结合IL-17A和IL-17F的抗体分子制造技术

本发明专利技术涉及对IL-17A和IL-17F的抗原决定簇具有特异性的抗体分子，所述抗体分子的治疗用途及用来生产所述抗体分子的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】结合IL-17A和IL-17F的抗体分子本专利技术涉及对IL-17A和IL-17F的抗原决定簇具有特异性的抗体分子。本专利技术也涉及所述抗体分子的治疗用途以及用来生产所述抗体分子的方法。IL-17A（最初命名为CTLA-8也就是已知的IL-17）是促进炎症的细胞因子而且是IL-17家族的创始成员（Rouvier等人,1993,J.Immunol.150:5445-5456）。随后，鉴定出另外5个家族成员(IL-17B–IL-17F)，包括与IL-17A共享约55%的氨基酸序列同源性(Moseley等人,2003,CytokineGrowthFactorRev.14:155-174)的最相关的IL-17F（ML-1）。最近定义的自身免疫相关的辅助型T细胞亚群Th17表达IL-17A和IL-17F，也表达IL-21和IL-22特征细胞因子(Korn等人,2009,Annu.Rev.Immunol.27:485-517)。IL-17A和IL-17F表达为同源二聚体，但也能表达为IL-17A/F异源二聚体(Wrightetal.2008,J.Immunol.181:2799-2805)。IL-17A和F信号通过受体IL-17R、IL-17RC或IL-17RA/RC受体复合物(Gaffen2008,Cytokine.43:402-407)。IL-17A和IL-17F都与多种自身免疫疾病相关。因此，对于治疗IL-17调节的疾病，IL-17A和IL-17F的双价拮抗剂会比单一拮抗剂更有效。WO2007/106769、WO2008/047134、WO2009/136286和WO2010/025400已描述了结合IL-17A和IL-17F的抗体。本专利技术提供能同时以高亲和力结合IL-17A和IL-17F的改进的中和抗体。特别是，本专利技术所述抗体能特异性地结合IL-17A和IL-17F两者，即所述抗体不结合其他亚型的IL-17。优选地，本专利技术所述抗体也结合IL-17A/IL-17F异源二聚体。优选地，本专利技术所述抗体中和IL-17A和IL-17F的活性。在一个实施方案中，本专利技术所述抗体也中和IL-17A/IL-17F异源二聚体的活性。本专利技术所述抗体因此具有可以抑制IL-17A和IL-17F两者的生物活性的有利特性。因此，本专利技术也提供了将所述抗体应用于治疗和/或防治通过IL-17A或IL-17F的任一个或两者同时介导的疾病，如自身免疫或炎症疾病或癌症。此处所用术语“中和抗体”描述了能够中和IL-17A和IL-17F两者的生物信号传导活性的抗体，例如通过阻断IL-17A和IL-17F与其一个或多个受体的结合以及通过阻断IL-17A/IL-17F异源二聚体与其一个或多个受体结合。应认识到，此处所用术语“中和”是指生物信号传导活性的减少，其可以是部分的或完全的。进一步，应认识到，抗体对IL-17A和IL-17F的活性的中和程度可以是相同的或者不同的。在一个实施方案中，IL-17A/IL-17F活性的中和程度与IL-17A或IL-17F活性的中和程度可以是相同的或不同的。在一个实施方案中，本专利技术所述抗体特异性地结合IL-17A和IL-17F。特异性地结合意为抗体对IL-17A和IL-17F多肽（包括IL-17A/IL-17F异源二聚体）比其他多肽具有更大的亲和力。优选地，IL-17A和IL-17F多肽是人源的。在一个实施方案中，所述抗体也结合猕猴的IL-17A和IL-17F。IL-17A和IL-17F多肽或其两者的混合物或者表达一个或两个所述多肽的细胞可用来生产特异性识别两个多肽的抗体。IL-17多肽（IL-17A和IL-17F）可以是“成熟的”多肽或者其生物活性片段或衍生物，其中优选地包括受体结合位点。优选地，IL-17多肽是成熟的多肽。IL-17多肽可通过本领域技术人员熟知的处理过程从包含表达系统的基因工程改造过得宿主细胞中生产，或可从天然生物来源回收。在本申请中，术语“多肽”包括肽、多肽以及蛋白质。上述这些可以互换使用除非另有说明。IL-17多肽在一些情况下可以是更大的蛋白质的一部分，比方说例如融合到一个亲和标签的融合蛋白质。针对这些多肽生成的抗体可以通过使用熟知的常规方案将多肽施用于动物而获得，其中动物免疫是必须的，特别是非人的动物，参见例如实验免疫学手册（HandbookofExperimentalImmunology,D.M.Weir(ed.),Vol4,BlackwellScientificPublishers,Oxford,England,1986）。许多温血动物，比如兔、小鼠、大鼠、羊、牛或猪可被免疫。但是通常优选小鼠、兔、猪和大鼠。用于本专利技术的抗体包括完整的抗体和其功能活性片段或衍生物并且可以是但不限于单克隆、多价、多特异性、双特异性、人源化或嵌合抗体，域抗体例如VH、VL、VHH、单链抗体、Fv、Fab片段、Fab’和F(ab’)2片段以及上述任一种的表位结合片段。其他抗体片段包括在国际专利申请WO2005003169、WO2005003170和WO2005003171中描述的那些。其他抗体片段包括在WO2009040562和WO2010035012中分别描述的Fab-Fv和Fab-dsFv片段。抗体片段及其生产方法是本领域技术人员所熟知的，参见例如Verma等人,1998,JournalofImmunologicalMethods,216,165-181;Adair和Lawson,2005.Therapeuticantibodies.DrugDesignReviews-Online2(3):209-217.用于本专利技术的抗体包括免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，例如包含特异性结合抗原的抗原结合位点的分子。本专利技术所述的免疫球蛋白分子可以是免疫球蛋白分子的任一类型(例如IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)或亚型。可通过本领域已知的任何方法来制备单克隆抗体，例如杂交瘤技术（Kohler&Milstein,1975,Nature,256:495-497)，三源杂交瘤技术，人B细胞杂交瘤技术（Kozbor等人,1983,ImmunologyToday,4:72）以及EBV-杂交瘤技术（Cole等人,MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,pp77-96,AlanRLiss,Inc.,1985）用于本专利技术的抗体也可以用单个淋巴细胞抗体的方法产生，通过克隆和表达从为生产特定抗体筛选出来的单个淋巴细胞产生的免疫球蛋白可变区cDNAs，其通过例如Babcook,J.等人,1996,Proc.Natl.Acad.Sci.USA93(15):7843-7848l;WO92/02551;WO2004/051268以及国际专利申请号WO2004/106377所描述的方法筛选。人源化抗体是来自非人物种的抗体分子，其具有来自非人物种的一个或多个互补决定区（CDRs）以及来自人免疫球蛋白分子的框架区（参见，例如US5,585,089;WO91/09967）嵌合抗体是通过免疫球蛋白基因编码的那些抗体，其已被基因工程改造从而其轻链和重链基因由属于不同物种的免疫球蛋白基因片段构成。这些嵌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2011.01.14 US 61/432,8141.结合人IL-17A和人IL-17F的中和抗体，其具有轻链和重链，其中轻链可变区具有SEQIDNO:7中所示的序列并且重链可变区具有SEQIDNO:9中所示的序列。2.根据权利要求1所述抗体，其也结合IL-17A/IL-17F异源二聚体。3.根据权利要求1或2所述抗体，其中抗体为完整抗体或其功能活性片段。4.根据权利要求3所述抗体，其中抗体片段选自Fab、Fab’、F(ab’)2、scFv和Fv片段。5.根据权利要求1所述抗体，其中抗体是多特异性的抗体。6.结合人IL-17A和人IL-17F的中和抗体，其具有包括SEQIDNO:15中所示的序列的重链和包括SEQIDNO:11中所示的序列的轻链。7.分离的DNA序列，其编码根据权利要求1-6中任一项所述抗体的重链和轻链。8.包括根据权利要求7所述DNA序列的克隆载体或表达载体。9.根据权利要求8所述载体，其中载体包括SEQIDNO:13和SEQIDNO:17中所示的序列。10.包括一个或多个根据权利要求8或权利要求9所述克隆载体或表达载体的宿主细胞。11.用于生产根据权利要求1-6中任一项所述抗体的方法，其包括培养权利要求10所述宿主细胞和分离所述抗体。12.药学组合物，其包括与一种或多种药学可接受的赋形剂、稀释剂或载体组合的根据权利要求1-6中任一项所述抗体。13.根据权利要求12所述药学组合物，其另外包括其他活性成分。14.根据权利要求1所述抗体或根据权利要求12或13所述药学组合物，用来在治疗中使用。15.根据权利要求1所述抗体或根据权利要求12或13所述药学组合物，用于治疗或防治病理状况，其选自感染，感染相关的内毒素休克，关节炎，慢性阻塞性气道疾病，急性肺损伤，慢性盆腔炎，阿尔茨海默病，炎症性肠病，肠道易激综合征，卡斯尔曼病，脊柱关节病，皮肌炎，心肌炎，葡萄膜炎，乳糜泄，胆囊疾病，藏毛病，腹膜炎，银屑病，特应性皮炎，血管炎，手术粘连，中风，I型糖尿病，莱姆关节炎，脑膜脑炎，免疫介导的中枢和外周神经系统的炎性失调，自身免疫失调，胰腺炎，创伤，移...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·亚当斯，T·S·贝克，A·D·G·劳森，
申请(专利权)人：UCB医药有限公司，
类型：
国别省市：