本发明专利技术公开了一种几丁质结合蛋白CBP21及其编码基因和应用。本发明专利技术提供的蛋白质，为如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表的序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与几丁质结合的特性的由其衍生的蛋白质；（c）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有促进几丁质酶酶活功能的由其衍生的蛋白质。本发明专利技术提供的蛋白质，具有与几丁质结合的特性，可用于纯化或辅助鉴定几丁质，且该蛋白质具有促进几丁质酶的催化活性的作用，可以协助几丁质酶高效降解几丁质。综上所述，本发明专利技术提供的蛋白质具有广阔的应用价值，将产生具有的工业效益和经济价值。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了一种几丁质结合蛋白CBP21及其编码基因和应用。本专利技术提供的蛋白质，为如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表的序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与几丁质结合的特性的由其衍生的蛋白质；（c）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有促进几丁质酶酶活功能的由其衍生的蛋白质。本专利技术提供的蛋白质，具有与几丁质结合的特性，可用于纯化或辅助鉴定几丁质，且该蛋白质具有促进几丁质酶的催化活性的作用，可以协助几丁质酶高效降解几丁质。综上所述，本专利技术提供的蛋白质具有广阔的应用价值，将产生具有的工业效益和经济价值。【专利说明】几丁质结合蛋白CBP21及其编码基因和应用
本专利技术涉及几丁质结合蛋白CBP21及其编码基因和应用。
技术介绍
几丁质又名甲壳素、几丁聚糖，是N-乙酰_β-D-葡萄糖胺(Ν-Acetyl-β-D-Glucosamine,简称GlcNAc)以β-1, 4糖苷键连接起来的直链多聚物,是一种类似于植物纤维的六碳糖聚合体。其广泛存在于低等植物、菌类、藻类、节肢动物(虾、蟹)及昆虫的外壳和软骨、高等植物的细胞壁等，是自然界中仅次于纤维素的第二大天然生物有机资源，年生物合成量达100亿吨。几丁质酶(EC.3.2.14)能将几丁质β -1, 4糖苷键水解，最终分解为N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)。根据作用方式和酶解产物，将其分为内切几丁质酶、外切几丁质酶和几丁二糖酶。内切几丁质酶从几丁质链的任一部位切割，产生几丁质寡聚糖，如(GlcNAc)2,(GlcNAc) 3等。外切 几丁质酶又称N-乙酰-β -D-葡萄糖胺酶，此酶从几丁质寡糖或几丁质链的非还原末端依次切下N-乙酰-β -葡萄糖单体。几丁二糖酶则是专一性地将几丁二糖降解为几丁单糖。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供几丁质结合蛋白CBP21及其编码基因和应用。本专利技术提供的蛋白质，命名为CBP21蛋白，获自粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)，为如下(a)或(b)或(C): (a)由序列表的序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将(a)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与几丁质结合的特性的由其衍生的蛋白质；(C)将(a)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有促进几丁质酶酶活功能的由其衍生的蛋白质。本专利技术还保护具有所述CBP21蛋白的融合蛋白。所述融合蛋白为如下(d)或(e)或(f):(d)由序列表的序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(e)将(d)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与几丁质结合的特性的由其衍生的蛋白质；(f)将(d)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有促进几丁质酶酶活功能的由其衍生的蛋白质。编码所述CBP21蛋白的基因也属于本专利技术的保护范围。编码所述CBP21蛋白的基因可为如下(I)或(2)或(3)或(4)或(5)或(6)所述的DNA分子:(I)序列表的序列2自5’末端第I至519位核苷酸所示的DNA分子；(2)序列表的序列2所示的DNA分子；(3)在严格条件下与(I)或(2)限定的DNA序列杂交且编码具有与几丁质结合的特性的蛋白的DNA分子；(4)与(I)或(2)限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有与几丁质结合的特性的蛋白的DNA分子；(5)在严格条件下与(I)或(2)限定的DNA序列杂交且编码具有促进几丁质酶酶活功能的蛋白的DNA分子；(6)与(I)或(2)限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有促进几丁质酶酶活功能的蛋白的DNA分子。上述严格条件可为在 6XSSC，0.5%SDS 的溶液中，在 65°C下杂交，然后用 2XSSC,0.1%SDS 和 I XSSC,0.1%SDS各洗膜一次。编码所述融合蛋白的基因也属于本专利技术的保护范围。编码所述融合蛋白的基因可为如下(7)或(8)或(9)或(10)或(11)或(12)所述的DNA分子:(7)序列表的序列4自5’末端第I至660位核苷酸所示的DNA分子；(8)序列表的序列4所示的DNA分子；(9)在严格条件下与(7)或(8)限定的DNA序列杂交且编码具有与几丁质结合的特性的蛋白的DNA分子；(10)与(7)或(8)限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有与几丁质结合的特性的蛋白的DNA分子；(11)在严格条件下与(7)或(8)限定的DNA序列杂交且编码具有促进几丁质酶酶活功能的蛋白的DNA分子；(12)与(7)或(8)限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码具有促进几丁质酶酶活功能的蛋白的DNA分子。上述严格条件可为在 6XSSC，0.5%SDS 的溶液中，在 65°C下杂交，然后用 2XSSC、0.1%SDS 和 I XSSC,0.1%SDS各洗膜一次。含有所述基因的表达盒、重组载体、转基因细胞系或重组菌均属于本专利技术的保护范围。本专利技术还保护所述CBP21蛋白或所述融合蛋白的应用，为如下(I )或(II)或(III)或(VI):( I )制备具有与几丁质结合的功能的产品；(II)制备具有促进几丁质酶酶活的功能产品；(III)检测或纯化几丁质；(VI)促进几丁质酶酶活。所述几丁质酶可为ChiCD3蛋白或Chi92蛋白。 本专利技术还保护一种具有促进几丁质酶酶活的功能的产品和/或具有与几丁质结合的功能的产品，包括所述CBP21蛋白或所述融合蛋白。所述几丁质酶可为ChiCD3蛋白或Chi92蛋白。本专利技术还保护一种用于降解几丁质的产品，包括几丁质酶和促进剂；所述促进剂为所述CBP21蛋白或所述融合蛋白。所述几丁质酶可为ChiCD3蛋白或Chi92蛋白。所述Chi⑶3蛋白为如下(i)或(ii)或(iii):( i)序列表中序列7自N末端第34至1019位氨基酸残基组成的蛋白质；(ii)由序列表中序列7所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(iii)将(i )或(?)经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有几丁质酶功能的由其衍生的蛋白质。所述Chi92蛋白为如下(iv)或(v):(iv)由序列表中序列9所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(V )将序列表中序列9所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有几丁质酶活性的由其衍生的蛋白质。以上任一所述的几丁质具体可为虾壳粉。本专利技术提供的蛋白质，具有与几丁质结合的特性，可用于纯化或辅助鉴定几丁质，且该蛋白质具有促进几丁质酶的催化活性的作用，可以协助几丁质酶高效降解几丁质。综上所述，本专利技术提供的蛋白质具有广阔的应用价值，将产生具有的工业效益和经济价值。【专利附图】【附图说明】图1为标准曲线以及标准曲线方程。图2为CBP21蛋白溶液进行SDS-PAGE图谱。图3为实施例3的结果。图4为实施例4的步骤三的结果。图5为实施例4的步骤四的结果。【具体实施方式】以下的实施例便于更好地理解本专利技术，但并不限定本专利技术。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置本文档来自技高网...
【技术保护点】
CBP21蛋白或具有所述CBP21蛋白的融合蛋白；所述CBP21蛋白为如下（a）或（b）或（c）：（a）由序列表的序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；（b）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有与几丁质结合的特性的由其衍生的蛋白质；（c）将（a）经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有促进几丁质酶酶活功能的由其衍生的蛋白质。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：周志刚，霍凤敏，杨雅麟，徐俐，何夙旭，余强，张美超，李欢琴，
申请(专利权)人：中国农业科学院饲料研究所，
类型：发明
国别省市：
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