抗-IL-6受体抗体及其使用方法技术

本发明专利技术提供了抗IL-6R单克隆抗体及相关的组合物，其可用于治疗风湿性关节炎及其他疾病的多种治疗方法中的任何一种。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗-1L-6受体抗体及其使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2011年3月3日提交的美国临时申请号61 / 449，005的优先权，其全部内容通过引用并入本申请。关于序列表的声明与本申请附带的序列表以文本格式替代纸质副本，并通过引用并入说明书。包含序列表的文本文件的名称为APEX_012_01W0_ST25.txt。该文本文件于2012年2月28日创建，大小为53KB，通过EFS-WEB以电子形式提交。背景
本专利技术主要涉及抗IL-6受体(IL-6R)抗体，及其组合物和使用方法。更特别地，本专利技术涉及抗IL-6R抗体及其制备方法和用途。这些抗体可用于，例如，治疗多种炎性和癌症疾病的方法。相关技术的描述白细胞介素-6(IL_6)是一种多功能细胞因子，其在宿主的防御机制中起着核心作用。Heinrich 等，Biochem.J.(1990) 26.5:621 ；Van Snick, J.Annu.Rev.Tmmunol.(1990)8:253 ;以及 Himno 等，Immunol.Today (1990) 11:443。然而，在多种人类炎症、自身免疫、肿瘤疾病中，可观察到IL-6产生异常，并且这已被认为在这些疾病的发病机制中发挥作用。Hirano 等，同上；Sehgal, P.B.，Proc.Soc.Exp.Biol.Med.(1990) 195: 183 ；Grau, G.E., Eur.Cytokine Net (1990) 1:203 ；Bauer 等，Ann.Hemato 1.(1991)62:203 ； Campbe 11等，J，Clin，Invest (1991) 7:739 ;和 Roodman 等，J.Clin.1nvest.(1992)89:46。因此，IL-6的生物活性抑制剂可能有助于研究IL-6在疾病中的作用，并可能具有广泛的治疗应用。IL-6是由T细胞，B细胞，单核细胞，成纤维细胞，角质形成细胞，内皮细胞，系膜细胞和多种肿瘤细胞系产生。通过增强IL-2受体的表达和IL-2的产生，IL-6诱导T细胞生长和细胞毒性T细胞分化。IL-6与IL-3协同作用，以支持造血作用中多向母细胞集落的形成，并诱导巨噬细胞，巨核细胞和破骨细胞的分化。在急性期反应中，IL-6刺激肝细胞产生急性期蛋白，如C-反应蛋白(CRP)，纤维蛋白原，α 1-抗胰蛋白酶和血清淀粉样蛋白A。体内给药时，IL-6也会引起白细胞增多和发热，并可作为肾小球系膜细胞、表皮角质形成细胞，以及，例如，浆细胞瘤、多发性骨髓瘤，和肾细胞癌中不同类型的肿瘤细胞的生长因子。脓毒症也涉及IL-6 的过度产生(Starnes, Jr.，H.F.等，J.1mmunol.(1990) 145:4185)，并且在多发性骨髓瘤，或浆细胞白血病(Klein, B.Blood (1991) 78:1198)也涉及IL-6过度产生。其他疾病包括骨吸收(骨质疏松症)(Roodman，G.D.等，J.，Clin，Invest.(1992)89:46 Jilka, R.L 等，Science (1992) 257:88-91)、恶病质(Strassman, G.等，J.Clin.1nvest.(1992)89:1681)、牛皮癣、全身型青少年特发性关节炎、系统性红斑狼疮、系膜增生性肾小球肾炎、肾细胞癌、卡波济氏肉瘤、类风湿关节炎(Eur.J.1mmunol.18，1797-1801,1988 ；Arthritis Rheum.31,784-788, 1988 ；Ann.Rheum.Dis.52, 232-234，1993)、高 Y 球蛋白血症(Grau，G.E.et al.,J.Exp.Meal.(1990) 172:1505)、卡斯特莱曼病(Castleman’s disease)、IgM丙种球蛋白病、心脏粘液瘤和自身免疫性胰岛素依赖型糖尿病(Campbell, 1.L et al., J,Clin, Invest.，(1991)87:739)。大鼠抗小鼠 IL-6R抗体阻止DBA / IJ小鼠中胶原诱导的关节炎(CIA)的发展，并且在猴CIA模型中，抗人IL-6抗体对预防和治疗均有效。这些证据表明IL-6在关节炎的发病机制中起着至关重要的作用，并支持这些动物模型可用于关节炎，以及抗IL-6或IL-6R治疗效果的研究(Arthritis Rheum.41,2117-2121，1998 ;Clin Immunol.2001Mar ；98(3):319-26 ;Biol Pharm Bull.2008Jun ；31(6):1159-63)。IL-6通过与IE细胞表面至少两个特异性受体的相互作用而发挥作用。Taga等，J.Exp.Med.(1987) 166:967 ;和 Coulie 等，Eur.J.1mmunol, (1987) 17:1435。这两种受体链的cDNA已被克隆，它们编码两个跨膜糖蛋白:80kDa的IL-6受体“IL-6R”和130kDa的糖蛋白 “gpl30，，。Yamasaki 等，Science (1988) 241:825 ;和 Hibi 等，Cell (1990)63:1149。IL-6通过独特的机制与这些糖蛋白相互作用。首先，IL-6R与IL-6以低亲和力(Kd值=约InM)结合，并且不触发信号。Taga等，Cell (1989) 58:573。随后，IL-6 / IL-6R复合体与gpl30结合，这将传导信号。Hibi等，同上；和Taga等，同上。在溶液中，gpl30本身与IL-6没有亲和力，但它能在膜上稳定IL-6 / IL-6R复合体，从而产生高亲和力的IL-6结合(Kd值=约IOpM)。Hibi等，同上。最近发现gpl30也是制瘤素M的低亲和力受体，以及LIF受体的亲和力转换物(Gearing, D.P.等，Science (1992) 255:1434)。中和IL-6活性的一种方法是利用特异性结合IL-6的抗体。根据对IL_6分子上两个不同表位的识别，针对IL-6的中和单克隆抗体(Mab)可被分为两组，所述不同表位被指定为位点I和位点II。位点I是构象表位，其由IL-6分子的氨基末端和羧基末端组成:氨基末端部分包括氨基酸Ile3crAsp35 ;而羧基末端部分包括关键氨基酸Arg183-Met18515位点II包括关键氨基酸 Ala154_Thr163。Brakenhoff 等(1990, J.1mmunol.145:561-568)。中和IL-6的活性的另一种方法是通过结合并阻断IL-6R，抑制配体-受体相互作用。本专利技术提供了如本申请中进一步描述的所述及其它优点。专利技术概述本申请一方面提供了一种分离的抗体，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，包括(i)重链可变区，所述重链可变区包括与SEQ ID NO:3的氨基酸残基相同的VHCDRl区、与SEQ ID NO:4的氨基酸残基相同的VHCDR2区、和与SEQ ID NO:5的氨基酸残基相同的VHCDR3区；以及(ii)轻链可变区，所述轻链可变区包括与SEQ ID NO:6的氨基酸残基相同的VLCDRl区、与SEQ ID NO:7的氨基酸残基相同的VLCDR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.03.03 US 61/449,0051.一种分离的抗体，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，包括(i)重链可变区，所述重链可变区包括SEQ ID NO:3所示的VHCDRl区、SEQ ID NO:4所示的VHCDR2区、和SEQID NO:5所示的VHCDR3区；以及(ii)轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID N0:6所示的 VLCDRl 区、SEQ ID NO:7 所示的 VLCDR2 区、和 SEQ ID NO:8 所示的 VLCDR3 区； 或者所述抗体的变体，或其抗原结合片段，其包括与(i)和(ii)所述重链和轻链可变区相同的重链和轻链可变区，但是在所述CDR区有至多8个氨基酸替换。2.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链可变区包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。3.根据权利要求1所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述轻链可变区包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。4.一种分离的抗体，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，包括重链可变区，所述重链可变区包括SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。5.根据权利要求4所述的分离的抗体或其抗原结合片段，包括轻链可变区，所述轻链可变区包括与SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列。6.根据权利要求4所述的分离的抗体或其抗原结合片段，包括轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。7.一种分离的抗体 ，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，包括轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。8.根据权利要求7所述的分离的抗体或其抗原结合片段，包括重链可变区，所述重链可变区包括与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列。9.一种分离的抗体，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，包括(i)重链可变区，所述重链可变区包括SEQ ID NO:13所示的VHCDRl区、SEQ ID NO:14所示的VHCDR2区、和SEQID NO:15所示的VHCDR3区；以及(ii)轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID NO: 16所示的 VLCDRl 区、SEQ ID NO:17 所示的 VLCDR2 区、和 SEQ ID NO:18 所示的 VLCDR3 区； 或者所述抗体的变体，或其抗原结合片段，其包括与(i)和(ii)所述重链和轻链可变区相同的重链和轻链可变区，但是在所述CDR区有至多8个氨基酸替换。10.根据权利要求9所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述重链可变区包括SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列。11.根据权利要求9所述的分离的抗体或其抗原结合片段，其中所述轻链可变区包括SEQ ID NO: 12所示的氨基酸序列。12.—种分离的抗体，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，其包括重链可变区，所述重链可变区包括SEQ ID NO: 11所示的氨基酸序列。13.根据权利要求12所述的分离的抗体或其抗原结合片段，包括轻链可变区，所述轻链可变区包括与12所示的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列。14.根据权利要求12所述的分离的抗体或其抗原结合片段，包括轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID NO: 12所示的氨基酸序列。15.一种分离的抗体，或其抗原结合片段，其与人IL-6R结合，其包括轻链可变区，所述轻链可变区包括SEQ ID NO: 12所示的氨基酸序列。16.根据权利要求15所述的分离的抗体或其抗原结合片段，包括重链可变区，所述重链可变区包括与SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列具有至少90%同一性的氨基酸序列。17.根据权利要求1或权利要求9所述的分离的抗体，其中所述抗体为人源化的。18.根据权利要求17所述的分离的抗体，其中所述VH区包括SEQID NO:9所示的氨基酸序列，并且所述VL区包括SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列。19.根据权利要求17所述的分离的抗体，其中所述VH区包括SEQID NO:19所示的氨基酸序列，并且所述VL区包括SEQ ID NO:20所示的氨基酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：李森伟，柯耀煌，张永克，
申请(专利权)人：埃派斯进有限公司，
类型：
国别省市：