mRNA3’末端文库及其构建、测序方法和用途技术

本发明专利技术公开了mRNA3’末端文库及其构建、测序方法和用途。其中，构建mRNA3’末端文库的方法包括：（a）将待测样本的总RNA进行片段化处理；（b）以RNA片段作为模板进行第一反转录合成cDNA第一链；（c）将DNA-RNA杂合体进行第一反转录合成cDNA第二链；（d）以双链cDNA作为模板进行体外转录；（e）以cRNA作为模板进行第二反转录合成cDNA第一链；（f）以第二反转录产物作为模板进行PCR扩增；（g）回收300-500bp的PCR产物，以便获得目的片段，该目的片段构成所述mRNA3’末端文库。该方法简单易行、成本低、可重复性好，适用于微量样本，并且获得的mRNA3’末端文库包含生物信息准确、信息量大，能够有效用于确定待测样本3’UTR的序列信息。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种构建mRNA3’末端文库的方法，其特征在于，包括以下步骤：（a）将待测样本的总RNA进行片段化处理，以便获得RNA片段；（b）以所述RNA片段作为模板，利用第一引物进行第一反转录合成cDNA第一链，以便获得DNA?RNA杂合体；（c）将所述DNA?RNA杂合体进行第一反转录合成cDNA第二链，以便获得双链cDNA；（d）以所述双链cDNA作为模板进行体外转录，以便获得cRNA；（e）以所述cRNA作为模板，利用第二引物进行第二反转录合成cDNA第一链，以便获得第二反转录产物；（f）以所述第二反转录产物作为模板进行PCR扩增，以便获得PCR产物；（g）回收300?500bp的PCR产物，以便获得目的片段，所述目的片段构成所述mRNA3’末端文库，其中，所述第一引物具有SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列，所述第二引物具有SEQ?ID?NO：2所示的核苷酸序列。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：徐安龙，孙雨，付永贵，李宇新，梁嘉慧，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：