本发明专利技术涉及一种NGR多肽放射性药物及其制备方法与应用。目前已报道的放射性核素标记的含有NGR序列具有较高的肝脏摄取。本发明专利技术的NGR多肽放射性药物为NGR环肽的单体和二聚体与螯合剂NOTA连接形成配合物，通过NOTA螯合放射性核素而形成放射性药物，NGR多肽的靶向作用使药物浓聚到肿瘤部位，利用核医学正电子发射计算机断层显像技术，对CD13阳性肿瘤进行显像，达到特异诊断目的。本发明专利技术选择NOTA作为双功能螯合剂螯合放射性核素，以p-SCN-Bn作为连接剂将NGR直接连接到NOTA的碳骨架上，从而避免了连接剂与NOTA羧基连接导致影响羧基氧原子与放射性核素配位；从体内的代谢来看，药物注入体内能迅速经肾脏代谢，肝脏摄取更低。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种NGR多肽放射性药物及其制备方法与应用。目前已报道的放射性核素标记的含有NGR序列具有较高的肝脏摄取。本专利技术的NGR多肽放射性药物为NGR环肽的单体和二聚体与螯合剂NOTA连接形成配合物，通过NOTA螯合放射性核素而形成放射性药物，NGR多肽的靶向作用使药物浓聚到肿瘤部位，利用核医学正电子发射计算机断层显像技术，对CD13阳性肿瘤进行显像，达到特异诊断目的。本专利技术选择NOTA作为双功能螯合剂螯合放射性核素，以p-SCN-Bn作为连接剂将NGR直接连接到NOTA的碳骨架上，从而避免了连接剂与NOTA羧基连接导致影响羧基氧原子与放射性核素配位；从体内的代谢来看，药物注入体内能迅速经肾脏代谢，肝脏摄取更低。【专利说明】—种NGR多肽放射性药物及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种肿瘤诊断放射性药物，具体涉及一种NGR多肽放射性药物及其制备方法与应用。
技术介绍
肿瘤的生长和转移依赖于新生血管的形成，如果没有血管系统提供氧气和养料，实体瘤的增长不会超过I _3，阻断新生血管形成可以抑制肿瘤生长，导致肿瘤的缩小和减退，利用新生血管表面特异性表达的标志物如ανβ3、ανβ 5整合素、血管内皮生长因子受体VEGFR、氨肽酶N (CD13)为靶点开发肿瘤靶向治疗药物是肿瘤靶向治疗的重要策略。有效监测肿瘤新生血管生成、筛选相关药物敏感人群、早期客观评价药物疗效是临床亟待解决的问题，因此与靶向治疗密切相关的肿瘤新生血管分子显像做为有效的影像学手段是研究热点，找到与治疗相关的靶向性好、生物分布理想的分子探针是显像成败的关键。体内噬菌体展示技术发现的天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸(NGR)多肽可以与新生血管内皮细胞结合，其受体是细胞表面的氨肽酶N(CD13)。它主要表达在肿瘤的新生血管内皮细胞表面和部分肿瘤细胞表面，在正常的处于静止状态的血管内皮细胞上很少表达。⑶13是一种膜结合的金属肽酶，具有多种功能，如调节各种激素和细胞因子的表达，蛋白质降解、抗原呈递、细胞增殖、细胞迁移和血管生成等。研究表明正常血管内皮细胞上的CD13表达未被激活，但是在肿瘤微环境中，血管生成信号可以引起血管内皮上⑶13的高表达。研究发现NGR多肽可以将多种肿瘤治疗药物和病毒载体靶向运输到肿瘤新生血管处，如阿霉素(D0X)、肿瘤坏死因子TNF、干扰素(IFN)、慢病毒载体以及腺病毒载体等。放射性核素标记的NGR多肽显像目前报道不多，前期有用188Re和99mTc标记进行SPECT显像者。目前已经报道的放射`性核素标记的含有NGR序列的示踪剂有，锝_99m (99mTc)和铜-64 (64Cu)标记的NGR单体和二聚体。99mTc标记NGR的方法为直接标记，作者未说明标记的位置，机理不明确。64Cu标记NGR使用的螯合剂为D0TA，而NOTA比DOTA具有高的稳定性，尤其是针对68Ga,其次，NGR以3个甘氨酸作为连接剂连接在DOTA的羧基上，与连接在碳骨架上相比，会影响羧基上氧原子与放射性核素的配位。从体内的生物分布来看，64Cu标记NGR具有更高的肝脏摄取。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种NGR多肽放射性药物及其制备方法与应用，该药物具有更强的稳定性，其与CD13的亲和力更强，具有高的靶/非靶比值。本专利技术所采用的技术方案是: 一种NGR多肽单体及其二聚体配体化合物，其特征在于: 所述的NGR多肽单体配体化合物的结构如下:【权利要求】1.一种NGR多肽单体及其二聚体配体化合物，其特征在于: 所述的NGR多肽单体配体化合物的结构如下: 2.—种NGR多肽单体配体化合物的合成方法，其特征在于: 由以下步骤实现: 将3.42 mg /^SCN-Bn-NOTA溶于25 μ L二甲亚砜中，加入4.0 mg Gly3_NGR多肽单体，与溶解20 UL N，N-二异丙基乙胺的N，N-二甲基甲酰胺溶液200 μ L，混合反应I h后，加入含20 μ L乙酸的水溶液500 μ L中止反应，经分离纯化，收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物为N0TA-Gly3-NGR ； 所述Gly3-NGR多肽单体的序列为GGGCNGRC，4_8两个半胱氨酸缩合成环。3.—种NGR多肽二聚体的配体化合物的合成方法，其特征在于: 由以下步骤实现: 由以下步骤实现: 步骤一:合成 Boc-E(Gly3-NGR)2:将2.05 mg由Boc保护的谷氨酸活化酯Boc-E (OSu)2与10.0 mg Gly3_NGR多肽单体混合后溶于N，N- 二甲基甲酰胺，调节pH至8-9，室温搅拌8-12小时，分离纯化后收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物为Boc-E(Gly3-NGR)2 ; 所述Gly3-NGR多肽单体的序列为GGGCNGRC，4_8两个半胱氨酸缩合成环；步骤二:合成 E (Gly3-NGR) 2: 将Boc-E(Gly3-NGR)2溶于0.5 ml、体积比为三氟乙酸:三异丙基硅烷:水=95:2.5:2.5的溶液中，室温搅拌I小时；蒸干溶剂，残渣用0.5 mL水重新溶解，分离纯化后收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物为E(Gly3-NGR)2 ; 步骤三:合成 NOTA-E (Gly3-NGR) 2: 将 0.397 mg /^SCN-Bn-NOTA 溶于 25 μ L 二甲亚砜中，加入 1.0 mg E (Gly3_NGR) 2，与溶解20 UL N，N-二异丙基乙胺的N，N-二甲基甲酰胺溶液200 μ L，混合反应I h后，加入含20 μ L乙酸的水溶液500 μ L中止反应，分离纯化后收集目标物的馏分，合并收集液并冻干，获得产物为NOTA-E (Gly3-NGR) 2。4.一种NGR多肽放射性药物的制备方法，其特征在于: 由以下步骤实现: 在10-20 μ mol的NGR多肽单体或二聚体的配体化合物中，加入20 yL的1.25 M醋酸钠溶液、2 - 4 mL新鲜或纯化后的68Ga淋洗液，混匀，调节pH 2 - 3.6，室温到95°C反应5 - 10 min;室温冷却后加入1.25 M醋酸钠溶液50 μ L，过C18柱，用5 - 20 mL蒸馏水冲洗C18柱，用1- 2 mL、体积比为无水乙醇或生理盐水:乙醇=1: (1- 10)的溶液淋洗C18柱，经过0.22 μ m无菌液体滤`膜后收集或将淋洗液蒸干，加入生理盐水或蒸馏水，使溶液最终的渗透压与血浆等渗，过0.22 μπι无菌液体滤膜后收集，即为68Ga-N0TA-Gly3-NGR或68Ga-NOTA-E (Gly3_NGR) 2多肽放射性药物注射液。5.如权利要求4所述的一种NGR多肽放射性药物的制备方法所制备的NGR多肽放射性药物。6.如权利要求5所述的一种NGR多肽放射性药物在制备CD13阳性肿瘤显像诊断药物中的应用。【文档编号】C07K7/06GK103483422SQ201310428852【公开日】2014年1月1日 申请日期:2013年9月22日 优先权日:2013年9月22日 【专利技术者】汪静, 邵亚辉, 梁万胜, 杨卫东, 王喆, 康飞, 马晓伟, 李桂玉, 宗书, 陈凯 申请人:中国人民解放军第本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种NGR多肽单体及其二聚体配体化合物，其特征在于：所述的NGR多肽单体配体化合物的结构如下：?；所述的NGR多肽二聚体配体化合物的结构如下：。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：汪静，邵亚辉，梁万胜，杨卫东，王喆，康飞，马晓伟，李桂玉，宗书，陈凯，
申请(专利权)人：中国人民解放军第四军医大学，
类型：发明
国别省市：
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