无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法及应用技术

本发明专利技术提供了一种无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法，包括如下步骤：1）第一轮反应：以DNA模板、重组酶聚合酶、第一轮引物进行第一轮反应；2）第二轮反应：以第一轮反应产物为模板，加入重组酶聚合酶、第二轮引物，进行第二轮反应；3）第三轮反应：以第二轮反应产物为模板，加入重组酶聚合酶、第三轮引物进行第三轮反应。本发明专利技术还提供了用于无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法的引物和试剂盒。本发明专利技术的另一目的是提供所述方法、引物、试剂盒在DNA序列扩增中的应用。本发明专利技术的方法不用PCR仪，能简单、高效、准确扩增DNA侧翼序列。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
用于无需PCR仪的侧翼核酸序列快速准确扩增方法的引物，其为：RPA?nest1c：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiicggtc（如SEQ?ID?No.1所示）；RPA?nest1a：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiiaggtc（如SEQ?ID?No.2所示）；RPA?nest1t：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiitggtc（如SEQ?ID?No.3所示）；RPA?nest1g：tcacagaagtatgccaagcgaggiiiiigggtc（如SEQ?ID?No.4所示）；RPA?nest2：tcacagaagtatgccaagcg（如SEQ?ID?No.5所示）；RPA?nest3：cagaagtatgccaagcgagg（如SEQ?ID?No.6所示）。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：胡广隆，程丽莉，黄武刚，
申请(专利权)人：北京市农林科学院林业果树研究所，
类型：发明
国别省市：