一种可同时检测多个HBV耐药突变位点的新方法技术

乙型肝炎病毒基因突变是导致病毒耐药的基础，现阶段的检测技术存在着较低的灵敏度、价格较贵、操作不够简便、数据分析工作量大或存在碱基错配等缺点。本发明专利技术提供了一种高灵敏度的COLD-PCR联合测序技术并将其应用于HBV已知和未知多个耐药突变的检测，具有高度灵敏、简便、价廉和实用的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种可同时检测多个乙型肝炎病毒耐药突变位点的检测方法，步骤为：1）设计和合成一对引物，如SEQ?ID?No.1?2所示；2）提取乙型肝炎病毒DNA，并以步骤1所述的一对引物为扩增引物进行扩增，测定扩增产物的熔解温度Tm；依据熔解温度Tm，通过改变扩增变性温度确定关键变性温度Tc；3）通过Tc建立COLD?PCR反应体系条件并反应得到COLD?PCR产物；4）将COLD?PCR产物进行sanger双向序列测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：欧启水，刘灿，商红艳，曾勇彬，陈添彬，
申请(专利权)人：福建医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：