本发明专利技术涉及一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌，其保藏编号为CCTCC?M?2013240。本发明专利技术还提供这种短小芽孢杆菌的应用以及以这种短小芽孢杆菌或其发酵液为活性成分的微生物制剂。本发明专利技术优点在于：本发明专利技术以紫色杆菌为筛选模型，利用“T”型划线法和滤纸片法筛选出一株能够抑制紫色杆菌紫色色素产生的菌株F3-1，试验结果表明菌株F3-1能够抑制紫色杆菌的QS信号分子，具有抑制细菌群体感应的作用，可用于制备防治水产细菌性病害的微生物制剂，为进一步从干扰细菌群体感应系统的角度研究防治水产细菌性病害的新方法奠定了基础。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌，其保藏编号为CCTCC?M?2013240。本专利技术还提供这种短小芽孢杆菌的应用以及以这种短小芽孢杆菌或其发酵液为活性成分的微生物制剂。本专利技术优点在于：本专利技术以紫色杆菌为筛选模型，利用“T”型划线法和滤纸片法筛选出一株能够抑制紫色杆菌紫色色素产生的菌株F3-1，试验结果表明菌株F3-1能够抑制紫色杆菌的QS信号分子，具有抑制细菌群体感应的作用，可用于制备防治水产细菌性病害的微生物制剂，为进一步从干扰细菌群体感应系统的角度研究防治水产细菌性病害的新方法奠定了基础。【专利说明】一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂
本专利技术涉及微生物领域，具体地说，是一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂。
技术介绍
细菌性疾病一直是困扰水产养殖业发展的重要原因之一。近年来，高密度集约化的生产模式在促进水产业提高产量的同时，也使得细菌疾病发生的机会增大、频率增加、危害加大；此外，抗生素使用导致的耐药性、药物残留以及对生态环境的破坏也成为社会关注的焦点。因此，寻找抗生素的替代药物、探索新的防治方式已经成为水产病害防治研究重要方向之一。群体感应(Quorum sensing,简称QS)是指细菌能自发产生并释放一些特定的信号分子，感知自身浓度的变化，进而调控相关基因的表达。目前，调节细菌群体感应的信号分子主要有三种，(a)N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)，是广泛存在于革兰氏阴性细菌中的群体感应的信号分子；(b)自体诱导肽(Autoinducing peptides, AIP), AIP是一类短肽分子，是革兰氏阳性细菌中常 见的信号分子；(c)自体诱导物II类分子(Auto inducing II,AI2)，是以费氏弧菌Rikio fischeri)为代表的由IuxS酶催化的Al 2系统的信号分子。研究表明，在革兰氏阴性细菌中，如铜绿假单胞菌iPseudomonas aeruginosa )、嗜水气单胞菌(Aeromorms hydrophila)等，其生物被膜形成、有害毒素产生、致病因子释放等行为均受到AHLs类信号分子的调节。Dong (2000)等人在腊样芽孢杆菌cerem)中发现了 aiiA基因，能够合成AHLs信号分子降解酶，阻断QS信号分子在细菌间的传递；尹守亮等(2009)从胶州湾海域筛选出一株能够降解AHLs信号分子的真菌，表明海洋微生物也可以作为QS抑制剂的潜在研究对象；Bhavanath等(2013)发现紫杉状海门冬(AsAaragoAsistaxiformis)的粗提物能够降解AHLs信号分子,并且对铜绿假单胞菌生物膜有一定的抑制作用。Defoirdt等(2011)首次从南美白对虾和海水鲈鱼等水产动物的肠道中分离出了能够抑制哈氏弧菌、Vibrio harveyi) QS信号分子传递的芽孢杆菌，Natrah等(2011)分离出一株能够抑制AHLs信号分子的微藻，该微藻能够阻断哈氏弧菌QS系统，降低其致病力。这些研究为探讨从群体感应角度防控水产细菌性疾病提供了理论依据和科学数据的支撑。芽孢杆菌iBcaillus sp)具有易生产、便运输、耐储藏等特点，在水产养殖上可以起到净化水质、防治疾病和促进生长等作用，是常用的益生微生物菌株。因此，筛选能够抑制AHLs信号分子的芽孢杆菌，并应用于水产养殖业上，必将有着广阔的前景。紫色杆菌(CAroffioAacieria violacoumH一种革兰氏阴性菌，其色素的表达受群体感应AHLs信号分子严格调控，一旦信号分子被抑制，紫色便会褪去。因此，紫色杆菌常用作群体信号分子降解物质筛选的指示菌株。但是关于一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂目前还未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌。本专利技术的第二个目的是，提供一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌的应用。本专利技术的第三个目的是，提供一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂。本专利技术的第四个目的是，提供一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是:一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌，所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC M2013240。为实现上述第二个目的，本专利技术采取的技术方案是:所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌在防治水产细菌性病害中的应用。所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌用于制备防治水产细菌性病害的微生物制剂。所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌抑制细菌群体感应。为实现上述第三个目的，本专利技术采取的技术方案是:一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂，所述的微生物制剂以所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌为活性成分。为实现上述第四个目的，本专利技术采取的技术方案是:一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌微生物制剂，所述的微生物制剂以权利要求1所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌的发酵液为活性成分。本专利技术优点在于: 本专利技术以紫色杆菌为筛选模型，利用“T”型划线法和滤纸片法筛选出一株能够抑制紫色杆菌紫色色素产生的菌株F3-1，试验结果表明菌株F3-1能够抑制紫色杆菌的QS信号分子，具有抑制细菌群体感应的作用，可用于制备防治水产细菌性病害的微生物制剂，为进一步从干扰细菌群体感应系统的角度研究防治水产细菌性病害的新方法奠定了基础。【专利附图】【附图说明】图1.“T ” 型划线培养；注:1(X93) ;2(F3-1) ;3(X77) ;4(F6-5)，5(X 3914);6 (F6-4) ;7(F3-2)。图2.滤纸片扩散法；注:1(F3-1) ； 2 (X77) ； 3(X3914) ； 4(F6_4)；5(F6-5) ； 6(F3-2) ； 7(x93)。图3.菌株F3-1蛋白粗提液对紫色色素产生的抑制；注:1 (蛋白酶K);2 (青霉素)；3 (蒸馏水)；4 (粗提蛋白)。图4.菌株F3-1粗提物对紫色色素的抑制作用。图5.不同浓度的菌株F3-1粗提物对紫色色素作用的OD585值。图6.菌株F3-1的16S rDNA电泳图。图7.F3-1 16Sr DNA序列的系统发育树。图8.菌株F3-1扫描电镜图片4000倍。【具体实施方式】下面结合实施例对本专利技术提供的【具体实施方式】作详细说明。实施例1.材料与方法 1.1材料 1.1.1菌种与活化 紫色杆菌(ChromobacteriIim购买自美国ATCC ;芽抱杆菌菌株X77、X93、X3914为本实验室保存。将冻干粉保藏的紫色杆菌转接于5ml的LB液体培养基中，26°C培养24h ;再取ImL菌液转移到5mL LB液体培养基中26°C培养24h;用接种环占取菌液在LB平板中划线分离，挑取单个紫色菌落在LB斜面上划线保存以备用。1.1.2培养基与试剂 营养琼脂培养基(购买自上海鼎国)，LB培养基(购买于上海生工)；细菌基因组抽提试剂盒(购买于上海生工);PCR试剂:Master Mix 2x，通用引物1492r、27f，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌，其特征在于，所述的具有群体感应系统抑制作用的短小芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC?M?2013240。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：宋增福，范斌，陈彪，
申请(专利权)人：上海海洋大学，
类型：发明
国别省市：
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