【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种磷酸化肽聚糖的制备方法,其特征具体包括以下步骤:(1)肽聚糖的制备?a.菌体收集:将活化的嗜酸乳杆菌按体积百分比3?5%的接种量接种于MRS液体培养基,37?40℃恒温培养箱静置培养16?24h,5000?8000r/min离心10?20min收集菌体,并用蒸馏水反复洗涤直至菌体呈乳白色;?b.去磷壁酸:将步骤a得到的菌体按1g:9ml的固液比悬浮于浓度为40?50%的氢氟酸溶液中,4℃放置过夜,7000?9000?r/min离心10?20min收集不含磷壁酸的细胞壁沉淀,并用蒸馏水洗涤沉淀至中性;c.酶解破壁:将步骤b得到的沉淀按2g:5ml的固液比溶于糜胰蛋白酶磷酸缓冲液中,37?40℃摇床110?130r/min振荡15?17h,沸水浴灭活4?6min,于1500?2500r/min的转速下离心4?6min,弃去未溶解的蛋白酶沉淀,将上清液于8000?12000r/min离心10?20min,得到的沉淀用蒸馏水离心洗涤;?d.除脂:将步骤c洗涤后得到的沉淀按1g:1ml的固液比溶于乙醚中,搅拌3?5h后,7000?9000r/min离心10?20min收集沉淀,用蒸馏水洗涤至 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:潘道东,王琳珺,曾小群,孙扬赢,曹锦轩,
申请(专利权)人:宁波大学,
类型:发明
国别省市:
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