【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种噬菌体抗体库,其特征在于:在pIT2载体的SfiI和XhoI酶切位点之间组装抗体重链的可变领域基因,在SalI和NotI酶切位点之间组装抗体轻链的可变领域基因,然后通过大肠杆菌作为增幅的宿主而制作,该抗体库中盐酸克伦特罗特异性抗体可以通过利用针对盐酸克伦特罗与牛血清蛋白偶联物的淘筛而富集,进而开发单克隆的抗盐酸克伦特罗的抗体,噬菌体抗体库的质粒的构建为:①?利用盐酸克伦特罗和牛血清蛋白的偶联物免疫Balb/c小鼠后,摘取小鼠的脾脏,从脾脏中提取总RNA,并以其为模板,以Oligo(dT)6为引物合成cDNA第一链;②利用设计合成的抗体特异性引物经RT?PCR分别扩增抗体重链可变领域(VH)的基因和抗体轻链可变领域(VL)的基因;③纯化PCR增幅产物后使用相应的限制酶处理基因并将其与pIT2载体连接,然后转化大肠杆菌,噬菌体抗体库中含有具有以下核苷酸序列的基因及氨基酸序列的抗体:????抗体重链可变领域(VH)的核苷酸和氨基酸序列,SEQ?ID?No.1?为:????????抗体轻链可变领域(VL)的核苷酸和氨基酸序列,SEQ?ID?No.2?为:??在噬菌体抗体库中:增幅的抗体重链 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:董金华,董益阳,
申请(专利权)人:潍坊科技学院,济南格致生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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