用于他汀引发的肌肉毒性的灵敏检测的生物标志物制造技术

本发明专利技术特别提供了通过检测生物样品的脂质浓度或脂质比率并将其与对照比较从而预测他汀引发的肌肉毒性或其并发症(例如肌痛、肌病和横纹肌溶解)的方法，以及所述方法的应用。所述方法已经鉴定出在检测这些他汀引发的肌肉毒性方面比当前应用的临床标志物更具特异性和灵敏度的脂质标志物。本发明专利技术还提供了针对所述脂质的抗体，以及所述抗体在预测、诊断他汀引发的肌肉毒性中的应用。本发明专利技术另外涉及包含脂质和/或其抗体的试剂盒，所述试剂盒用于预测和/或诊断他汀引发的肌肉毒性。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于他汀引发的肌肉毒性的灵敏检测的生物标志物
本专利技术涉及预测或诊断他汀引发的肌肉毒性的涉及脂质水平的方法和应用。本专利技术特别适用于确定受试对象是否需要调整他汀治疗和用于评估新降脂药引起的肌肉毒性。所述方法包括分析生物样品的脂质水平，并将其与对照比较。
技术介绍
他汀目前是最广泛使用的降脂药，这是因为他汀将不同患者群的严重心血管端点事件(心血管死亡、心肌梗塞和中风)降低了 25%至35%。这些群体包括患有稳定或不稳定的冠心病、糖尿病的群体和带有其他风险因素的高血压患者。通常，虽然会发生肌肉、肝脏和胃肠道的副作用，但他汀耐受良好。他汀可与多种肌肉副作用相关联，从非特异性或非典型的肌痛到肌病和晚期横纹肌溶解综合征。将肌痛定义为肌肉疼痛或肌肉酸痛的不适，其可以是全身性的，或者是局部的。这种症状可在高达10%的患者中发生，可迫使医师降低剂量、采用试错法更换为其他他汀或完全终止药物治疗。这些肌肉症状也可以导致相对高比例的患者在治疗的头2年中停止他汀治疗。因此，甚至更多的良性肌肉症状可具有重要后果并限制了这些药剂所可能带来的较大临床和社会经济效益。肌病虽然危害小于横纹肌溶解，但还能够在他汀治疗之后发生，其被定义为肌肉疼痛和/或衰弱，肌酸激酶(CK)水平比正常上限升高至少10倍。肌病的发病率为约1%至5%。他汀相关的肌肉毒性的已知的诱病风险因素包括肾功能不全、甲状腺机能减退、遗传性或获得性肌肉疾病、其他他汀或贝特类药物(fibrate)引起的肌肉毒性的病史、纤维酸(fibric acid)衍生物的同时使用、酒精滥用、可能发生他汀血浆水平升高的临床情况以及亚洲血统(Asian ancestry)。横纹肌溶解是罕见事件(远低于0.1%的他汀使用者)，但构成了威胁生命的病况，特征为严重的肌肉毒性、血浆肌酸激酶(CK)水平的大幅升高(超过10，000U/L)和肌红蛋白毒性继发的肾功能不全。横纹肌溶解已引起了数例患者死亡并且已经导致一种他汀西立伐他汀(Bayco I，Bayer)的撤市。另一种HMG-CoA还原酶抑制剂辛伐他汀(Zocor’Merck&C0.)在以高剂量施用时(A至Z试验)最近也显示出使横纹肌溶解的发病率升高。目前，采用血浆/血清肌酸激酶(CK)测定作为他汀引发的肌肉毒性的生物标志物。对于大多数病例，即使出现了症状，CK测定仍然不能提供充分信息。血浆/血清CK是非特异性标志物，这是因为其可由于包括锻炼在内的多种其他原因而升高。更大的局限是其灵敏度差，因为其仅在涉及CK从组织渗漏到血浆中的对肌肉细胞的实际损害发生后才给出提示。因此，对于这一问题理所当然需要开发用于诊断他汀引发的肌肉毒性的新的生物标志物。在组织病理学研究中对于从急性肌肉疼痛期间患者获得的肌肉试样的早期石开究(Phillips PS 等:“Statin-associated myopathy with normal creatine kinaselevel.’’Ann Intern Med.2002octl; 137 (7): 581-5)已经例如证明 了炎性细胞的累积。人体内脂质介体的数量很多。已经尝试通过质谱法和脂质生物化学的进展来辅助对这些介体的鉴定和定量，现在能够同时对统称为脂质组的数个脂质类别中的数百种分子脂质物质进行高通量鉴定和定量(Ejsing CS,等:Global analysisof the yeast lipidome by quantitative gunshot mass spectrometry.Proc NatlAcad Sci U S A2009,106:2136-2141;Stahlman M,等:High-throughput gunshotlipidomics by quadrupole time-of-flight mass spectrometry.J Chromatogr BAnalyt Technol Biomed Life Sci2009Hiukka A,等:ApocII1-enriched LDL intype2diabetes displays altered lipid composition, increased susceptibility forsphingophosphase, and increased binding to biglycan.Diabetes2009, 58:2018-2026;Linden D,等:Liver-directed overexpression of mitochondrial glycero 1-3-phosphateacyItransferase results in hepatic steatosis, increased triacylglycerolsecretion and reduced fatty acid oxidation.FASEB J2006, 20:434-443.)。脂质组学研究已经试图鉴定脂质细胞分布并描述其生物化学机理、相互作用和动力学。脂质组学原则上能够对脂质组的确切化学组成进行定量(Han X, Gross Rff:Global analyses ofcellular lipidomes directly from crude extracts of biological samples by ESImass spectrometry:a bridge to lipidomics.J Lipid Res2003, 44:1071-1079)。现有技术中大量脂质数据表示了总和组成形式的脂质，即，磷脂酰胆碱(PC) 34:1 (Brugger B,等:Quantitative analysis of biological membrane lipidsat the low picomole level by nano-electrospray ionization tandem massspectrometry.Proc Natl Acad Sci U S A1997, 94:2339-2344),其中分子脂质和所连接的脂肪酸尾仍未被鉴定。分子脂质物质的鉴定，例如PC16:0/18:1 (Ekroos K,等:Chartingmolecular composition of phosphatidylcholines by fatty acid scanning and iontrap MS3fragmentation.J Lipid Res2003, 44:2181-2192)是高级脂质组学中的主要特征，其给出了高分辨的分子脂质物质，而不是总的脂肪酸信息。例如，揭示了脂肪酸种类及其与构成具体PC分子的甘油骨架的连接位置的信息。已有如薄层色谱结合气相色谱等常规技术，但这些常规技术不仅需要相当大的样品量和费力的样品制备，它们还不能给出分子脂质物种。虽然多种质谱技术能够表征脂质实体，但其中大多数技术在绝对或接近绝对浓度方面仍不能给出可靠的高质量定量数据。需要用于检测和诊断他汀引发的肌肉毒性的特异性且可靠的方法，以及用于这方面的标志物。还需要改进他汀或降脂药的现有的治疗方案。
技术实现思路
本专利技术特别提供本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于确定受试对象是否罹患或有风险发展他汀引发的肌肉毒性和/或一种或多种其并发症的方法，所述方法包括: (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，与对照相比时所述样品中的浓度升高或降低表明所述受试对象罹患所述他汀引发的肌肉毒性和/或所述并发症，其中与所述对照相比其浓度升高的一种或多种脂质选自:12-HETE、15-HETE、PE P-18:0/20:4、PE 0-18:1/20: 4、LacCer(dl8:1/22:O)和Cer(dl8:1/18:0)； 并且其中与所述对照相比其浓度降低的一种或多种脂质选自:5-HETE 和 8_9-DHET ； (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质比率，其中，与对照相比时所述样品中的脂质比率升高或降低表明所述受试对象罹患所述他汀引发的肌肉毒性和/或所述并发症，其中与对照相比升高的一种或多种脂质比率选自:12-HETE/5-HETrE、12-HETE/5-HETE、12-HETE/CE20:4、12-HETE/15_HETrE、12-HETE/LPC16:0、15-HETE/8_9-DHET、12-HETE/CK、13-H0DE/8_9-DHET 和 15-HETE/15_HETrE ； 并且其中与所述对照相比降低的一种或多种脂质比率选自:Il_12-DHET/Cer(dl8:1/16:O)、5-HETE/CE18:2、8_9_DHET/CE18: 1、8_9_DHET/LacCer(dl8:1/16:0)、5-H ETE/9-H0DE、8_9_DHET/Glc/GalCer(dl8:1/18:0),5-HETE/Cer(dl8:1/18:0)、8_9_DHET/Cer(dl8:1/24:1)、11-HETE/12-HETE 和 8_9_DHET/Cer (dl8:1/18:0);或 (c)确定来自所述受试对象的样品中的脂质标志物组合中的一种或多种脂质浓度和一种或多种脂质比率，其中所述脂质标志物组合包括权利要求1的(a)中的至少一种脂质和权利要求1的(b)中的至少一种脂质比率， 其中与对照相比时所述样品中所述脂质的浓度升高或降低和/或所述脂质比率的升高或降低表明所述受试对象罹患所述他汀引发的肌肉毒性和/或所述并发症。2.一种用于确定受试对象的他汀和/或降脂药治疗是否需要调整的方法，所述方法包括 (a)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质的浓度，其中，与对照相比时所述样品中的浓度升高或降低表明所述治疗需要调整， 其中与对照相比其浓度升高的一种或多种脂质选自: 12-HETE、15-HETE、PE P-18:0/20:4、PE 0-18:1/20:4、LacCer(dl8:1/22:O)和Cer(dl8:1/18:0)； 并且其中与对照相比其浓度降低的一种或多种脂质选自:5-HETE 和 8_9-DHET ； (b)确定来自所述受试对象的样品中的一种或多种脂质比率，其中，与对照相比时所述样品中的脂质比率升高或降低表明所述治疗需要调整， 其中与对照相比升高的一种或多种脂质比率选自:12-HETE/5-HETrE、12-HETE/5-HETE、12-HETE/CE20:4、12-HETE/I5-HETrE,12-HETE/LPC16:0、15-HETE/8_9-DHET、12-HETE/CK、13-H0DE/8_9-DHET 和 15-HETE/15_HETrE ； 并且其中与对照相比降低的一种或多种脂质比率选自:Il_12-DHET/Cer(dl8:1/16:0)、5-HETE/CE18:2、8_9_DHET/CE18: 1、8_9_DHET/LacCer(dl8:1/16:0)、5-HETE/9-HODE、8_9_DHET/Glc/GalCer(dl8:1/18:0),5-HETE/Cer(dl8:1/18:0)、8_9_DHET/Cer(dl8:1/24:1)、11-HETE/12-HETE 和 8_9_DHET/Cer (dl8:1/18:0);或 (c)确定来自所述受试对象的样品中的脂质标志物组合中的一种或多种脂质浓度和一种或多种脂质比率，其中所述脂质标志物组合包括权利要求1的(a)中的至少一种脂质和权利要求1的(b)中的至少一种脂质比率， 其中与对照相比时所述样品中所述脂质的浓度升高或降低和/或所述脂质比率的升高或降低表明所述治疗需要调整。3.如权利要求2所述的方法，其中，所述他汀和/或降脂药治疗的调整包括， (a)他汀剂量的减少； (b)他汀治疗的停止； (C)他汀治疗的重新开始； (d)更换为不同的他汀药； (e)更换为不同的降脂药；或 (f)因与一种或多种他汀相互作用而导致肌肉毒性的另一种药治疗的停止。4.如权利要求1所述的方法，其中，所述方法用于评估正接受新型他汀或脂质降低药物治疗的受试对象中由所述他汀或脂质降低药物引起的肌肉毒性的程度。`5.如权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述方法用于 (a)确定所述受试对象中肌肉毒性的早期警示征兆，和/或 (b)确定受试对象中发现的肌肉毒性的症状是否由他汀引发的肌肉毒性引起。6.如前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法包括确定 (a)所述脂质浓度和/或脂质比率中的至少2种、至少3种、至少4种或至少5种；和/或 (b)与对照相比任何以下脂质组合中的脂质的浓度有以下改变:(i)升高:15-HETE、Cer(dl8:1/18:0)、Ce...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·拉克松恩，K·埃克罗斯，R·霍尔姆，M·詹尼斯，R·卡塔恩，K·塔拉索夫，
申请(专利权)人：佐拉生物科学公司，
类型：
国别省市：