检测脂蛋白（a）的免疫比浊试剂盒及其制备方法技术

本发明专利技术涉及检测脂蛋白（a）的免疫比浊试剂盒及制备方法，应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶放置于盒体内，应用液瓶中装有应用液，其组分：表面活性剂0.01%~1%，增敏剂0.1%~1%，防腐剂0.01~0.5%，氯化钠1%~20%，缓冲液20~200mmol/L；抗体悬浮液瓶中装有包被脂蛋白（a）单克隆抗体的乳胶悬液，其组分：包被脂蛋白（a）单克隆抗体的乳胶0.05%~0.5%，表面活性剂0.01%~1%，防腐剂0.01~0.5%，缓冲液20~200mmol/L；标准品瓶中装有脂蛋白（a）标准品。实现人血清脂蛋白（a）在生化仪上大批量定量检测，操作简单，灵敏度高。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及检测脂蛋白（a）的免疫比浊试剂盒及制备方法，应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶放置于盒体内，应用液瓶中装有应用液，其组分：表面活性剂0.01%~1%，增敏剂0.1%~1%，防腐剂0.01~0.5%，氯化钠1%~20%，缓冲液20~200mmol/L；抗体悬浮液瓶中装有包被脂蛋白（a）单克隆抗体的乳胶悬液，其组分：包被脂蛋白（a）单克隆抗体的乳胶0.05%~0.5%，表面活性剂0.01%~1%，防腐剂0.01~0.5%，缓冲液20~200mmol/L；标准品瓶中装有脂蛋白（a）标准品。实现人血清脂蛋白（a）在生化仪上大批量定量检测，操作简单，灵敏度高。【专利说明】检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒及其制备方法
本专利技术涉及免疫比浊的检测方法，尤其涉及检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒及其制备方法。
技术介绍
脂蛋白(a)快速检测酶免试剂盒，可用于人尿液、血浆和血清检测。见于动脉粥样硬化性心脑血管病、急性心肌梗死、家族性高胆固醇血症、糖尿病、大动脉瘤及某些癌症等。脂蛋白(a)由肝脏合成，是一组与纤溶酶原有显著同源性的糖蛋白，其受个体遗传基因的影响，呈现相对分子量大小不一的多态性。脂蛋白(a)为动脉硬化的独立危险因子。血清脂蛋白(a)含量主要由遗传决定，不受饮食、性别和年龄的影响，并与其他脂蛋白、载脂蛋白无关。脂蛋白(a)含量增高者心、脑动脉硬化的发病率明显高于正常者。脂蛋白(a)的水平可预测冠心病的转归，与急性心肌梗死的病程演化关系密切。脂蛋白(a)的正常参考范围为10-140mmol/L(0-300毫克/U。脂蛋白(a)增高可见于急性心肌梗死，缺血性心、脑疾病，动脉硬化症，高脂血症，糖尿病，慢性肾功能不全，冠状动脉搭桥后再狭窄，大动脉瘤及某些癌症。减低则见于肝脏疾病、酗酒、摄入新霉素等药物后。颗粒增强免疫透射比池法(particle—enhancedturbidimetric immunoassay,PETIA)是近年来出现的一种较为稳定、准确的体液蛋白均相免疫比浊检测方法，其基本原理是一定粒径胶乳颗粒的表面交联单克隆或多克降抗体，当交联有抗体的微球与抗原结合后，在短时间内会迅速聚集在一起，改变了反应体系的吸光度。这种改变与被测抗原的浓度有一定的相关性，在一定范闹内可以反映被测抗原的浓度。此技术通过颗粒增强的方式，放大了抗原抗体反应，弥补了普通透射比浊法灵敏度不够的缺点，同时又继承了透射比浊法稳定性好、方便快速的优点，克服了 ELISA和RIA方法的缺点，已越来越广泛应用于临床上各种微量蛋白的定量检测。日前，颗粒增强免疫透射比浊法广泛用于肾功能检测、心脑血管功能检测检测、糖尿病检测和脂类检测等，取得了良好的社会效益。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒及其制备方法。本专利技术的目的通过以下技术方案来实现: 检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒，特点是:包括盒体、应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶，所述应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶放置于盒体内，所述应用液瓶中装有应用液，应用液的组分及其重量百分比为:表面活性剂0.019Tl%，增敏剂0.19Tl%，防腐剂0.01-ο.5%，氯化钠1%-20%，缓冲液20-200mmol/L ;所述抗体悬浮液瓶中装有包被脂蛋白(a)单克隆抗体的乳胶悬液，乳胶悬液的组分及其重量百分比为:包被脂蛋白(a)单克隆抗体的乳胶0.05%-0.5%，表面活性剂0.01%-1%，防腐剂0.01-0.5%，缓冲液20-200mmol/L ;所述标准品瓶中装有脂蛋白(a)标准品。进一步地，上述的检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒，所述应用液中的表面活性剂为 Triton-X100、Triton-X405、Tween-20、Tween-40 或 Tween-80 ;所述应用液中的增敏剂为聚乙二醇2000，聚乙二醇4000，聚乙二醇6000或聚乙二醇8000 ;所述应用液中的防腐剂为叠氮钠或Proclin-300或两者混合物；所述应用液中的缓冲液为磷酸盐、碳酸盐、三羟基氨基甲烷或甘氨酸。所述乳胶悬液中的表面活性剂为TritOn-X100、TritOn-X405、Tween-20、Tween-40或Tween-80 ;所述乳胶悬液中的防腐剂为叠氮钠、Proclin-300或两者混合物；所述乳胶悬液中的缓冲液为磷酸盐、碳酸盐、三羟基氨基甲烷或甘氨酸。本专利技术检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒的制备方法，包括以下步骤: a)制备乳胶悬液:在磷酸盐缓冲液中将乳胶微球与包被脂蛋白(a)单克隆抗体混匀，30-40度旋转反应过夜，用清洗储存液进行清洗得到乳胶悬液，置于21度环境下保存； b)制备应用液:将表面活性剂、增敏剂、防腐剂、氯化钠和缓冲液同溶于水，得到应用液； c)配制脂蛋白(a)标准品:选用脂蛋白(a)标准品，由缓冲液稀释成浓度为1000mg/L。更进一步地，上述的检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒的制备方法，在步骤a)中，乳胶微球的粒径为100nnT500nm;所述磷酸盐缓冲液的pH为7.2~9.2，质量比为20-200mmol/L ;所述清洗储存液pH为7.4-9.0，清洗储存液的组分及其重量百分比为:表面活性剂0.01%~1%，防腐剂0.01~0.5%，缓冲液2(T200mmol/L，表面活性剂为Triton-XlOO,Triton-X405>Tween-20>Tween-40 或 Tween-80,防腐剂为叠氮钠、Proclin-300 或两者混合物，缓冲液为磷酸盐、碳酸盐、三羟基氨基甲烷或甘氨酸；所述乳胶微球与包被脂蛋白(a)单克隆抗体混合是等体积混合。更进一步地，上述的检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒的制备方法，步骤b)中，所述缓冲液PH为7.1-9.0，缓冲液为磷酸盐、碳酸盐、三羟基氨基甲烷或甘氨酸。再进一步地，上述的检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒的制备方法，步骤c)中，所述缓冲液为磷酸盐、碳酸盐、三羟基氨基甲烷或甘氨酸。本专利技术技术方案突出的实质性特点和显著的进步主要体现在: 通过颗粒增强的方式，放大了抗原抗体反应，弥补了普通透射比浊法灵敏度不够的缺点，同时又继承了透射比浊法稳定性好、方便快速的优点，克服了 ELISA和RIA方法的缺点，实现人血清脂蛋白(a)在生化仪上大批量定量检测，操作简单，灵敏度高，不易受人为因素干扰，检测稳定性和重复性好，能真实反映被检测物的含量，能利用生化分析仪进行检测，容易实现自动化，适于临床推广应用。【具体实施方式】检测脂蛋白(a)的免疫比浊试剂盒，包括盒体、应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶，应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶放置于盒体内，应用液瓶中装有应用液，应用液的组分及其重量百分比为:表面活性剂0.01%~?%，增敏剂0.1%~?%，防腐剂0.01-ο.5%，氯化钠1%~20%，缓冲液2(T200mmOl/L ;抗体悬浮液瓶中装有包被脂蛋白(a)单克隆抗体的乳胶悬液，乳胶悬液的组分及其重量百分比为:包被脂蛋白(a)单克隆抗体的乳胶0.05%~0.5%，表面活性剂0.01%~?%，防腐剂0.01-0.5%，缓冲液2(T200mmol/L ;标准品瓶中装有脂蛋白(a)标准品。本文档来自技高网...

【技术保护点】
检测脂蛋白（a）的免疫比浊试剂盒，其特征在于：包括盒体、应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶，所述应用液瓶、抗体悬浮液瓶和标准品瓶放置于盒体内，所述应用液瓶中装有应用液，应用液的组分及其重量百分比为：表面活性剂0.01%~1%，增敏剂0.1%~1%，防腐剂0.01~0.5%，氯化钠1%~20%，缓冲液20~200mmol/L；所述抗体悬浮液瓶中装有包被脂蛋白（a）单克隆抗体的乳胶悬液，乳胶悬液的组分及其重量百分比为：包被脂蛋白（a）单克隆抗体的乳胶0.05%~0.5%，表面活性剂0.01%~1%，防腐剂0.01~0.5%，缓冲液20~200mmol/L；所述标准品瓶中装有脂蛋白（a）标准品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘照关，康英杰，
申请(专利权)人：苏州照康生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：