基于矿物油饱和PDMS材料的数字PCR芯片的制作方法技术

技术编号:9236071 阅读:316 留言:0更新日期:2013-10-09 23:33
本发明专利技术拟涉及一种基于矿物油饱和PDMS材料数字PCR芯片的制备方法。其特征在于将一定量矿物油(液体石蜡)的PDMS单体制备PDMS数字PCR芯片,芯片包括乳滴生成结构、乳滴收集结构两部分。乳滴在同一芯片上制作、收集,然后在同一芯片上进行PCR扩增。该芯片避免了PDMS对数字PCR体系中油相的吞噬,有利于维持PCR反应过程中乳滴及PCR反应的稳定性。而且与目前数字PCR芯片技术相比,成本低,操作简便,应用前景非常广泛。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
基于矿物油饱和PDMS材料的数字PCR芯片的制作方法,其特征在于包括芯片的制备、乳滴的生成以及PCR扩增,(1)芯片的制备包括模具的设计和制备,先制作微管道和进样槽,然后是PDMS材料的制备,PDMS材料制备是先用将一定量的矿物油混合的PDMS单体中,在PDMS芯片交联固化过程中,矿物油自动的填充其中的空隙,最大限度的抑制制作好的PDMS芯片对数字PCR体系中油相的吞噬,维持PCR反应过程中乳滴及PCR反应的稳定性;每1ml?PDMS中含100?400μl矿物油,所述的矿物油为液体石蜡;(2)乳滴的生成微流控芯片乳滴的形成通过“十”字型或“T”字型两种芯片结构形式,通过调整油相及水相进样管道的尺寸、长度的不同,对所形成乳滴的尺寸或浓度进行调控;乳滴在同一芯片上制作、收集,然后在同一芯片上进行PCR扩增;(3)PCR扩增将进样完毕的芯片平放在具有原位PCR功能的PCR仪上进行扩增,扩增的变性温度与复性、扩增温度均与乳滴中所包裹PCR混合液的条件相同,但适当延长保温时间。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:景奉香李刚高雁景晓刚贾春平张冀申金庆辉赵建龙
申请(专利权)人:中国科学院上海微系统与信息技术研究所
类型:发明
国别省市:

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