【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种实现水稻目的基因中靶标片段上的随机插入和/或随机缺失的基因改造方法,是利用gRNA:Cas9系统在水稻中对目的基因进行改造,该系统包括向导RNA和Cas9核酸酶,其特征在于:所述方法包含以下步骤:使水稻组织中含有向导RNA和Cas9核酸酶,然后在向导RNA和Cas9核酸酶共同作用下,目的基因上的双链靶标片段被剪切,再通过水稻细胞的自身DNA修复功能,最终实现水稻目的基因中靶标片段上的随机插入和/或随机缺失;所述靶标片段位于所述目的基因上;所述双链靶标片段中的一条链具有如下结构:5’?NX?NGG?3’,N表示A、G、C和T中的任一种,14≤X≤30;所述向导RNA依次由能够与所述靶标片段互补结合的RNA片段和骨架RNA片段连接而成;所述骨架RNA片段依次由tracrRNA、crRNA嵌合形成类似发夹结构的RNA,所述骨架RNA片段可与Cas9核酸酶结合。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:高彩霞,单奇伟,王延鹏,李君,陈坤玲,
申请(专利权)人:中国科学院遗传与发育生物学研究所,
类型:发明
国别省市:
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