加电荷，根据静电原理，将含有X染色体的精液和Y染色体的精液分离，并选择性的应用于动物繁殖中。在相关技术中，将性控精液分离的方法中，常见的操作是直接将原精检测活力后染色，染色结束后分离；但是，由于原精中一般会含有较大的精子团以及一些杂物，这些精子团以及杂物常会导致原精染色不均匀，进而造成含有X染色体的精液和Y染色体的精液的分离效果不理想。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种，以解决上述的问题。本专利技术的实施例中提供的，包括:将原精通过40-60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；检测滤后精液的活力，得到活力为0.6-0.85的待染色滤后精液；将活力为0.6-0.85的所述待染色滤后精液进行染色，得到染色精液；将所述染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液。本专利技术的实施例提供的，在分离精液的过程中，将原精通过40微米-60微米过滤器过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液，然后活性检测、染色以及分离之后得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液，进而实现将原精分离的整个过程。由于原精在检测之前通过40微米-60微米过滤器过滤，40微米-60微米的过滤器可以将原精中含有的精子团以及杂物过滤掉，进而在后续染色的过程中，能够保证待染色滤后精液染色的均匀性和稳定性，进而利于将含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液高效的分离。此外，本实施例的这种，将原精通过40微米-60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物滤后精液，因此在后续分离的过程中，滤后精液不易出现堵塞流式细胞仪的喷嘴的现象，进而保证整个分离过程的顺畅进行。【专利附图】【附图说明】图1示出了本专利技术实施例一提供的的流程图；图2示出了本专利技术实施例二提供的的流程图。【具体实施方式】下面通过具体的实施例子并结合附图对本专利技术做进一步的详细描述。本专利技术的实施例中提供的，包括以下步骤，请参考图1:步骤101:将原精通过40-60微米过滤器进行第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；在步骤101中，通过40-60微米过滤器过滤可以实现将原精中的精子团及杂物过滤的效果，进而保证后续分离过程中的通畅性，优选的，可以选取50微米过滤器实现过滤的效果。步骤102:检测滤后精液的活力，得到活力为0.6-0.85的待染色滤后精液；滤后精液通过活力检测之后，选择活力为0.6-0.85的滤后精液，即得到待染色的滤后精液。步骤103:将活力为0.6-0.85的待染色滤后精液进行染色，得到染色精液；步骤104:将染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液。具体的，染色的温度控制在32°C _36°C之间，当待染色滤后精液处于32°C _36°C之间时，其活性较高，因此，在32°C _36°C的温度区间进行染色可以保证染色的效果。本专利技术的实施例提供的，在分离精液的过程中，将原精通过40-60微米过滤器过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液，然后活性检测、染色以及分离之后得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液，进而实现将原精分离的整个过程；由于原精在检测之前通过40-60微米过滤器过滤，40-60微米的过滤器可以将原精中含有的精子团以及杂物过滤掉，进而在后续染色的过程中，能够保证待染色滤后精液染色的均匀性和稳定性，进而利于将含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液高效的分离。此外，本实施例的这种，将原精通过40-60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液，因此在后续分离的过程中，滤后精液不易出现堵塞分离仪的现象，进而保证整个分离过程的顺畅进行。为了使得本专利技术实施例一的浮选方法得到更好的应用，更加有效应用到性控精液的分离工艺中，本专利技术还在上述实施例一的基础之上提供了实施例二，实施例二是在实施例一的基础上做出的进一步的限定和增加，现做详细的阐述和解释，请参考图2:实施例二步骤201:将原精通过40-60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；步骤202:吸取15-25微升滤后精液滴加在经过32°C _36°C预热的载玻片上保持0.5-1.5分钟后在200-400倍显微镜下观察滤后精液的活力；具体的，在检测活力的过程中，可以通过步骤202的操作进行；此外，在具体的测活的过程中，达到分离标准的精液可以活力为0.6-0.85，密度≥10亿/ml，为标准，对于密度6-8亿/ml之间的滤后精液，可以将其离心后使得密度达到分离的标准后进行染色操作。步骤203:将 Staining Talp 液和 49ffigg yolk Talp 液在 32°C _36°C 的温度下分别预热10-20分钟,得到预热后的Staining Talp液和预热后的4?:gg yolk Talp液；其中，每1000ml Staining Talp 液由 HEPES (40.0OmM) 9.520g> Magnesi u mChloride6-Hydrate crystal (0.40mM) 0.080g> Sodi u m Chloride (95.0OmM) 5.518g、Potassium Chloride (3.0OmM) 0.224g> Sodi U m Bicarbonate Di basic/Anhydrous(0.30mM)0.040g、Sodi u m Bicarbonate(10.00mM)0.840g>Pyruvic Acid(2.00mM)0.220g、Glucose (5.0OmM) 0.900g> Lactic Acid, 60%Syrup25.00(mM)3.610ml> Bovine SerumAlb V- min3.0OOg 配置而成；具体的配置方法包括:按上述数据准确称量所需试剂依次放入盛有该配液总量3/4的超纯水烧杯中充分溶解；溶解后用NaOH溶液将pH值调为7.40 ;将溶液完全移入体积相对应的容量瓶内，用超纯水反复冲洗烧杯内壁移入容量瓶填充至刻度后充分混匀；配置完毕后用灭菌后板式过滤器进行过滤灭菌；滤后液每1000毫升液添加庆大霉素针剂2.5本文档来自技高网...

【技术保护点】
性控精液的分离方法，其特征在于，包括以下步骤：将原精通过40?60微米过滤器第一次过滤，得到去除精子团及杂物的滤后精液；检测所述滤后精液的活力，得到活力为0.6?0.85的待染色滤后精液；将活力为0.6?0.85的所述待染色滤后精液进行染色，得到染色精液；将所述染色精液使用流式细胞仪分离，得到含有X染色体的精液和含有Y染色体的精液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：帅志强，苏冠宇，
申请(专利权)人：大连金弘基种畜有限公司，
类型：发明
国别省市：