本发明专利技术提供了一种同时检测11个耳聋易感基因的PCR-LDR检测试剂盒，包括包装盒体(1)，PCR扩增和LDR反应试剂(2)-(5)；包括6对PCR引物、12组探针、1组通用探针和11组检测探针。该方法灵敏度高，判读清晰准确；相对传统测序技术，本试剂盒能完成一次性获得11个关键耳聋基因突变诊断结果的高通量筛查，具有经济、高效和高准确率等优势。
【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种同时检测11个耳聋易感基因的PCR?LDR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括包装盒体(1)，PCR扩增和LDR反应试剂；所述PCR扩增试剂分别为PCR扩增Reaction?Mix(2)和(3)；所述LDR反应试剂为LDR反应Probe?Mix(4)和(5)；所述11个耳聋易感基因为GJB2：235delC、299?230delA＞T、176?191del16，SLC26A4：IVS7?2A＞G、2168A＞G、1226G＞A、1174A＞T、1975G＞C、2027T＞A，线粒体12SrDNA：1555A＞G和1494C＞T；LDR通用模板：CCCATTAGTCTTGCGAGTACAGGTTTGCG通用荧光探针：P?GAATCAATCAGACTG?FAM???15其中用于GJB2基因三个位点的引物序列如下：GJB2_176_M：P?TGGCTGCAGGGTGTTGCATTTTCGCAAACCTGTACTCGJB2_176del：TTTGCTAACTTCCCCTCTGACCCAGJB2_176_NOdel：TTTATCGTAGCACACGTTCTTGCAGCCGJB2_235_M：P?GCTCGATAATGGGAAGTAGTTTTTTCGCAAACCTGTACTCGJB2_235_delC：TTTTTGCGTGGACACGAAGATCAGCTGCAGJB2_235_C：TTTTTTTGCGTGGACACGAAGATCAGCTGCAGGJB2_299_M：P?ATGTGCGGTAGGAAACGTGTTTTTTTTTTCGTAAACGGTACTCGJB2_299_delAT：TTTTTTTTTTTGGTGCCTTTCCTCTTCTTCTCGJB2_299_AT：TTTTTTTTTTTTGACTATAGTCCTCTTCTTCTCATSLC26A4基因的6个检测位点引物序列如下：1975_M：P?AAGGCGTTGCTTTGAAACTTTTCGCAAACGAGTTGTC1975_C：TAAAGATCATGCTCCAGTCTCACCAAG1975_G：TTTAAAGATCATCCTCCACCTTTCAGCTACAC2027_M：P?GAGTTCTCACTAAGAACAACTTTTTTTCGCAAACCTCTAATC2027_T：TTTTTTAAAACCCTCAACACTTAGCCCCGCA2027_A：TTTTTTTTTAAAACTCAAAGGCTAACGGCT1174_M：P?GCCGAACCCACTACGCATGAATTTTTTTTTCGCAAAATCAGCC1174_A：TTTTTTTCGGCAAAGAACTGAGCTCATT1174_T：TTTTTTTTTTCACCAGAATGATCCCTCAGAATCTG1226_M：P?CCATCAAGAGCAGTACGTGACACTTTTTTTTTTTTTTCGCCTATGTGC1226_G：TTTTTTTTTCCTGTCTCCTGCACCTGGAGTTAC1226_A：TTTTTTTTTTTTCCGATGCGCTAGGCTGAACCTCTIVS7?2_M：P?GAAATCCGAACTTAATCATGTGAATTTTTTTTTTTTTTTTTTCGCAAATGTACTC56IVS7?2_A：TTTTTTTTTTTGAAATCCCAGTAGCAATAATTGTCTIVS7?2_G：TTTTTTTTTTTTTTGAAAGCAGTAGCCCTTATCCGACC2168_M：P?GGCTGTCTAAACAATGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCCTAAACCAGGACAC2168_A：TTTTTTTTTTTTTTTGGTTCCCATAGGTAGACTATAGGTCAT?????2168_G： TTTTTTTTTTTTTTTTTTGGTTCTGTCGAATAATCTACCTCACTAC12s?rRNA基因的2个检测位点的引物序列信息如下：1494_M：P?CGATCGGGCGTCAGTGTCCCCGCTTTTTTTTTTTTCGCACCTCTGTACTC1494_C：TTTTTTTTTTTCCTTTGAGATCTATACTTCTTGAGG1494_T：TTTTTTTTTTTTTCCTTTGATCCTTATACAATGAGCCAACAA1555_M：P?ATCATCCCTATAATCTGCGTATTTTTTTTTTTTTTTCGAATTCATCACTC1555_G：TTTTTTTTTTTTTTAGTTAACTTACCCAGTTACTGACTTAG1555_A：TTTTTTTTTTTTTTTTTAGCATCACGGTATAGATGTGCAACGACCCTA。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：步迅，张全芳，刘艳艳，夏子芳，
申请(专利权)人：山东省农业科学院高新技术研究中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。