一种卡贝缩宫素的纯化方法技术

技术编号:9430014 阅读:248 留言:0更新日期:2013-12-11 20:40
本发明专利技术涉及一种卡贝缩宫素的纯化方法,其特征包括以下步骤:步骤1,将卡贝缩宫素粗品用水溶解,调节pH到酸性;步骤2,按体积分数设置梯度,使用流动相A冲洗聚合物反相填料柱;步骤3,将步骤1溶液载入聚合物反相填料中;步骤4,按体积分数设置梯度,洗脱梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。收集全部洗脱馏分;步骤5,将洗脱馏分经过干燥得到纯品卡贝缩宫素。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及,其特征包括以下步骤:步骤1,将卡贝缩宫素粗品用水溶解,调节pH到酸性;步骤2,按体积分数设置梯度,使用流动相A冲洗聚合物反相填料柱;步骤3,将步骤1溶液载入聚合物反相填料中;步骤4,按体积分数设置梯度,洗脱梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。收集全部洗脱馏分;步骤5,将洗脱馏分经过干燥得到纯品卡贝缩宫素。【专利说明】
:本专利技术涉及一种多肽类药物的纯化方法,是一种合成的具有激动剂性质的长效催产素九肽类似物的纯化方法。
技术介绍
:卡贝缩宫素为一种环状多肽,结构式如下:【权利要求】1.一种纯化卡贝缩宫素的方法,该方法采用聚合物反相色谱法,可使成品卡贝缩宫素中的杂质D-CyS5-卡贝缩宫素含量降低到0.1%以下,其特征在于,所述方法包括以下步骤: 步骤1,将卡贝缩宫素粗品用水溶解,调节pH到酸性, 步骤2,按体积分数设置梯度,使用流动相A冲洗聚合物反相填料; 步骤3,将步骤I溶液载入聚合物反相填料柱中; 步骤4,按体积分数设置梯度,洗脱梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。收集全部洗脱馏分, 步骤5,将洗脱馏分经过干燥得到纯品卡贝缩宫素, 其中,聚合物反相填料柱为(UniPSTM10,10ym,50mmX250mm); 流动相:A为0.3%醋酸水溶液; 流动相B为乙腈; 梯度程序为:初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%,流速为:80mL / min, 检测波长为220nm。2.根据权利要求1所述的方法,其特征是:包括以下步骤: 步骤1,样品处理: 将1.70g卡贝缩宫素粗肽溶解于IOOOml纯净水中,使用醋酸调节pH为3.4 ; 步骤2,平衡 按体积分数设置梯度,使用100%的流动相A冲洗聚合物反相填料柱IOmin ; 步骤3,上样 将样品溶液载入交换柱中; 步骤4,洗脱 按体积分数设置梯度,梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。分部收集洗脱馏分;步骤5,冻干 将洗脱馏分经过冻干得到纯品卡贝缩宫素; 其中, 聚合物反相填料柱为(UniPS?10,10ym,50_X250mm); 流动相:A为0.3%醋酸水溶液; 流动相B为乙腈; 梯度程序为:初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%,流速为:80mL / min, 检测波长为220nm。【文档编号】C07K1/20GK103435687SQ201310399939【公开日】2013年12月11日 申请日期:2013年9月5日 优先权日:2013年9月5日【专利技术者】路杨, 杨东晖, 周亮, 张阳萍 申请人:杭州诺泰制药技术有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种纯化卡贝缩宫素的方法,该方法采用聚合物反相色谱法,可使成品卡贝缩宫素中的杂质D?Cys5?卡贝缩宫素含量降低到0.1%以下,其特征在于,所述方法包括以下步骤:步骤1,将卡贝缩宫素粗品用水溶解,调节pH到酸性,步骤2,按体积分数设置梯度,使用流动相A冲洗聚合物反相填料;步骤3,将步骤1溶液载入聚合物反相填料柱中;步骤4,按体积分数设置梯度,洗脱梯度的初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%。收集全部洗脱馏分,步骤5,将洗脱馏分经过干燥得到纯品卡贝缩宫素,其中,聚合物反相填料柱为(UniPSTM10,10μm,50mm×250mm);流动相:A为0.3%醋酸水溶液;流动相B为乙腈;梯度程序为:初始状态流动相B为5%,保持2分钟,然后在5分钟内将流动相B比例增至25%,然后在30分钟内将流动相B比例增至40%,流速为:80mL/min,检测波长为220nm。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:路杨杨东晖周亮张阳萍
申请(专利权)人:杭州诺泰制药技术有限公司
类型:发明
国别省市:

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