一种棒状杆菌基因连续敲除系统及其构建方法和应用技术方案

本发明专利技术公开了一种棒状杆菌基因连续敲除系统的构建方法和应用，属于基因工程技术领域。其包括模板质粒及温敏表达质粒；所述模板质粒提供两端带有loxp或变异loxL/R位点的kan片段，又称kan盒；所述温敏表达质粒携带Cm抗性基因cat及温敏C.glutamicum复制子，表达Cre重组酶，用于去除Km抗性基因kan。本发明专利技术的棒状杆菌连续敲除系统，可普遍用于对棒状杆菌的连续的基因改造，操作简便，高效。利用该敲除系统，成功的完成对棒状杆菌三大典型亚种基因组上基因的（连续）敲除，证明该系统适用于棒状杆菌代谢产物的研究和生产。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种棒状杆菌基因连续敲除系统，其特征在于包括模板质粒及温敏表达质粒；所述模板质粒提供两端带有loxp或变异loxL/R位点的kan片段，又称kan盒；所述温敏表达质粒携带Cm抗性基因cat及温敏C.glutamicum复制子，表达Cre重组酶，用于去除Km抗性基因kan。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王小元，胡瑾瑜，李颜颜，谭延振，李烨，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：